微生物菌种冻干机:厌氧菌冷冻干燥管的制备
微生物菌种冻干机:厌氧菌冷冻干燥管的制备
真空冻干机是在抽真空的状态下让物质在低温下干燥的设备,主要用于微生物制剂和生物活性物质的干燥。菌种保藏室用来对微生物进行真空冻干保藏。微生物冷冻干燥法是长期保藏菌种的较好方法之一。因其便于批量生产、长期保藏成活力高,保藏和运输设备简单而成为一种普遍使用的保藏方法,已广泛应用于保存大部分细菌、真菌和一些病毒。
1.安瓿管准备
安瓿管材料以中性玻璃为宜。清洗安瓿管时,先用2%盐酸浸泡过夜,自来水冲洗干净后,用蒸馏水浸泡至pH中性,干燥后、贴上标签,标上菌号及时间,加入脱脂棉塞后,121℃下高压灭菌15-20分钟,备用。
2.保护剂的选择和准备
保护剂种类要根据微生物类别选择。配制保护剂时,应注意其浓度及pH值,以及灭菌方法。如血清,可用过滤灭菌;牛奶要先脱脂,用离心方法去除上层油脂,一般在100℃间歇煮沸2-3次,每次10-30分钟,备用。
3.冻干样品的准备
在最适宜的培养条件下将细胞培养至静止期或成熟期,进行纯度检查后(参见科技部自然科技资源平台联合管理办公室文件《微生物菌种纯度检测技术规程》(试行)),与保护剂混合均匀,分装。微生物培养物浓度以细胞或孢子不少于108-1010个ml为宜(以大肠杆菌为例,为了取得每毫升1010个活细胞菌液2毫升-2.5毫升,只需10毫升琼脂斜面两支)。采用较长的毛细滴管,直接滴入安瓿管底部,注意不要溅污上部管壁,每管分装量约0.1-0.2毫升,若是球形安瓿管,装量为半个球部。若是液体培养的微生物,应离心去除培养基,然后将培养物与保护剂混匀,再分装于安瓿管中。分装安瓿管时间尽量要短,最好在1-2小时内分装完毕并预冻。分装时应注意在无菌条件下操作。
4.预冻
一般预冻2小时以上,温度达到-20℃到-35℃左右。
5.冷冻干燥
采用冷冻干燥机进行冷冻干燥。
将冷冻后的样品安瓿管置于冷冻干燥机的干燥箱内,开始冷冻干燥,时间一般为8-20小时。
终止干燥时间应根据下列情况判断:
—— 安瓿管内冻干物呈酥块状或松散片状 —— 真空度接近空载时的最高值 —— 样品温度与管外温度接近
—— 选用1-2支对照管,其水份与菌悬液同量,视为干燥完结
—— 选用一个安瓿管,装1-2%氯化钴,如变深兰色,可视为干燥完结 冷冻干燥完毕后,取出样品安瓿管置于干燥器内,备用。
6.真空封口及真空检验
将安瓿管颈部用强火焰拉细,然后采用真空泵抽真空,在真空条件下将安瓿管颈部加热熔封。
熔封后的干燥管可采用高频电火花真空测定仪测定真空度。
7.保藏
安瓿管应低温避光保藏。
8.质量检查
冷冻干燥后抽取若干支安瓿管进行各项指标检查,如存活率、生产能力、形态变异、杂菌污染等。
9.冷冻干燥法适用范围
适用于大多数细菌、放线菌、病毒、噬菌体、立克次体、霉菌和酵母等的保藏,但不适于霉菌的菌丝型、菇类、藻类和原虫等。
10.保藏周期
不同微生物复苏周期不同,一般10年左右。
11.复苏方法
—— 先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部, —— 将安瓿管顶部烧热,
—— 用无菌棉签沾冷水,在顶部擦一圈,顶部出现裂纹,用挫刀或镊子颈部轻叩一下,敲下已开裂的安瓿管的顶端, —— 用无菌水或培养液溶解菌块,使用无菌吸管移入新鲜培养基上,进行适温培养。
冷冻干燥机系列:
