高效液相色谱法测定食品中的甜蜜素
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化学分析计量2005年,第14卷,第3期
高效液相色谱法测定食品中的甜蜜素
郑 玲 李丽华 郭 蔚 罗兆飞
(广西出入境检验检疫局,南宁 530021)
摘要 利用次氯酸钠将食品中的甜蜜素转化为N,N2二氯环己胺,以正己烷萃取后用高效液相色谱法测定。采用Extend-C185μm不锈钢柱,以甲醇-水(体积比为80∶20)作流动相,二极管阵列检测器检测波长为314nm。甜蜜素的浓度在1~80μg/mL内与色谱峰面积成良好的线性关系,回收率为102.8%~103.0%,检出限为1μg/mL,测定结果的相对标准偏差为0.84%。
关键词 高效液相色谱法 食品 甜蜜素 次氯酸钠
甜蜜素化学名为环己基氨基磺酸钠,是我国
1986年正式批准使用的食品添加剂,甜度为白糖的50~60倍,且口感好,价格低廉,广泛应用于食品工
业。近年发现甜蜜素可能有致癌性,其代谢产物环己胺对心血管系统和睾丸有毒理作用准
[2]
[1]
。国家标
规定食品中甜蜜素的最大使用量为0.25g/kg,
[3]
标准检验方法为气相色谱法、[5法。多采用直接测定及其制品
[7]
准使用液;
实验所用其它试剂均为分析纯; 实验用水为蒸馏水。1.2 色谱条件
m(250mm×:d.);柱温:;:-水(体积比为80∶20);流速:1in;检测波长:314nm;进样量:10μL;根据保留时间定性,以峰面积定量。1.3 样品处理1.3.1 样品溶液制备
[]
,
。笔者改进了样品前处理方法,使用不
同的流动相分析了广西境内中越边贸中常见的小食品绿豆糕、椰子糖、菠萝蜜干果中的甜蜜素,测定结果准确。1 实验部分1.1 主要仪器与试剂
称取绿豆糕样品2.00g,加入水50mL,于沸水浴中加热15min,冷却,加入3.0mL亚铁氰化钾溶液和3.0mL乙酸锌溶液,混匀,用水定容至100mL,放置片刻,过滤得样品溶液。1.3.2 衍生化
高效液相色谱仪:Agilent1100型,附带DAD检测器,美国安捷伦科技有限公司;
乙酸锌溶液:219g/L。称取乙酸锌219g,加入3.0mL乙酸,用水溶解并定容至1000mL;
吸取10mL样品溶液,加入2mL硫酸溶液、5mL正己烷、1mL次氯酸钠试验液,涡旋1min,弃去水相,保留正己烷提取液。向正己烷提取液中加入5mL氢氧化钠溶液,涡旋1min,弃去碱水层。向有机相中加入5mL水,涡旋1min,取正己烷层,过0.22μm滤膜后供液相色谱分析。 吸取甜蜜素标准使用液10mL,按样品溶液相同步骤衍生化。2 结果与讨论2.1 色谱图
亚铁氰化钾溶液:106g/L。称取106g亚铁氰化钾,以水溶解并定容至1000mL;
次氯酸钠试验液:把次氯酸钠溶液(含有效氯
7.5%)用水稀释至2倍体积;
硫酸溶液:把浓硫酸用水稀释至2倍体积; 氢氧化钠溶液:0.5mol/L。称取20g氢氧化钠,用水溶解并定容至1000mL; 甲醇:色谱纯;
甜蜜素标准溶液:准确称取甜蜜素标准物质(国家标准物质研究中心)0.1000g,置于100mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,配制成1.00mg/mL的标准储备液。使用时,用蒸馏水稀释成所需浓度的标
图1为甜蜜素标准物质的色谱图,图2为绿豆糕样品加标后的色谱图。2.2 流动相
分别以不同比例的乙腈-水、甲醇-水作流动
收稿日期:2005202201
郑玲,等:高效液相色谱法测定食品中的甜蜜素
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得结果的精密度良好。
表1 精密度试验结果
测得值/μg・mL-1
9.82 10.04 9.919.85 9.86 9.97
图1
甜蜜素标准物质的色谱图
平均值/μg・mL-1
9.91
RSD/%0.84
称取一定质量的样品,分别加入不同浓度的甜
蜜素标准使用液,按以上条件处理测定后,以测得值计算回收率,结果列于表2。由表2可知,甜蜜素的回收率为102.8%~103.0%,表明本法测量准确度较高。
图2 绿豆糕样品加标后的色谱图
表2 回收试验结果
本底值/
μg・mL-1
000
相进行测定,当乙腈-水比例为7∶3、甲醇-水比例为8∶2时,均能获得良好的分离度和色谱峰型,考虑到乙腈的毒性较大,且价格较高,选择甲醇-水(体积比为80∶20)作为流动相。2.3 沉淀剂的使用
加标量/
μg・mL-1
21020
实测值/μg・mL-1
2.0610.2820.回收率/
%103.0102.8103.0
2.6 在测定绿豆糕、椰子糖、菠萝蜜干果等复杂样品
时,mL品的前处理步骤,2.4 分别配制浓度为0.5、2、4、10、20、40μg/mL的系列甜蜜素标准使用液,衍生化处理后最终浓度分别为1、4、8、20、40、80μg/mL。按色谱条件进行测定后,以峰面积A对浓度c(μg/mL)作回归分析,得回归方程为A=0.9549c-1.1529,相关系数为0.9991。结果表明,最终溶液中甜蜜素浓度在1~80μg/mL内呈良好的线性关系。 以3倍信噪比求得甜蜜素的检出限为1μg/mL,折合成样品中甜蜜素的含量为0.025g/kg。2.5 精密度与回收试验
7种,。3 结论
利用次氯酸钠将食品中的甜蜜素转化为N,N2二氯环己胺,经正己烷萃取,用高效液相色谱法测定,线性范围宽,灵敏度、准确度及精密度均较高,能满足国家标准对甜蜜素测定的要求。
参考文献
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卫生,1998,14(3):169
6 张秀尧.反相高效液相色谱法测定食品中甜蜜素.理化检验:化学
平行称取6份样品,均加入10μg/mL甜蜜素标准使用液,按以上条件处理测定后,计算测得值的相对标准偏差,结果列于表1。由表1可知,本法测
分册,2000,36(10):451
7 温志海,占春瑞,鄢爱平.液相色谱法测定酱油及其制品中甜蜜素
的研究.检验检疫科学,2004,14(2):25
DETERMINATIONOFSODIUMCYCLAMATEINFOODBYHPLC
ZhengLing,LiLihua,GuoWei,LuoZhaofei
(GuangxiEntry2ExitInspectionandQuarantineBureau,Nanning 530021,China)
ABSTRACT SodiumcyclamateinfoodwasdeterminedbyHPLCafterbeingderivatedtoN,N2dichloro2cyclohexylaminewithso2
diumhypochlorite.UsingExtend-C185μmstainlesscolumnwithmethanol-water(80∶20)asthemobilephaseandthedetectionwavelengthof314nm.Theresultsindicatedthattheworkingcurvesofsodiumcyclamatewaslinearintherangeof1~80μg/mL,therecoverywas102.8%~103.0%,thedetectionlimitwas1μg/mLandRSDwas0.84%.
KEYWORDS HPLC,food,sodiumcyclamate,sodiumhypochlorite