大肠杆菌显色培养基
编号:CRM002
中文名称:大肠杆菌显色培养基
英文名称:ChromogenicE.coli Agar
用 途:
用于大肠杆菌的快速检测和计数。
原 理:
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;显色底物与大肠杆菌β-葡萄糖醛酸苷酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上产生绿色的菌落。
图鉴:
配方(每升):
蛋白胨 10g
酵母膏粉 3g
氯化钠 5g
十二烷基硫酸钠 0.1g
琼脂 12g
显色底物 2.7g
最终pH 7.0±0.2
使用方法:
1、称取本品32.8g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,无需高压灭菌。
2、以无菌手续取样品25g或25mL,加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:10继续稀释,选择三个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿。
3、采用倾注法:将培养基水浴冷却至约50℃,准备直径90mm已灭菌平皿,每个培养皿接种1ml样品,然后倾注约15ml上述溶解的培养基,混匀使其凝固,倒置,37℃培养24小时。
4、 采用表面接种法:冷却至约50℃,摇匀将培养基倾注于已灭菌平皿中。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光,4℃)。样品用划线接种法或滤膜法,37℃培养24小时。
5、观察结果。
质量控制:
本品倾注平皿后呈淡黄色,下列菌株接种后于36℃±1℃培养18h~24h生长情况如下表。
菌 名 菌 号 生长状况 培养特征 大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好 菌落绿色 弗氏柠檬酸杆菌 ATCC43864 良好 菌落无色 粪肠球菌 ATCC29212 受抑制 -----
贮 存:贮存于10℃-30℃、避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。
规 格:可配置1L的培养基干粉。