真空冷冻干燥机简称冻干机,经真空冷冻干燥处理的物品易于长期保存,加水后能恢复到冻干前的状态并保持原有的生化特性,对热敏性物质如抗生素、疫苗、血液制品、酶激素及其他生物组织,冻干技术非常适用,广泛应用于医学、制药、生物研究、化工和食品等领域。
本系列分为四种:普通型、压盖型、多岐管普通型和多岐管压盖型。
优于同类冷冻干燥机的十大特点: 1、 液晶显示干燥曲线。 2、 DSC-5型控制器,控温精确。 3、 配有通讯接口,提供给用户干燥过程的更多信息。 4、 冷阱带有预冻功能,省去了低温冰箱的费用。 5、 丹佛斯压缩机,噪音小、功率大、寿命长。 6、 混合环保制冷剂,绿色环保,制冷量大。 7、 内置换热器,有效降低冷阱温度,捕水能力强。 8、 防返油真空泵,防止物料的污染。 9、 可配有电除霜功能。
实验室小型冷冻干燥机:
YB-FD-1/12/18系列冷冻干燥机:
YB-FD-1/12/18冷冻干燥机,少量样品可直接在冷阱内预冻,适用于实验室使用或少量生产,可满足大多数实验室常规冻干的需求。
主要特点:
● 符合国际标准的绿色环保型; ● 中文界面,显示干燥曲线;
● 冷阱开口大,无内盘管,带样品预冻功能; ● 预冷架,可作导流桶,加快干燥速度; ● 冷阱和操作面为全不锈钢,耐腐蚀易光洁; ● 透明钟罩式干燥室,安全直观;
● 不锈钢样品架,普通型样品盘间距可调;
● 设计新颖,体积小操作方便,减少实验室台面占用。 ● 可选加有氮气充气阀。
YB-FD-18S加热型冷冻干燥机:
YB-FD-18S冷冻干燥机是一种小型立式冷冻干燥设备,该机型具备隔板加热和可编程功能,适合于实验室样品的冻干实验及少量生产。
YB-FD-18S原位冷冻干燥机就是将物料直接放入干燥室内,一次性完成干燥过程,实现了自动化,减少传统的繁琐操作。
主要特点:
● 液晶显示:隔板温度曲线、冷阱温度曲线、样品温度曲线; ● 可储存32个程序,每个程序可设36段,冷冻干燥机在运行的过程中可修改程序参数,并记忆最后的干燥曲线;
● 触摸屏显示各功能键,无操作按键,减少了误操作,提供了仪器的可靠性和稳定性;
● 电路系统采用PID控制,使控温精度更精确;
● 进口压缩机,复合制冷剂,制冷速度快,干燥效果好。
中试型原位冷冻干燥机:
真空冷冻干燥机,方箱结构,原位冻干,广泛用在医学、制药、生物研究、化工和食品等领域。它改变了过去干燥过程的繁琐操作,防止了物料的污染,实现了干燥升华的自动化,适用于中试或批量生产。经冷冻干燥处理的物品易于长期保存,加水后能恢复到冻干前状态并保持原有生化特性。
该机型具备隔板加热和可编程功能,可以记忆冻干曲线,方便用户观察物料的冻干过程。其中FD-50L冻干机采用双压缩机复叠制冷,冷凝温度为-70℃,样品可直接在板层上预冻和干燥。
主要特点:
● 预冻干燥在原位进行,减少干燥过程的繁琐操作,实现了自动化; ● 隔板温度误差≤1℃,干燥效果均匀;
● 隔板温度可调、可控、可摸索、中试和生产工艺;
● 由于干燥室与冷阱为分体结构,捕水能力强,干燥时间短; ● 触摸屏操作,PID控制,显示干燥曲线,可配有记录仪; ● 方形托盘不易变形,易于操作,便于清洗;
● 配置充气阀,可充干燥惰性气体;
● 干燥室采用高透光无色透明有机玻璃门,在操作过程中能清晰观察物料的变化过
程;
● 可选配自动压塞装置,可选配共晶点测试装置。
电加热技术参数:
YB-FD-20D/30D/50D系列冷冻干燥机:
硅油加热技术参数:
YB-FD-30L/50L原位型方仓冷冻干燥机:
生产型原位冷冻干燥机:
技术参数: