新鲜蔬菜中β-胡萝卜素的提取.分离.测定
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新鲜蔬菜中β-胡萝卜素的提取、分离和测定
班级：临五一班（2小班）姓名：任依梦 学号：5117119051
【实验目的】
● 掌握从新鲜胡萝卜中提取、分离β-胡萝卜素的方法
● 掌握应用紫外-可见吸收光谱法测定β-胡萝卜素的紫外光谱图
● 了解共轭多烯化合物π→π*跃迁吸收波长的计算方法及共轭多烯化合物的紫外吸收光谱特征
【实验原理】 简介 胡萝卜素是维生素A的前体，具有类似维生素A的活性，有α、β、γ异构体，其中以β-胡萝卜素生理活性最强。β-胡萝卜素的结构如下：
β-胡萝卜素是长链多烯化合物，它的π-π*跃迁吸收带处于可见光区，因此纯β-胡萝卜素是橘红色晶体。 提取 胡萝卜素不溶于水，可溶于有机溶剂，故可用有机溶剂来提取。 分离 采用柱层析法将提取液中β-胡萝卜素分离出来。
测定 经分离提纯的β-胡萝卜素含量可以直接用紫外-可见分光光度法测定。
【实验步骤】
1. β-胡萝卜素的提取
20g新鲜胡萝卜+40mL1：1丙酮-
石油醚混合溶剂研磨5min 萃取（分液漏斗）
2. 柱层析
在层析柱中加入少许浸有石油醚的脱脂棉→加入一半层析柱高的石油醚→加入20g中性氧化铝→在氧化铝上面加一圆形滤纸→加入β-胡萝卜素提取液→用9:1（体积比）石油醚-丙酮溶液洗脱，进行层析
3. β-胡萝卜素的紫外-可见吸收光谱的测定
将层析分离得到的橙黄色试样稀释后加到1cm的比色皿中，以石油醚作空白试剂，用分光光度计测定400~600nm范围内的吸收
【实验结果】
β-胡萝卜素的吸收曲线