胖可求对蛔虫实验感染猪的驱虫效果
1 目的
本研究目的是:①评价胖可求?4%(Panacur? 4%)粉剂(芬苯哒唑5 mg/kg体重,连用5天)对实验感染猪蛔虫L3和L4期幼虫的驱虫效果;②比较胖可求?4%粉剂和某竞争性产品(预混剂)(阿弗曼菌素0.1 mg/kg体重,连用7天)的效果。
2 实验设计
实验共分4组,每组15只。采用猪蛔虫现场分离虫株的发育虫卵连续3天人工感染实验猪,每次约为333个虫卵(共计1000个发育虫卵)。该蛔虫现场分离虫株是在当地屠宰场采集的,并按RUG SOP28 标准进行鉴定。本研究为非线性随机对照效果评估试验,其中有两个组在两个不同时间点用芬苯哒唑治疗,另1组(阳性)对照组用阿弗曼菌素治疗,最后1组为阴性组,作为非治疗对照组。
实验处理如下:
第Ⅰ组: 以胖可求?4%粉剂治疗:芬苯哒唑1mg / kg体重(BW),从最后一次人工感染虫卵后第3天开始用药,连用5天(= 治疗3~9天龄L3期移行幼虫的效果)。
第Ⅱ组:以胖可求?4%粉剂治疗:芬苯哒唑1mg/ kg BW,从最后一次人工感染虫卵后第12天开始用药,连用5天(= 治疗12~18天龄肠道L4期幼虫的效果)。
第Ⅲ组:以某厂牌 0.6%预混剂治疗:阿弗曼菌素0.1mg/ kg BW,从最后一次人工感染虫卵后第1天开始治疗,连用7天(= 治疗1~9天龄L3期移行幼虫的效果)。
第Ⅳ组:不作治疗的对照组(阴性对照)。
分别在最后一次人工感染蛔虫虫卵后的第42、49和57天测定粪便中的蛔虫卵数量。在第57天,剖检并进行蛔虫计数,测定肝脏上的乳斑数,并检查肺脏的病理变化。
3 结果
3.1 临床观察
未观察到驱虫剂治疗引起的不良反应。在本研究过程中,有3头猪死亡,但其死亡原因与驱虫剂治疗以及猪蛔虫感染无关。其中第2组第50号猪在在试验开始前1天因肠系膜扭转而死亡,第3组的第23号猪在第25天时因猪链球菌引起的肺炎而死亡,第59号猪因猪链球菌引起的心内膜炎而死亡。
3.2 采食量
第1组的平均日采食量为1.26 kg/头猪,而该组的加药饲料是按1.4 kg/头猪的预计日采食量进行配制。第2组的平均日采食量为1.32 kg/头猪,而该组的预计日采食量为1.64 kg/头猪。第3组的平均日采食量为1.44 kg/头猪,而其预计日采食量为1.5kg/头猪。
3.3 粪便虫卵计数(EPG)
在第1组和第2组,实验过程中未检测到猪蛔虫卵。而在第3组,其中第39号猪在用药后49天于粪便中发现虫卵,而饲养于同一猪栏中的第39号、15号和43号猪在第56天发现虫卵。在对照组(第4组),则分别在第42天、49天和56天有3、11和10头猪检出虫卵(表1)。
表1 用药后第42、49和56天各试验组的粪便虫卵计数
猪
号
第Ⅰ组
猪
号
第Ⅱ组
猪
号
第Ⅲ组
猪
号
第Ⅳ组(对照)
用药后时间(天)
用药后时间(天)
用药后时间(天)
用药后时间(天)
42
49
56
42
49
56
42
49
56
42
49
56
1
0
0
0
2
0
0
0
3
0
0
0
4
0
650
1900
5
0
0
0
6
0
0
0
7
0
0
0
8
600
1300
6250
9
0
0
0
10
0
0
0
11
0
0
0
12
0
0
50
13
0
0
0
14
0
0
0
15
0
0
250
16
0
0
50
17
0
0
0
18
0
0
0
19
0
0
0
20
2350
2650
8050
21
0
0
0
22
0
0
0
23
死亡 2
24
50
50
未检测
25
0
0
0
26
0
0
0
27
0
0
0
28
0
50
0
29
0
0
0
30
0
0
0
31
0
0
0
32
0
2800
7100
33
0
0
0
34
0
0
0
35
0
0
0
36
0
50
0
37
0
0
0
38
0
0
0
39
0
2800
18700
40
0
0
50
41
0
0
0
42
0
0
0
43
0
0
100
44
0
0
0
45
0
0
0
46
0
0
0
47
0
0
0
48
0
50
100
49
0
0
0
50
死亡 1
51
0
0
0
52
0
50
0
53
0
0
0
54
0
0
0
55
0
0
0
56
0
100
100
57
0
0
0
58
0
0
0
59
死亡 3
60
0
50
100
1 于试验前1天因肠系膜扭转而死亡; 2 于第25天因猪链球菌引起的肺炎而死亡; 3 因猪链球菌引起的心内膜炎而死亡。
