传递窗紫外灯表面消毒效果验证
传递窗紫外灯表面 消毒效果验证
目 录
1、概述 . ............................................................................................................................................ 3 2、实施日期及时间安排 . ................................................................................................................ 3 3、验证小组成员 . ............................................................................................................................ 3 4、仪器和设备 . ................................................................................................................................ 3 5、材料与试剂 . ................................................................................................................................ 3 6、验证过程 . .................................................................................................................................... 4 7、验证结果记录 . ............................................................................................................................ 6 8、再验证周期 . ................................................................................................................................ 7 9、相关SOP .................................................................................................................................... 7 10、QA 职责 . ................................................................................................................................... 7 11、修改事项 . .................................................................................................................................. 7 12、文档 . .......................................................................................................................................... 7
1、概述
进入微生物室的物品通过传递窗，经过紫外消毒后进入微生物室。为了确认传递窗紫外灯的消毒效果，特起草本方案对其进行验证。本验证用于QC 微生物室、无菌室传递窗紫外灯表面消毒效果检查。 2、实施日期及时间安排
2012年 月 日开始进行验证。 3、验证小组成员
4、仪器和设备
5、器材
5.1灭菌刻度吸管（1ml ，10ml ） 5.2灭菌试管
5.3灭菌平皿 5.4酒精灯 5.5载体：（1.0×1.0cm 的玻片） 6、材料与试剂 6.1纯化水 6.2营养琼脂培养基 6.3改良马丁琼脂培养基 6.4营养肉汤培养基 6.5改良马丁培养基
6.6金黄色葡萄球菌[CMCC（B ）26 003] 6.7枯草芽孢杆菌[CMCC（B ）63 501] 6.8大肠杆菌[CMCC（B ）44 102] 6.9白色念珠菌[CMCC（F ）98 001]
6.10稀释液（0.1％吐温80，0.1％蛋白胨溶液） 7、验证过程 7.1 试验环境
试验在洁净度10 000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行，全过程严格
遵守无菌操作。单向流空气区、工作台面及环境定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。 每次操作开始前，开紫外灯照射1小时。 7.2 培养基的制备 7.2.1营养琼脂培养基
配方：
营养琼脂培养基粉 31.0g 纯化水 1000ml
配制：
根据需要量称取营养琼脂培养基粉置适宜容器中，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH 至7.1±0.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121℃×15分钟。
7.2.2 改良马丁琼脂培养基
配方：
改良马丁琼脂培养基粉 42.0g
纯化水 1000ml
配制：
根据需要量称取改良马丁琼脂培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH 至6.4±0.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115℃×20分钟。 7.2.3 营养肉汤培养基
配方：
营养肉汤培养基 20g
纯化水 1000ml 配制：
称取营养肉汤培养基20克，加1000ml 纯化水，加热溶解，加热至沸，冷却至常温，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121℃×15分钟。 7.2.4改良马丁培养基
配方：
改良马丁培养基粉 28.0g
纯化水 1000ml 配制：
根据需要量称取改良马丁培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH 至6.4±0.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115℃×20分钟。
7.4 方法验证试验 7.4.1辐照强度测定
7.4.1.1开启紫外灯5min 后，用中心波长为253.7nm 的紫外线强度测定仪在灯管下方垂直1m
的中心处测量其辐照度值（uW/cm2）。 7.4.1.2测量时，电压应稳定在220V 。
7.4.1.3普通型或低臭氧型直管紫外线灯（30W ），在灯管下方垂直1m 的中心处，新灯管的
辐照度值应≥90 uW/cm2 。使用中的灯管的辐照度值应≥70 uW/cm2 ，低于此值者应
予更换。 7.4.2 照射剂量
表面消毒接受的照射剂量，应达杀灭目标微生物所需。对大肠杆菌，照射剂量应达到7.5×103 u W ·s/cm, 对金黄色葡萄球、白色念珠菌、枯草芽孢杆菌应达到2.53×
2
104u W ·s/cm。
2
7.4.2.2照射剂量计算：
照射剂量（u W ·s/cm）＝紫外灯管强度（uW/cm2）×时间（s ）
2
7.4.3 细菌及其芽孢和真菌杀灭效果的测定 7.4.3.1菌液的制备
金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、白色念珠菌培养后，将菌液进行活菌计数。 7.4.3.2 将灭菌载体平放于灭菌平皿内，每个载体滴注定量菌悬液，（载体回收菌量达5×
10～5×10cfu/片），涂匀，放37℃培养箱烘干。开启紫外灯5min 后，将16个染菌玻片平放于灭菌平皿内，水平放于适当距离照射，于4个不同间隔时间（15min 、30 min、45 min、60 min）各取出4个染菌玻片，分别投入4个盛有5ml 洗脱液试管中，振打80次。
7.4.3.3经适当稀释后，取1ml 洗脱液，作平板倾注，每个染菌玻片接种两个，细菌放30～
35℃培养48小时作活菌计数，真菌放23～28℃培养72小时作活菌计数。
7.4.3.4阳性对照，除不做照射处理外，取4个染菌玻片，分别投入4个盛有5ml 洗脱液试管
中，振打80次。余按7.4.2.3同样操作。 7.4.3.5计算杀灭率
阳性对照回收菌数－试验组回收菌数
杀灭率（％）＝ ×100％ 阳性对照回收菌数 7.4.3.6判定标准 对指示菌杀灭率≥99.9％判为消毒合格。 8、验证结果记录：
附件1. 试验菌数量测定原始记录
5
6
8、再验证周期
传递窗构造或紫外灯管放置位置发生改变时。
9、相关SOP
10、QA 职责
QA 必须参与验证的评审阶段； QA 必须审阅最终报告（包括草案）； QA 审阅者不应是参与实施的其他QA 人员。 11、修改事项
在实施过程中，如果方案需要修改，必须提交书面的报告，阐述修改的原因，修改的内容，并经过验证小组负责人及QA 的认可。修改后的方案同先前执行的方案一起归档。 12、文档
所有的相关文档都应该保留至少5年，这些文档应包括如下内容：
原始方案、修改后的方案（如果有的话）、偏差报告、原始数据、原始报告和最终报告、其中，报告应该包括以下内容：
记录的原件（或复印件）、测试项目及条款、实验开始和结束的日期、材料和方法描述、出现的偏差描述（如果有的话）、实验结果。