常用10种培养基的配置和质控标准
小结：常用10种培养基的配置和质控标准
（1） 基础肉汤
成分和配制方法：
蛋白胨 NaCl 牛肉膏 酵母膏 DW pH
10g 5g 5g 3g 1L 7.4～7.6
15磅30min 高压灭菌，倾注无菌试管备用。 每次新配制时做质控
阳性质控：ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种基础肉汤中，35℃温箱24h 肉汤混浊。 无菌试验：100管随机抽取10管未接种的基础肉汤35℃温箱24h 培养，无细菌生长。
平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做
用途：供培养对营养要求不高的细菌增菌用；作其他选择培养基的基础液。 储存
干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存一个月
（2）普通营养琼脂
成分和配制方法：
基础肉汤 琼脂
100ml 2g
15磅30min 高压灭菌，倾注平板备用。
注：可购买国内生产的瓶装营养琼脂粉，按上面的说明配制。
质量控制：
质控频度 每次新配制时做质控 质控方法
阳性质控：ATCC 25923金黄色葡萄球菌或ATCC25922大肠埃希菌接种营养琼脂上，35℃温箱24h 细菌生长良好。
无菌试验：100块随机抽取10管未接种的营养琼脂35℃温箱24h 培养，无细菌生长。
平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做 用途：
供培养对营养要求不高的细菌。 作无糖基础培养基。 加血成血平板。
加血加热75℃以上，再加上生长添加剂就成巧克力平板。 储存
干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存半个月
（3）葡萄糖肉汤
成分和配制方法：
蛋白胨 朊胨 NaCl 牛肉膏 酵母粉 葡萄糖 枸橼酸钠 硫酸镁 DW pH
10g 10g 5g 5g 3g 4g 3g 3g 1L 7.2～7.4
0.4%酚红 5ml
15磅30min 高压灭菌，备用 质量控制：
质控频度 每次新配制时做质控 质控方法
阳性质控：ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种葡萄糖肉汤中，35℃温箱24h 肉汤混浊。 无菌试验：100管随机抽取10管未接种的葡萄糖肉汤35℃温箱24h 培养，无细菌生长。
平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做 用途：供培养对营养要求不高的细菌增菌用。 6 储存
干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存一个月
（4）血液琼脂平板
成分和配制方法：（法国生物梅里埃成品培养基）
4g 琼脂基础+100mL蒸馏水
高压灭菌（15磅、121℃）20min 冷却至50℃加入5%-10%无菌羊（兔）血
倾注于无菌平皿内（φ9mm ）每一个平皿分装13~15ml。
质量控制：
质控频度 每次新配制时做质控 质控方法
阳性质控：ATCC 6303肺炎链球菌（或质控菌株）和ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种于血液琼脂，35℃温箱24h 细菌生长良好。ATCC 6303肺炎链球菌为α溶血。ATCC 25923金黄色葡萄球菌为β溶血。
无菌试验：100块随机抽取10块未接种的血液琼脂35℃温箱24h 培养，无细菌生长。
平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做
用途：供分离培养营养要求较高的细菌。 储存
干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存半个月 注意事项:
制备血平板时，温度必须适宜，琼脂应冷至50℃左右，如温度过高，可使血液变色不易观察溶血，温度过低，琼脂凝固与血液不易混合。
使用的血液以羊血，兔血为好，不宜使用人血，因人血中有抗体、补体不利细菌生长。羊血对链球菌、葡萄球菌的溶血比较满意，但可抑制脑膜炎奈瑟氏菌与嗜血杆菌的生长。
（5）血液琼脂平板（国产）
普通营养琼脂粉 10%葡萄糖 血液
3.8克+100ml蒸馏水 0.6ml 6～10ml
冷却至50℃加入5%-10%无菌羊（兔）血
倾注于无菌平皿内（φ9mm ）每一个平皿分装13~15ml。
质控方法
阳性质控：ATCC 6303肺炎链球菌（或质控菌株）和ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种于血液琼脂，35℃温箱24h 细菌生长良好。ATCC 6303肺炎链球菌为α溶血。ATCC 25923金黄色葡萄球菌为β溶血。
无菌试验：100块随机抽取10块未接种的血液琼脂35℃温箱24h 培养，无细菌生长。
平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做 用途：供分离培养营养要求较高的细菌。 储存
干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存半个月 注意事项:
