血流感染病原菌分布及其体外药物敏感性试验结果分析

血流感染病原菌分布及其体外药物敏感性试验结果分析 血流感染病原菌分布及其体外药物敏感性试验结果分析

沈振华， 刘兴晖， 朱 慧， 姚肖岚

（上海市浦东新区公利医院检验科，上海 200135）

摘要：目的 了解引起上海市浦东新区公利医院住院患者血流感染的病原菌分布特征及其耐药性，为临床选择有效的抗菌药物治疗血流感染提供参考依据。方法 收集2012年7月至2015年6月上海市浦东新区公利医院住院患者血流感染时分离的病原菌380株，采用VITEK2 Compact全自动微生物分析系统进行细菌鉴定及药物敏感性试验，并使用WHONET 5.6软件对结果进行分析。结果 革兰阳性球菌157株，占41.3%，以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和肠球菌为主；需氧革兰阴性杆菌203株，占53.4%，以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌为主；念珠菌20株，占5.3%，以白念珠菌为主。金黄色葡萄球菌对苯唑西林的耐药率为47.6%，铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率分别23.1%和36.4%，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对厄他培南的耐药率分别为0.0%和11.1%，白念珠菌对氟康唑的耐药率为30.8%。结论 凝固酶阴性葡萄球菌和大肠埃希菌是引起上海市浦东新区公利医院住院患者血流感染的最常见病原菌，所分离的细菌耐药率较高，临床应重视抗菌药物的合理使用。

关键词：血流感染；病原菌；耐药率

血流感染是一种常见的医院感染，具有起病急、病情凶险、预后差、病死率高等特点，是临床感染性疾病患者死亡的主要原因之一［1］。血培养是目前诊断血流感染的金标准，血培养结果的及时性和准确性对血流感染的正确诊断、有效治疗具有十分重要的临床意义［2］。但由于各家医院用药习惯存在一定的差异，血流感染病原菌分布及其对抗菌药物的耐药性不尽相同，故为了解上海市浦东新区公利医院血流感染病原菌的分布特征及其对抗菌药物的耐药性，指导临床及时、合理用药，现对上海市浦东新区公利医院住院患者血培养的结果进行分析。

材料和方法

一、菌株来源

收集2012年7月至2015年6月上海市浦东新区公利医院所有住院患者血培养分离到的病原菌，剔除疑似污染的棒状杆菌属、微球菌属、芽胞杆菌和双套血培养中单瓶分离的凝固酶阴性葡萄球菌，其中同一例患者多次分离相同菌株只分析第1株分离菌，共收集菌株380株。

二、方法

1.样本采集 临床怀疑患者血流感染时，采集患者2个不同部位的静脉血，每个部位均采集16～20 mL，分别注入需氧和厌氧血培养瓶。使用Bact/ALERT 3D血培养仪及其配套的血培养瓶（法国生物梅里埃公司）进行培养。

2.细菌鉴定和药物敏感性试验 使用法国生物梅里埃VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统及其配套的鉴定和药物敏感性卡（法国生物梅里埃公司）进行细菌鉴定和体外药物敏感性试验。药物敏感性结果采用美国临床试验室标准化协会（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）M100-S24标准进行判断。质控菌株为金黄色葡萄球菌（ATCC 29213）、铜绿假单胞菌（ATCC 27853）、粪肠球菌（ATCC 29212）、大肠埃希菌（ATCC 25922）和大肠埃希菌（ATCC 35218），由上海市临床检验中心提供。

三、统计学方法

使用WHONET 5.6软件进行病原学统计分析和耐药性分析。

结 果

一、 病原菌分布

2012年7月至2015年6月共收集住院患者血培养样本4 375例，共分离出病原菌380株，阳性检出率为8.7%。其中需氧革兰阳性球菌157株，占41.3%；需氧革兰阴性杆菌203株，占53.4%；念珠菌20株，占5.3%。见表1。