3.4 蛔虫计数
在第1组,有两头猪(第1号和21号)各检出一条未成熟的L5期蛔虫(长度15~16 cm)(表2)。第2组则有第22号猪体内发现14条未成熟的L5期蛔虫(长度10~20 cm)(表3)。第3组,在第3号猪体内发现1条未成熟的L5期蛔虫(长度11 cm),另在第39号猪检出105条成熟蛔虫(表4)。在对照组,有5头猪(第4,8,16,20和32号猪)为成熟蛔虫阳性(所含蛔虫数在1~60条之间)(表5)。
表2 胖可求?4%粉剂的驱虫效果(第Ⅰ组)
(以胖可求?4%粉剂按芬苯哒唑1mg /kg 体重口服,从最后一次感染后3天开始用药,连用5天)
猪号
性别
组别
体重
0天
感染后粪便虫卵计数( EPG* )
蛔虫
肺
脏
42 天
49 天
56 天
1
公猪
1
35
0
0
0
1**
0
0
5
公猪
1
32
0
0
0
0
0
0
9
公猪
1
30
0
0
0
0
0
0
13
公猪
1
30
0
0
0
0
0
0
17
公猪
1
29
0
0
0
0
0
0
21
公猪
1
27
0
0
0
1**
0
0
25
公猪
1
26
0
0
0
0
0
0
29
公猪
1
25
0
0
0
0
0
0
33
母猪
1
33
0
0
0
0
0
0
37
母猪
1
32
0
0
0
0
0
0
41
母猪
1
30
0
0
0
0
0
0
45
母猪
1
28
0
0
0
0
0
0
49
母猪
1
26
0
0
0
0
0
0
53
母猪
1
26
0
0
0
0
0
0
57
母猪
1
19
0
0
0
0
0
0
EPG= 虫卵数/克粪便,下表同,; ** 未成熟L5期蛔虫
3.5 肺部病变
在所有试验猪中,均未能观察到相应的肺部病变(表2~4)。
表3 胖可求?4%粉剂的驱虫效果(第Ⅱ组)
(以胖可求?4%粉剂按芬苯哒唑1mg/kg体重口服,从最后一次感染后第12天开始用药,连用5天)
猪号
性别
组别
体重
0天
感染后粪便虫卵计数
蛔虫
肺
脏
42 天
49 天
56 天
2
公猪
2
35
0
0
0
0
0
0
6
公猪
2
33
0
0
0
0
0
0
10
公猪
2
30
0
0
0
0
0
0
14
公猪
2
29
0
0
0
0
0
0
18
公猪
2
28
0
0
0
0
0
0
22
公猪
2
28
0
0
0
14*
0
0
26
公猪
2
26
0
0
0
0
0
0
30
公猪
2
23
0
0
0
0
0
0
34
母猪
2
33
0
0
0
0
0
0
38
母猪
2
32
0
0
0
0
0
0
42
母猪
2
31
0
0
0
0
0
0
46
母猪
2
28
0
0
0
0
0
0
50
母猪
2
26
死亡 **
54
母猪
2
25
0
0
0
0
0
0
58
母猪
2
25
0
0
0
0
0
0
未成熟L5期蛔虫;** 于试验前1天因肠系膜扭转而死亡
3.6 乳斑肝
在第1~3组试验猪,未观察到乳斑肝。而在对照组(第4组),则有4头猪(第8,12,40和52号猪)检出乳斑肝,其中有3头猪的肝脏乳斑数量小于10个,有1头猪有一个较大的乳斑。
表4 某厂牌0.6%预混剂的驱虫效果(第Ⅲ组)
(以某厂牌0.6%预混剂按阿弗曼菌素0.1mg/kg体重,从最后一次感染后第1天开始用药,连用7天,阳性对照)
猪号
性别
组别
体重0天
感染后粪便虫卵计数
蛔虫
肺
脏
42 天
49 天
56 天
3
公猪
3
33
0
0
0
1*
0
0
7
公猪
3
32
0
0
0
0
0
0
11
公猪
3
31
0
0
0
0
0
0
15
公猪
3
29
0
0
250
0
0
0
19
公猪
3
28
0
0
0
0
0
0
23
公猪
3
27
死亡 **
27
公猪
3
27
0
0
0
0
0
0
31
公猪
3
35
0
2800
0
0
0
0
35
母猪
3
33
0
0
0
0
0
0
39
母猪
3
31
0
0
18700
105
0
0
43
母猪
3
30
0
0
100
0
0
0
47
母猪
3
29
0
0
0
0
0
0
51
母猪
3
26
0
0
0
0
0
0
55
母猪
3
25
0
0
0
0
0
0
59
母猪
3
24
死亡 ***
* 未成熟蛔虫;** 于第25天因猪链球菌引起的肺炎而死亡;*** 因猪链球菌引起的心内膜炎而死亡。
4 讨论
