食品中苏丹红1号高效液相色谱测定法的研究
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【检验方法研究】
食品中苏丹红1号高效液相色谱测定法的研究
向仲朝
[摘 要] 目的:建立食品中致癌染色剂苏丹红1号的高效液相色谱定量测定方法。方法:对测定方法中涉及到的
检测波长、流动相、操作方法以及方法的线性范围和最低检出量、精密度和准确度等方面进行实验研究。结果:选择苏丹红1号测定的最佳实验条件, 建立简便、快速、灵敏、精密度好、准确度高、。结论:本方法可用于食品中致癌染色剂苏丹红1号的分析测定。
[关键词] 苏丹红1号; 液相色谱; 食品
[中图分类号]R15515 [文献标识码]A ](--02
THE STU DY ON DETECTION OF SU DAN I IN B -chao. Center f or Disease Prevention and Cont rol of Mianyang , , Abstract to carcinogen coloring agent sudan hong Ⅰin food by high performance liq 2uid () . :Its experimentative conditions , including detected wavelength , fluid medium , dis posal of special specimens range of methods , minimum contents , precision , accuracy , currecy and application , have been investi 2gated. R esults :The best test conditions for detecting the sudan hong Ⅰare selected. simple and rapid method had been set u p to de 2tect the sudan hong Ⅰin food. Conclusion :The method can be applyed to detect the sudan hong Ⅰin food.
K ey w ords :Sudan hong Ⅰ; High performance liquid chromatography ; Food 苏丹红1号(苏丹1号) , 是一种人造化学染色剂, 按化学染料分类称为溶剂黄14(C. L. S olvent Y ellow 14) , 其化学结构属偶氮类染料, 是由苯胺重氮化与2-萘酚偶合制得。分子式为C 16H 12N 2O , 分子量为248128。苏丹红1号常用于机油、汽车蜡和鞋油等工业产品的着色, 不溶于水, 易溶于有机溶剂。从1995年以来, 欧盟和其他一些国家已经开始禁止在食品中添加“苏丹红1号”。科学实验发现, “苏丹红1号”可导致鼠类患癌, 在人类肝细胞研究中也显现出可能致癌的特性, 已被国际癌症研究中心(IARC ) 归为第3类致癌物质, 禁止在食品中使用。
2005年2月18日, 英国食品标准署展开了针对致癌染色剂“苏丹红1号”的世界历史上最大规模的419种食品召回行动。2月23日, 国家质检总局也发出紧急通知, 要求各地各部门加强对含有“苏丹红1号”致癌染色剂食品的监控, 严防含有“苏丹红1号”的食品进入中国市场。为配合食品卫生安全检查, 我们及时对高效液相色谱测定食品中苏丹红1号的方法进行了研究, 建立了简便、快速、灵敏、精密度好、准确度高的高效液相色谱定量测定方法。该法可用于食品中致癌染色剂苏丹红1号的测定。
011000g , 用无水乙醇溶解并稀释至10010ml , 即为1100mg/ml , 冰箱内保存。0102mol/L 乙酸铵:称1154g 乙酸铵, 加水溶解并稀释至1000ml , 经滤膜(0145μm ) 过滤。乙醇(A. R ) 经滤膜(0145μm ) 过滤。环己烷(A. R ) 、石油醚(A. R ) 。
113 样品和标准的测定 取1100mg/ml 的苏丹红1号标准液,
用无水乙醇稀释成01010mg/ml 和0110mg/ml 应用液, 取适量体积于10ml 比色管中, 用无水乙醇稀释成0100、010025、010050、010100、010250、010500、01100mg/ml 的标准系列, 进样2010μl 测定。饮料、调味品、配制酒、奶制品等, 可称5100g 样品, 加水适量或溶解, 加2010ml 环已烷或石油醚提取后, 取1010ml 环己烷或石油醚挥干, 用无水乙醇2150ml 溶解, 过滤, 测定。固体样品可称取5100g , 加无水乙醇适量, 超声溶解, 过滤, 测定。
