细胞计数步骤(修)
02-16
活细胞计数方法
1. 盖好盖玻片：取一套血球计数板，将特制的盖玻片盖在血球计数槽上。
2. 从已过滤的细胞悬液里面提取计数用的细胞悬液两滴：用移液枪取10ul 的细胞悬液到PE 管中，在加入同等比例的染色液，活细胞不会被染色，加入染液后就可以在显微镜下区分活细胞和死细胞。
3. 将细胞悬液滴入计数板：将待测细胞悬液吹均匀，然后吸取少量悬液沿盖片边缘缓缓滴入，要保证盖片下充满悬液，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中，
4. 统计4个大格的细胞数，将血球计数板放于显微镜下观察，并移动计数板，当看到镜中出现计数方格后，数出四角的4个大格（每个大格含有16个中格）中没有被染液染上色的细胞数目
5. 计算原细胞悬液的细胞数：按照下面公式计算细胞密度：
（活细胞数）/ml=(4大格细胞总数—4大格染色细胞总数)/4 X 104 X 稀释倍数
注意： 台盼蓝染色标本要在15分钟内检测计数，否则时间延长，活细胞也将着色。