根据猪粪便蛔虫卵计数的结果,以猪蛔虫涓滴式感染后,分别在感染后第3天(第1组)和第12天(第2组)用胖可求?4%粉剂治疗,连续5天,其疗效为100%。以某厂牌0.6%预混剂治疗的第3组,有1头猪在用药后第49天排出虫卵;到第56天,饲养在同一猪栏的3头猪排出虫卵。而在未用药对照组(第4组),在用药后第42天有3头猪排出虫卵,第49天有11头猪,第56天有10头猪排出虫卵。
经剖检,第Ⅰ组有2头猪发现各有1条蛔虫,而第2组有1头猪发现有14条蛔虫。根据在用药后第42、49和56天对上述3头猪的粪便检查未发现蛔虫卵,再结合蛔虫的个体大小,可以认为这些蛔虫均为未发育成熟的蛔虫。在第3组,有1头猪检出1条蛔虫,根据蛔虫的个体大小以及其粪便中无蛔虫卵的结果,也认为这条蛔虫是未发育成熟的蛔虫。由此表明,这些未发育成熟的蛔虫可能是通过另一条移行途径导致蛔虫的发育延迟(Boest 等,2002)。第3组的另一头猪感染了105条蛔虫,由于粪便蛔虫卵数量很高(56天时EPG为18700),可以判定这些蛔虫均已发育成熟。在用药后第56天,该组另两头排出蛔虫卵的猪由于食粪癖(这3头猪于同一猪栏饲养)而可能为假阳性,因为其体内未发现蛔虫。但是由于只有粪便蛔虫卵数低于200才可被认为是假阳性,因此也不可排除至少有1头猪在屠宰前受到感染并排出虫卵的情况。但是猪被阳性猪排出的虫卵再感染的机率是可以忽略的,因为蛔虫卵在宿主体外发育成感染性虫卵的时间需要5~10周。
表5 未治疗对照组(阴性对照)的结果(第Ⅳ组)
猪号
性别
组别
体重 0天
感染后粪便虫卵计数
蛔虫
肺
脏
42 天
49 天
56 天
4
公猪
4
34
0
650
1900
8 #
0
0
8
公猪
4
32
600
1300
6250
39 #
0
1
12
公猪
4
31
0
0
50
0
0
2
16
公猪
4
30
0
0
50
1
0
0
20
公猪
4
28
2350
2650
8050
16
0
0
24
公猪
4
27
50
50
Nd**
0
28
公猪
4
26
0
50
0
0
0
0
32
公猪
4
26
0
2800
7100
60 #
0
0
36
母猪
4
34
0
50
0
0
0
0
40
母猪
4
31
0
0
50
0
0
1
44
母猪
4
30
0
0
0
0
0
0
48
母猪
4
29
0
50
100
0
0
0
52
母猪
4
28
0
50
0
0
0
1
56
母猪
4
25
0
100
100
0
0
0
60
母猪
4
23
0
50
100
0
0
0
#成熟蛔虫. ** Nd=未检测
粪便中的虫卵及蛔虫计数结果表明,某厂牌0.6%预混剂并非对所有猪只都有疗效。但也不排除其中有部分猪只用药量不足的可能,然而考虑到该组试验猪连续用药7天,并且该组猪的外观健康,因此用药量不足是不太可能的。 未给药组(第4组)的粪便虫卵计数结果有时与其蛔虫计数结果不相符。在第56天,即屠宰前1天,有10头猪排出蛔虫卵,但是在剖检时却只有5头猪为蛔虫计数阳性。而蛔虫计数为阴性的猪,其粪便虫卵计数量较低,均在50~100之间。同样,这也可提示其中有部分猪由于食粪癖而导致假阳性。另一方面,有1头EPG为50的猪,其体内仍有1条蛔虫,这表明这些阳性虫卵数低的猪只,在剖检前曾受到排出体外的少量蛔虫感染。然而,在粪便虫卵计数阳性、而蛔虫计数阴性的3头猪体内,则检测到乳斑肝,这也表明在本试验过程中存在移行幼虫。因此,我们认为一些在42~57天之间排出虫卵、但剖检时未发现蛔虫的猪,确实曾受到感染(“真正”阳性)。但目前还不清楚为什么本试验中的感染率这么低。在本实验室以前进行的一项研究中,用1000个发育虫卵感染猪(5天时间)后,其平均蛔虫数为45条(最多的为139条),并且11头猪中有9头为蛔虫阳性。而本试验中猪只未受到完全蛔虫感染是不太可能的,这是因为:
- 感染虫株是在最近(实验前一个月)才分离的。
- 仅将含有活动幼虫的已发育虫卵视为感染性虫卵。
- 感染猪的方式为3天涓滴式连续感染,因此虫卵被呕出体外的机率很小。因此,排出蛔虫的自愈现象可能是感染率如此低的主要原因。Roepstorff等(1977)曾报道了猪蛔虫的清除现象,这是由于宿主对蛔虫的免疫力迅速形成所致。
5 结论
本试验证实,胖可求?4%粉剂对猪蛔虫L3期移行幼虫(肝和肺阶段,3~9天龄)和肠道L4期移幼虫(12~18天龄)有很好的疗效。粪便虫卵计数和蛔虫计数结果也表明某厂牌0.6%预混剂并非对所有猪都有疗效。
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