高敏C反应蛋白检测试剂盒(胶体金法)

高敏C反应蛋白检测试剂盒（胶体金法）

使用说明书

【产品名称】

　　通用名称：高敏C反应蛋白检测试剂盒（胶体金法）

　　英文名称：One Step Test for hs-CRP (Colloidal Gold)

【包装规格】

　　包装规格：10人份/盒，25人份/盒

【预期用途】

　　本检测试剂盒适用于临床体外定量或半定量检测人血中高敏C反应蛋白（hs-CRP，下文中"高敏C反应蛋白"均使用其英文缩写"hs-CRP"）的含量。

【检验原理】

　　以两株高特异性、高敏感性抗人hs-CRP单克隆抗体，其中一株固定于膜上测试区（T），另一株为金标记抗体，预先包被在聚酯膜上，应用抗原抗体反应及免疫层析技术检测人血中hs-CRP的含量。

　　C-反应蛋白（CRP）为一种能与肺炎链球菌C多糖体反应的急性期反应蛋白，是一种非特异性的免疫应答组分。CRP广泛分布于人体，产生于抗原进入机体的早期，是机体受到微生物入侵或组织损伤等炎性刺激时肝细胞合成的急性时相蛋白，hs-CRP即用较敏感的方法检测出血清中较低浓度的CRP。研究表明，在动脉粥样斑块、急性心梗病灶中都存在hs-CRP。hs-CRP是急性冠状动脉综合征（ACS）系列炎症标志物，有助于心血管疾病的初级预防及风险评估；同总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇的比值结合，较其他的危险因子更能预示发生心、脑血管疾病的危险性。

　　美国心脏协会AHA与美国疾病预防与控制中心CDC建议，可根据hs-CRP水平对心血管病患者进行危险分类：小于1.0 mg/L为相对低危险；1.0～3.0 mg/L为中度危险；大于3.0 mg/L为高度危险。

【主要组成成份】

　　1. 高敏C反应蛋白检测试剂盒：内含10条单人份或25条单人份检测卡；检测卡由试纸条外壳与试纸条构成，试纸条由样品垫、胶体金垫（喷有由hs-CRP单克隆抗体标记的胶体金）、层析膜（T线包被有hs-CRP捕获单克隆抗体，C线包被有兔抗鼠IgG抗体）、吸水纸、衬垫构成；

　　2. 说明书一份；

　　3. 标准比色卡一张。

　　注：不同批的高敏C反应蛋白检测试剂盒（胶体金法）各组分不可以互换。

【适用仪器】

　　南京普朗医用设备有限公司FIA8000系列免疫定量分析仪

【储存条件及有效期】

　　试剂盒于4~30℃，铝箔袋密封状态下存放，有效期为12个月；铝箔袋拆封后，有效期为1小时。

【样本要求】

　　1. 应在无菌情况下采集静脉血。检测时，未经肝素抗凝的血样须析出血清，经肝素抗凝的血样，可选用血浆或全血。建议优先选用人血清或血浆进行检测，在患者病情紧急或特殊情况下，可使用全血样本进行快速检测。其他体液和样本可能得不到准确的结果。

　　2. 若血清或血浆样本收集后7天内检测，样

本须放在2~8℃保存；如果7天后检测则须将样本放置于－20℃环境，可保存6个月；全血样本建议在3天内检测，样本于2~8℃保存，不得冻存。避免加热灭活样本，溶血样本应弃用。

　　3. 检测前样本必须恢复至室温。冷冻保存的样本需完全融化、复温、混合均匀后方可使用，切忌反复冻融。

【检验方法】

　　1. 在进行检测前请先完整阅读使用说明书，使用前将检测卡和样本恢复至室温（温度建议20~25℃为宜）并编号。

　　2. 从原包装试剂袋中取出检测卡，应在1小时内尽快使用。

　　3. 将检测卡放置在干净的水平台面上，水平放置并作好标记。

　　4. 用移液器吸取120 μl样本，或用产品自带小吸管吸取3~4滴，垂直滴加在加样处。

　　5. 等待T线处紫红色条带出现，用目测参考标准比色卡进行半定量判读或将检测卡放置于FIA8000系列免疫定量分析仪上，进行定量检测，测试结果应在10~30分钟内读取，以质控线以下本底展白为宜，30分钟后读取的结果不可靠。

【参考值（参考范围）】

　　500例健康人测定统计分析显示，正常参考值上限取第95百分位点为3 mg/L；小于3 mg/L为正常。

　　本试剂盒定性检测范围为0.5~64 mg/L。

　　当样本中hs-CRP的含量高于64 mg/L时，仪器显示">64 mg/L"， 低于0.5 mg/L时，仪器显示"

【检验结果的解释】

表1 显色程度与血清参考浓度对照表

显色反应

　　检测结果及参考浓度

　　

检测线2

（H）

血液hs-CRP

参考浓度（mg/L）

检测线1

（L）

血液hs-CRP

参考浓度（mg/L）

﹣

＜0.5

+

0.5~1.0

+

2.0~4.0

++

1.0~2.0

++

4.0~16.0

+++

2.0~4.0

+++

16.0~64.0

++++

++++

>64.0

　　结果读取说明：检测线1及检测线2均为hs-CRP的检测区，检测线1为低敏检测区，检测线2为高敏检测区。检测线1及检测线2均不显色，可认为检测结果为阴性；仅检测线2一条线显色时，对照标准比色卡读取参考浓度即可；检测线1和检测线2同时显色，若检测线1显色低于"++"，则按检测线2的显色程度判断参考浓度，检测线1显色高于"++"则根据检测线1的显色程度判断参考浓度。