表1 血培养病原菌的分布及构成比

病原菌 株数 构成比（%）革兰阳性球菌 157 41.3凝固酶阴性葡萄球菌 91 23.9金黄色葡萄球菌 21 5.5肠球菌属 42 11.1链球菌属 3 0.8革兰阴性杆菌 203 53.4大肠埃希菌 96 25.3肺炎克雷伯菌 36 9.5铜绿假单胞菌 13 3.4鲍曼不动杆菌 11 2.9阴沟肠杆菌 10 2.6少动鞘氨醇单胞菌 7 1.8其他革兰阴性杆菌 30 7.9念珠菌 20 5.3白念珠菌 13 3.4近平滑念珠菌 3 0.8无名念珠菌 2 0.5光滑念珠菌 1 0.3角膜念珠菌 1 0.3

二、病原菌的耐药性分析

血培养分离的凝固酶阴性葡萄球菌对大部分抗菌药物的耐药率明显高于金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率分别为23.1%和36.4%。见表2～表5。

表2 金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药性

抗菌药物凝固酶阴性葡萄球菌 金黄色葡萄球菌株数 耐药［株（%）］ 株数 耐药［株（%）］青霉素 91 88（96.7） 21 21（100.0）苯唑西林 90 79（87.8） 21 10（47.6）庆大霉素 91 27（29.7） 21 5（23.8）环丙沙星 91 58（63.7） 21 6（28.6）左氧氟沙星 91 64（70.3） 21 6（28.6）莫西沙星 91 43（47.3） 21 6（28.6）复方磺胺甲噁唑91 37（40.7） 21 1（4.8）克林霉素 91 45（49.5） 21 7（33.3）红霉素 91 75（82.4） 21 14（66.7）

续表2

抗菌药物凝固酶阴性葡萄球菌 金黄色葡萄球菌株数 耐药［株（%）］ 株数 耐药［株（%）］利奈唑胺 91 0（0.0） 21 0（0.0）万古霉素 91 0（0.0） 21 0（0.0）奎奴普丁/达福普汀90 3（3.3） 21 0（0.0）替加环素 89 0（0.0） 21 0（0.0）

表3 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物的耐药性

抗菌药物大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌株数 耐药［株（%）］ 株数 耐药［株（%）］氨苄西林 96 86（89.6） 36 30（83.3）氨苄西林-舒巴坦96 60（62.5） 36 10（27.8）哌拉西林-他唑巴坦96 1（1.0） 36 3（8.3）头孢唑啉 96 67（69.8） 36 9（25.0）头孢他啶 96 29（30.2） 36 8（22.2）头孢曲松 96 66（68.8） 36 9（25.0）头孢吡肟 96 20（20.8） 36 5（13.9）头孢替坦 96 1（1.0） 36 3（8.3）氨曲南 96 43（44.8） 36 8（22.2）厄他培南 96 0（0.0） 36 4（11.1）亚胺培南 96 0（0.0） 36 3（8.3）阿米卡星 96 1（1.0） 36 2（5.6）庆大霉素 96 40（41.7） 36 5（13.9）妥布霉素 96 11（11.5） 36 2（5.6）环丙沙星 96 55（57.3） 36 7（19.4）左氧氟沙星 96 53（55.2） 36 6（16.7）复方磺胺甲噁唑96 58（60.4） 36 6（16.7）

讨 论

本研究血流感染样本中分离的凝固酶阴性葡萄球菌所占比例最高，占23.9%。以往认为血培养分离到的凝固酶阴性葡萄球菌约有60%～80%是污染菌。但近几年随着侵袭性操作的增加，凝固酶阴性葡萄球菌引起的导管相关性血流感染逐渐增多，血培养分离的凝固酶阴性葡萄球菌已成为最常见的病原菌［3-6］。