制备血平板时，温度必须适宜，琼脂应冷至50℃左右，如温度过高，可使血液变色不易观察溶血，温度过低，琼脂凝固与血液不易混合。
使用的血液以羊血，兔血为好，不宜使用人血，因人血中有抗体、补体不利细菌生长。羊血对链球菌、葡萄球菌的溶血比较满意，但可抑制脑膜炎奈瑟氏菌与嗜血杆菌的生长。
（6）巧克力平板
成分和配制方法：
基础肉汤 琼脂粉
无菌脱纤维兔血
100ml 1.5g 10ml
方法：高压灭菌后，冷至80—85℃加入兔血，混匀置85℃水浴10—15min ，使血液由鲜红色变为巧克力色。取出，当冷至50℃时倾注平板，经无菌试验后，保存冰箱中备用。
质控方法
阳性质控：ATCC10211流感嗜血杆菌或ATCC49619淋病奈瑟菌，35℃，5%CO2温箱24-48h, 细菌生长良好。
无菌试验：100块随机抽取10块未接种的巧克力平板35℃5%CO2温箱24-48h 培养，无细菌生长。
平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做 用途：
分离培养脑膜炎奈瑟氏菌，嗜血杆菌。 淋病奈瑟氏菌的分离培养。 储存
干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存半个月
（7）双糖培养基
基础液 胰蛋白胨
10g
NaCl 牛肉膏 DW pH 0.4%酚红液 制备：（1）基础液 葡萄糖 琼脂
（2）基础液
乳糖
琼脂
5g 5g 1L 7.4 6ml 500ml 1g 2.5g 500ml 5g 7.5g
制法：10磅20min 高压灭菌高，先将葡萄糖倒入无菌试管内1/3处凝固后，再将乳糖加入2/3处，置成斜面。
质量控制：
质控频度 每次新配制时做质控 质控方法
阳性质控：将福氏痢疾杆菌（卫生部临床检验中心质控菌株）接种于双糖培养基中，生长良好，上层为红色/下层为无色。
阴性质控：将ATCC27853接种于双糖培养基中，35℃温箱24-48h 培养生长良好，上层下层均为红色。
无菌试验：100管随机抽取10管未接种的双糖培养基35℃温箱24-48h 培养，无细菌生长。
平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做。 用途：用于分离培养肠道致病菌。 储存
干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存半个月
（8） MH 培养基
成分和配制方法：
可使用国产（北京奥博星生物技术有限公司）或法国生物梅里埃成品培养基配制：
3.8g M-H琼脂基础+100mL蒸馏水
高压灭菌（15磅、121℃）20min 冷却至50℃倾倒平皿，厚度4mm
质量控制：
质控频度 每次新配制时做质控 质控方法
阳性质控：ATCC25923、ATCC25922接种于MH 培养基上，35℃温箱24-48h 培养，细菌生长良好。
无菌试验：100块随机抽取10块未接种的MH 培养基35℃温箱24-48h 培养，无细菌生长。
平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做。 用途：用于非苛养菌的KB 法药敏试验用。 储存
干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存半个月
（9） 沙保弱培养基
成分：蛋白胨 10克，琼脂20克，麦芽糖 40克，水1000毫升。
方法：于1000ml 水中加入上述成分，加热煮沸，不断搅拌，待琼脂溶解后，加入40克麦芽糖（或葡萄糖），搅拌，使它溶解，趁热调PH 到7.6，定量分装于烧瓶内（每瓶100ml ），高压灭菌103.43Pa15min ，倾注于无菌平皿内（φ9mm ）每一个平皿分装13—15ml 。待凝固后，于37℃培养18—24h ，如无细菌生长，置冰箱中备用。
质控频度 每次新配制时做质控 质控方法
阳性质控：ATCC90028接种于沙保罗平板上，35℃温箱24-48h 培养生长良好。 无菌试验：100块随机抽取10块未接种的沙保罗培养基35℃温箱24-48h 培养，无细菌生长。
平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做。 用途：真菌的分离培养用。 储存
干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存半个月
（10）念珠菌显色培养基
成分:由琼脂、蛋白胨、色素、氯霉素等组成
配制方法：准确称取科玛嘉念珠菌显色琼脂粉47.7克，加蒸馏水1000毫升，并在玻璃容器壁上标记液面刻度，边搅拌边加热到完全溶解，不要用蒸锅消毒，冷却到45℃后，用氨水矫正PH 至6.3，摇匀，将其倾注入一次性无菌培养皿中制成平板，使平板深度为3mm 左右。
质控频度 每次新配制时做质控 质控方法
阳性质控：ATCC90028接种于念珠菌显色培养基上，35℃温箱24-48h 培养生长良好，菌落为翠绿色。
无菌试验：100块随机抽取10块未接种的沙保罗培养基35℃温箱24-48h 培养，无细菌生长。
平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做。 用途：念珠菌的常规鉴定用。 储存
干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存半个月
分离培养基质控
细菌生化实验质控