　　质控区（C）出现紫红色条带，对照标准比色卡，参考表1读取结果；或者使用FIA8000系列免疫定量分析仪对检测卡进行分析，出具定量检测结果。

　　质控区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作或检测卡已经变质损坏，在此种情况下，请再次仔细阅读说明书，并用新的检测卡重新测试，如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与供应商联系。

【检验方法的局限性】

1、 血清中hs-CRP含量的测定只是临床医师对

患者进行诊断的指标之一，建议临床医师根据患者的体征、病史、检查以及其他心脏标志物（如cTnI、NT-proBNP、CK-MB等）进行综合判断。

2. 样本中的某些蛋白会对检测存在干扰，需要紧密结合更多临床信息进行诊断，干扰蛋白及最大允许

浓度如下图所示：

易产生干扰的蛋白质

最大允许浓度

血红蛋白

5g/L

甘油三酯

10g/L

胆红素

0.2g/L

【产品性能指标】

1. 最低检出限

　　取小牛血清或5%牛血清白蛋白溶液，对照标准比色卡，显示为阴性；最低检出限（n=10）不高于0.5 mg/L。

2. 剂量反应曲线的线性相关系数r＞0.950。

3. 精密度

　　批内差：测定同一批产品（n=10），观察血清校准品或参考血清（4.0～10.0 mg/L）的显色程度，对照标准比色卡，显色程度在+～+++（L）之间；每个批次的批内精密度（n=10），CV批内＜15%。

　　批间差：任意3个批次的产品，观察血清校准品或参考血清（4.0～10.0 mg/L）的显色程度，对照标准比色卡，显色程度在+～+++（L）之间；任意3个批次的产品，CV批间＜20%。

4. 准确度（回收实验）

　　取浓度为3 mg/L的血清样本，作为低敏检测区基础样本，将其等体积分为4份，在任意3份中添加待测物标准品，使加入浓度分别为20 mg/L、40 mg/L、60 mg/L，制成3份回收样本，计算其低敏检测区回收率。

　　取浓度为1 mg/L的血清样本，作为高敏检测区基础样本，将其等体积分为4份，在任意3份中添加待测物标准品，使加入浓度分别为1 mg/L、2 mg/L、3 mg/L，制成3份回收样本，计算其高敏检测区回收率。

回收率=

平均回收率=

　　计算得出：低敏检测区平均回收率=101%

　　　　　　　高敏检测区平均回收率=103%

5. 诊断符合率

　　通过临床试验对200份血样本（其中阳性61例，阴性139例）进行相关检测，得到的诊断符合率为98%，其中阳性符合率达到96.74%，阴性符合率达到98.5%，假阳性率为1.5%，假阴性率为3.26%。

6. 平行对照试验

　　本试剂盒及配套FIA8000系列免疫定量分析仪与校准过的日立7600全自动生化仪及配套hs-CRP检测试剂盒、OLYMPUS-AU5400全自动生化仪及配套hs-CRP检测试剂盒分别进行平行对照试验，计算得出其相关系数r为0.941，然后用t检验对数值进行分析，得出P>0.05，证明检测结果无统计学差异。

7. 稳定性试验

　　试剂盒于4~30℃保存，铝箔袋密封状态下存放12个月后，检定结果达到标准要求。

【注意事项】

　　1. 本试剂盒仅供体外诊断用。

　　2. 滴管不可以混用，以免交叉污染。

　　3. 检测温度15~30℃，湿度40~60%为最佳。

　　4. 检测卡从铝箔袋中取出后，应尽快进行实验，避免放置于空气中的时间过长，导致受潮

。

　　5. 检测卡可在室温下保存，谨防受潮，低温下保存的检测卡应平衡至室温方可使用。

　　6. 对于那些含有感染源或怀疑含有感染源的物质应有合适的生物安全保证程序，下列为有关注意事项：

　　　☆ 戴手套处理样本或对试剂进行消毒。

　　　☆ 用消毒剂对溅出的样本或试剂进行消毒。

　　　☆ 按当地的有关条例来消毒和处理所有标本、试剂和潜在的污染物。

【参考文献】

　1. Danesh J, Whincup P, Wslker M, et al. Low grade inflammation and coronary heart disease: prospective study and updated neta-analyses. BJM 2000; 321: 199-204.

　2. Rifai N, Ridker PM. Proposed cardiovascular risk assessment algorithm using high-sensitivity C-reactive protein and lipid screening. Clin Chem 2001; 47: 28-30.

　3. Rifai N, Tidker PM. High-sensitivity C-reactive protein: a novel and promising marker of coronary heart disease. Clin Chem 2001; 47: 403-411.

【生产企业】

　企业名称：南京基蛋生物技术有限公司

　注册地址：南京市六合区沿江工业开发区博富路9号 邮政编码：211505

　生产地址：南京江宁开发区将军路6号石马工业园 邮政编码：211100

　电话和传真号码：025-52123387

　网址：http://www.perlong.com

【医疗器械生产企业许可证编号】

　　医疗器械生产企业许可证编号：苏食药监械生产许2005-0035号

【医疗器械注册证书编号】

　　医疗器械注册证书编号：

【产品标准编号】

　　产品标准编号：

1