有研究显示，第3代、第4代头孢菌素和碳青霉烯类抗菌药物的广泛使用是诱导并筛选出多重耐药菌的重要原因之一［7］。本研究中，上海市浦东新区公利医院血流感染样本中分离的金黄色葡萄球菌对苯唑西林的耐药率为47.6%，还未培养出耐万古霉素和利奈唑胺的金黄色葡萄球菌。碳青霉烯类抗菌药物目前仍是治疗多重耐药细菌感染的首选药物，但是上海市浦东新区公利医院血流感染样本中分离的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率分别高达23.1%和36.4%，已造成抗感染治疗的困难。肺炎克雷伯菌对厄他培南的耐药率较低（11.1%），未分离出耐碳青霉烯类抗菌药物的大肠埃希菌。白念珠菌对两性霉素B和氟胞嘧啶的耐药率均为0.0%。

表4 铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物的耐药性

抗菌药物铜绿假单胞菌 鲍曼不动杆菌株数 耐药［株（%）］ 株数 耐药［株（%）］氨苄西林 13 13（100.0） 11 8（72.7）氨苄西林-舒巴坦13 0（0.0） 11 4（36.4）哌拉西林-他唑巴坦13 2（15.4） 11 4（36.4）头孢唑啉 13 13（100.0） 11 11（100.0）头孢他啶 13 1（7.7） 11 4（36.4）头孢曲松 13 12（92.3） 11 5（45.5）头孢吡肟 13 2（15.4） 11 4（36.4）头孢替坦 13 13（100.0） 11 11（100.0）氨曲南 - - 11 11（100.0）厄他培南 - - - -亚胺培南 13 3（23.1） 11 4（36.4）阿米卡星 13 0（0.0） 11 0（0.0）庆大霉素 13 0（0.0） 11 4（36.4）妥布霉素 13 0（0.0） 11 4（36.4）环丙沙星 13 2（15.4） 11 4（36.4）左氧氟沙星 13 2（15.4） 11 2（18.2）复方磺胺甲噁唑13 12（92.3） 11 5（45.5）

表5 白念珠菌对常用抗菌药物的耐药性

抗菌药物 株数 耐药［株（%）］氟康唑 13 4（30.8）伏立康唑 13 4（30.8）伊曲康唑 13 5（38.5）两性霉素B 13 0（0.0）氟胞嘧啶 13 0（0.0）

综上所述，由于血流感染病程进展快、病死率高［8］，合理使用抗菌药物成为决定患者预后好坏的一个重要因素，因此临床医师应根据血培养的结果并结合患者的临床指征，严格、规范地使用抗菌药物。而临床微生物室更应该及时、准确地报告血培养结果。为了避免多重耐药菌在上海市浦东新区公利医院流行，还应采取有效的医院感染监控措施，阻止耐药菌的传播与扩散。

参考文献

［1］ 崔扬文，胡必杰，高晓东，等. 2011年上海市72所医院血培养送检监测结果分析［J］. 中华医院感染学杂志，2012，22（12）：2664-2665.

［2］ 张静，高晓东，胡必杰，等. 重症监护病房医护人员导管相关性血流感染现状与预防控制措施认知的调查［J］. 中华医院感染学杂志，2011，21（12）：2411-2413.

［3］ 王潭枫，席云，钟月桂. 血培养中病原菌分布及药敏调查分析［J］. 中国微生态学杂志，2010，22（10）：918-921.

［4］ 王志方，王迎莉. 凝固酶阴性葡萄球菌血培养阳性60例分析［J］. 中国误诊学杂志，2011，11（9）：2200.

［5］PIUKOVICS K，TERHES G，LáZáR A，et al. Evaluation of bloodstream infections during chemotherapy-induced febrile neutropenia in patients with malignant hematological diseases：single center experience［J］. Eur J Microbiol Immunol （Bp），2015 ，5（3）：199-204.

［6］ 魏泽庆，沈萍，陈云波，等. Mohnarin 2011年度报告：血流感染细菌构成及耐药性［J］. 中华医院感染学杂志，2012，22（24）：5497-5502.

［7］ 陈倩，郭燕菊，孙亚娟，等. 引起血流感染病原体分布及耐药性分析［J］. 中华医院感染学杂志，2013，23（17）：4321-4323.

［8］LOONEN AJ，WOLFFS PF，BRUGGEMAN CA，et al. Developments for improved diagnosis of bacterial bloodstream infections［J］. Eur J Clin Microbiol Infect Dis，2014，33（10）：1687-1702.

（本文编辑：姜 敏）

《检验医学》举办2016年“检验医学新技术”国家级继续教育项目的通知

为满足全国检验医学工作者对继续教育的需求，充实基础理论知识，促进检验医学水平，提高教学和科研质量，节省有关检验医学工作者接受继续教育的费用和时间，在本刊编委专家们的积极支持下，经国家继续教育委员会批准，本刊将于2016年度举办“检验医学新技术”［Ⅰ类10分，项目编号：2016-11-00-093（国），由上海市临床检验中心主办］国家级继续教育项目。具体实施方案如下：

1. 学员对象 具有中级或中级以上专业技术职称、正在从事医学检验或其他相关专业技术工作的卫生技术人员均可参加。

2. 继续教育内容 临床检验与血液学检验、免疫学检验、微生物学检验、生物化学检验、分子生物学检验、实验室管理等检验医学领域的新技术、新进展，均出自本刊发表的文章。

3. 学员报名步骤 欲参加继续教育项目者，请将回执复印、填写后寄回（回执见第862页，请务必填写完整，信封上注明“参加继续教育”）；也可以登录本刊网站（http://www.shjyyx.com），在“编辑部公告”中下载、填写回执，并将回执用E-mail（该E-mail地址请与回执中填写的一致）发回；或登录上海市临床检验中心网站（www.sccl.org.cn）直接报名参加。编辑部以收到学员报名的回执和教育费用的次序作登记注册和编号。

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Distribution of pathogens causing bloodstream infection and in vitro drug susceptibility test result analysis

SHEN Zhenhua，LIU Xinghui，ZHU Hui，YAO Xiaolan.

（Department of Clinical Laboratory，Shanghai Pudong Gongli Hospital，Shanghai 200135，China）

Abstract：Objective To understand the distribution characteristic and drug resistance of pathogens in patients with bloodstream infection from Shanghai Pudong Gongli Hospital，and to provide a reference on the choice of antimicrobial agents for treatment. Methods A total of 380 pathogens were isolated from inpatients with bloodstream infection in Shanghai Pudong Gongli Hospital from July 2012 to June 2015，and were identified using VITEK2 Compact automated microorganism analysis system. Drug susceptibility test was performed by VITEK2 Compact. The data were analyzed by WHONET 5.6 software. Results There were 157 isolates of Gram-positive cocci，accounted for 41.3%. Coagulase-negative Staphylococcus，Staphylococcus aureus and Enterococcus were main Gram-positive cocci. A total of 203 isolates of Gram-negative bacilli were isolated and identified，accounted for 53.4%，and Escherichia coli，Klebsiella pneumoniae and Pseudomonas aeruginosa were main Gram-negative bacilli. There were 20 isolates of Candida，and Candida albicans was common. The drug resistance rate of Staphylococcus aureus to oxacillin was 47.6%. The drug resistance rates of Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii to imipenem were 23.1% and 36.4%，and those of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae to ertapenem were 0.0% and 11.1%. The drug resistance rate of Candida albicans to fluconazole was 30.8%. Conclusions Coagulase-negative Staphylococcus and Escherichia coli are the most common pathogens causing bloodstream infection with high drug resistance rates. It should pay more attention to the rational use of antimicrobial agents.

Key words：Bloodstream infection；Pathogens；Drug resistance rate

文章编号：1673-8640（2016）010-0854-04

中图分类号：R446.5

文献标志码：A

DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2016.010.004

基金项目：上海市浦东新区卫生系统重点学科建设项目（PWZx2014-03）

作者简介：沈振华，男，1979年生，学士，主管技师，主要从事临床微生物检验工作。

通讯作者：刘兴晖，联系电话：021-58858730。

收稿日期：（2015-12-21）