神经干动作电位教学实验中一些问题的探讨
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神经干动作电位教学实验中一些问题的探讨
金香兰 沈云虹 张亚珍
神经干动作电位是生理教学中的一个重要的实验项目。生理学、药理学、病理生理学三门实验课重组为独立的“机能实验学”后也仍保留这经典的实验项目。该实验应用微机做神经干动作电位引导, 克服了示波器图像不能在屏幕上固定、不能储存和重放、不同实验结果不能在同一屏幕上显示和比较、动作电位的参数测量结果精确度不高等缺点。我们现在所用自制标本盒有可移动的7根电极(如图1) :1对刺激电极、1个接地电极、2对引导电极, 可以做双通道的引导, 再加上MPA -2000有采样、储存、重放功能, 大部分数据都可以在重放时进行测量、编辑、输出。为了做实验时节约时间, 也便于观察各个通道的波形, 我们一般把单通道和双通道一起打开, 在同一个屏幕上同时采样、观察、记录、储存。现将动作电位引导过程中经常遇到的问题及解决方法介绍如下。1 引导不出动作电位1. 1 标本兴奋性过低 如出现伪迹, 不见动作电位,
可能为刺激过小, 可适当增大刺激强度, 如仍不见动作电位或动作电位过小, 则可能为标本兴奋性过低, 应另换一个新鲜标本。坐骨神经干标本的兴奋性的高低直接影响实验, 所以标本制备时必须注意以下几点。1) 破坏脑脊髓一定要完全) , ;4) , 避免过度牵拉, 分离过程中尽量用玻璃分针, , 在游离的过程中时常滴加任氏液保持标本湿润;5) 做完的标本一定要放在带盖的培养皿内的用任氏液湿润过的滤纸上放置20分钟左右让标本的兴奋性稳定后在进行微机操作。
输出:最简单有效的方法是把一对刺激电极搭在蟾蜍的肌肉上看有无肌肉的收缩。以上所有的步骤都正常情况下仍没有信号我们就考虑它是因为系统和微机兼容性而出现的“死机”状态, 需要重新启动系统。2 刺激伪迹过大
此时可减小刺激脉冲波宽
、
也可调节引导电极与接地电极的距离。接地电极离引导电极越近伪迹越小, 通常相距0. 5cm 效果最好。3 波形倒置
实验过程中最简单的有效方法是调换这对引导电极上的鳄鱼夹, 这时波形仍然倒置且随着刺激强度的加大幅度不断增大, 我们考虑这个波不是动作电位而是刺激伪迹。准确的找到刺激伪迹的位置是测量潜伏期的关键(如图2) 。在实验过程中如何鉴别刺激伪迹与动作电位尤为重要(如表1) 。
表1 伪迹()
伪迹之增
, , 伪迹的位相不变。
(后出现) 信号极性, 动作电位的位相不变。调换同一对引导电极, 动作电位波形倒置。
4 单向波
1、2刺激电极;3接地电极;4、5、6、7两对引导电极
图1 自制标本盒
1. 2 MPA -2000多道生物信号采样分析系统故障 首先检
查标本盒与系统连接是否正常, 再检查通讯接口是否正常, 如提示外置设备无信息, 则检查通讯接口内部设置是否在CM1的状态, 在内部设置正常情况下重新接外置通讯接口, 其次检查各个通道的各种参数设置是否正确。最后检查刺激器有无
我们要引导的是标准的双向的动作电位, 解决的方法是拉大这对引导电极之间的距离, 直到出现标准的双向的动作电位。5 测出的动作电位传导速度误差过大
蛙类坐骨神经传导速度约为35～40m/s (室温18～25℃时) 。但测出的传导速度误差过大可能是标本拉得太紧或放置过松、距离测得欠准确, 也可能是标本制备过程中损伤过大以至神经兴奋性和传导速度下降, 还有可能是实验室温度过低使传导速度减慢。解决的方法是用双通道引导出两个动作电位, 测量传导速度(V =s/t ) 。s 代表两对引导电极之间距离(第4到第6电极之间距离) ;t =(t 2-t 1) 代表两个动作电位波峰之间的时间差, 所以我们测量的t 值和两对引导电极的距离尽量准确, 减少误差。需要注意的是两对引导电极的距离应尽量远些(如图3) 。
图2 潜伏期的测量 4 图3 动作电位的测量
作者单位:齐齐哈尔医学院
邮 编 161042 收稿日期 2004-04-26
总之, 做蛙坐骨神经干动作电位引导实验从做标本到微
机操作都不能急躁, 每一步都要耐心、细致, 这样才能引导出满意的动作电位波形。