2 结果与讨论
211 检测波长的选择 苏丹红1号的检测波长本文选用484nm ; 对样品提取液的分离分析, 具有峰形对称, 出峰时间快, 分离效果好, 抗干扰能力强的特点, 测定的灵敏度完全能满足食品卫生评价的需要。212 流动相的选择 经实验, 选用甲醇+0102mol/L 乙酸铵(90+10) 作流动相, 从01020mg/ml 混合色素标准的色谱分离图可以看出, 色谱图基线平直, 色谱峰型对称, 在此条件下, 食品中常见的其他色素如柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮兰、非食用色素酸性橙Ⅱ峰重叠, 且在苏丹红1号前出峰, 不干扰测定(图1) 。采用梯度洗脱
1 实验部分
111 仪器及工作参数 HP1100液相色谱仪, HP chemstation 色谱数据工作站, 可变波长检测器(190~600nm ) , 在线脱气; 色谱柱:Hypersil ODS C 185μm 250×4mm; 流动相:甲醇(A ) +0102m ol/L 乙酸铵(B ) (90+10) ; 检测波长484nm; 柱温:室温; 流速:110ml/min ; 进样量20μl 。112 试剂 苏丹红1号标准液:称取苏丹红1号(A. R )
[作者单位]绵阳市疾病预防控制中心, 绵阳, 621000
[作者简介]向仲朝(1957~) , 男, 大学, 医学学士, 副主任技
的方式(表1、表2) , 可以依次完成柠檬黄、苋菜红、胭
脂红、日落黄、亮兰、非食用色素酸性橙Ⅱ、苏丹红1号的分离测定(图2) 。
(下转第378页)
师.
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结果相似; 男生组四川与香港(中国) 比较则有差异[3],
CMH 评估接近FH (0153) , 较FPH 评估为好(FPH 低估3148cm ) (表4) 。是否提示选择评估FAH 的靶高方法时应
出版社, 2002. 23-341
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for height , weight , height velocity , weight velocity and stages of puberty [J]1Arch Dis Child 51:170-1791
[6]张邵岩、邵伟东、杨仕增, 等1中国人骨成熟度评价标准及应
因地择之, 表3似乎也提示人群不同, 方法不同, 结果有差异。造成这种差异的原因不甚清楚, 是否为地域、环境、经济状况不同, 导致骨成熟节奏及生长的差异, 造成两代、两地身高差异致使评估出现差异? 另外, 是否由于四川仍然存在城乡差别, 所以应用两种方法出现差异(表3) ? 提示建立本地区的靶身高评估模式能更好的体现遗传、环境对身高的影响, 较准确的评估终身高。
鸣谢:上海第二医科大学瑞金医院儿童生长发育中心王德芬教授给与的帮助!
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[收稿日期]2005-08-30
(上接第374页)
表1
梯度洗脱
Time (min. )
[***********]10
A %[1**********]0
B %[1**********]10
表2 检测波长
Time [1**********]2
Wavelength (nm )
[1**********]4
图2 梯度洗脱混合色素标准色谱图
213 萃取剂的选择 经实验证实:萃取剂可选择环己烷或
石油醚等, 一次萃取就能满足0~1100mg 苏丹红1号的测
定。214 线性范围与最低检出量 苏丹红1号在0~01100mg/ml 范围内, 浓度C 与峰面积(Area ) 呈直线相关关系, n =7, γ=019997, a =3813, b =7429412。方法最低检出量:以Area =60计, 方法最低检出量为010060μg 。按本法操作, 最低检出浓度为0100030mg/ml , 即0130mg/kg 。215 方法的精密度和准确度 连续测定6次, 含量为717mg/kg , 相对标准偏差rsd %=517; 含量为78mg/kg , 相对标准偏差rsd %=0142; 苏丹红1号的含量为0100mg/kg 的样品, 加标510~100mg/kg , 其回收率为9610%~104%。
[收稿日期]2005—04—08
图1 混合色素标准色谱图