细菌培养特性
各菌培养特性总结
07检本2班 朱荣荣
一、革兰阳性球菌
1、葡萄球菌属(金,白,柠)
呈单个,成双,断链或成簇排列呈葡萄串样,无鞭毛和芽孢,营养要求不高,在普通培养基上生长良好,在含有血液和葡萄糖的培养基中生长更佳,需氧或兼性厌氧,少数专性厌氧。在肉汤培养基中24小时后呈均匀混浊生长,在琼脂平板上形成圆形凸起,边缘整齐,表面光滑,湿润,不透明或半透明的菌落。不同种的菌株产生不同的色素,如金黄色、白色、柠檬色。色素为脂溶性。葡萄球菌在血琼脂平板上形成的菌落较大,有的菌株菌落周围形成明显的全透明溶血环(β溶血),也有不发生溶血者。凡溶血性菌株大多具有致病性。
2、链球菌属(甲,乙,丙,肺,粪)
直径小于2微米的球形或卵圆形,呈链状排列,无芽孢,大多数无鞭毛,但能形成荚膜和粘液层,多数兼性厌氧,少数厌氧。营养要求较高,培养基中需加入血清、血液或腹水。在液体培养基中常呈沉淀生长,但也有的呈均匀混浊生长(如肺炎链球菌);肺炎链球菌在血平培养基上形成细小、表面光滑、圆形、灰白色、半透明或不透明的粘液状菌落,形成草绿色溶血环,因产生自溶酶,48小时后呈“脐窝状”。在血平板上生长的菌落周围,可出现性质不同的溶血圈,完全溶血的称乙型溶血性链球菌;绿色溶血称甲型溶血性链球菌或绿色链球菌;不溶血的称丙型链球菌或不溶血性链球菌。
二、革兰阴性球菌
1、奈瑟菌属
淋病奈瑟菌双球菌、肾形。无芽胞、无鞭毛,在液体培养基上混浊生长,在巧克力色琼脂上生长呈圆形凸起、无色或灰白色,不透明或半透明。直径0.5-1mm的光滑型菌落。菌落具有自溶性,不易保存。卵黄平板上形成较大、光滑湿润、扁平、边缘整齐的菌落。
脑膜炎奈瑟球菌为专性需氧菌。有荚膜,有菌毛,无鞭毛,无芽孢,因本菌对蛋白胨和琼脂中所含脂肪酸和微量金属非常敏感,故在普通琼脂培养基上不能生长,需用营养丰富的培养基才能生长。在血平板或巧克力色血琼脂培养基上是菌落直径为1-2mm的不溶血呈圆形凹起、光滑湿润、半透明或透明、边缘整齐,灰蓝色菌落。卵黄琼脂平板上位无色,光滑,湿润奶油状的菌落,在24小时孵育后发生自溶。在血清肉汤中均匀生长。
2、卡他莫拉菌
双球菌,无鞭毛,无芽孢,无荚膜,菌体细长。在血琼脂平板上初为灰白或浅红棕色,光滑,圆形凹起,
不透明的菌落,继续培养48h,菌落表面干燥,坚韧,如果用接种环推移,整个人菌落可在平板上移动。
三、肠杆菌科
1、大肠埃希菌
革兰阴性直短杆状,多数有鞭毛,能运动,普通平板上形成圆形,光滑湿润,灰白色菌落,在EMS上呈不透明,大而隆起,紫黑色色有金属光泽,SS上由于发酵乳糖形成红-粉红色或中央为粉红色,周围无色,圆形凹起,边缘整齐,多为光滑型的菌落,血平板上有β溶血的透明溶血环。
2、沙门菌属(伤寒,副伤寒)
直杆状,较细长,兼性厌氧菌,无芽胞,一般有鞭毛,无荚膜,多数有菌毛,革兰氏阴性杆菌。本菌不分解乳糖并产碱。在普通琼脂平板上形成圆形,光滑湿润,半透明,边缘整齐的菌落,有时可出现粗糙型菌落。在肠道杆菌选择性培养基上形成透明或半透明,光滑湿润的菌落,有些产硫化氢的菌株在SS上形成中心黑色的菌落。
3、志贺菌属(福氏,痢疾)
革兰阴性短小杆菌,(2~3)μm×(0.5~0.7)μm,无荚膜,无芽胞,无鞭毛,有菌毛。不分解乳糖。需氧或兼性厌氧,液体培养基中呈浑浊生长,在普通琼脂平板和SS培养基上形成直径1-2mm左右的中等大小、无色或淡黄色,半透明,圆形凹起,光滑湿润的菌落,EMB上无色或不透明的琥珀色。宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌落。
4、枸橼酸杆菌属
革兰阴性,有动力,有周身鞭毛,无芽孢,无荚膜。兼性厌氧,营养要求不高,能在普通培养基上生长。在血平上形成灰白色,湿润,隆起,边缘整齐的不溶血菌落。在肠道选择培养基上为乳糖发酵较为浑浊的菌落。在SS上形成有黑色中心的菌落。
5、克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌,产酸克雷伯菌)
革兰阴性,无鞭毛,无芽孢。营养要求不高,有普通琼脂培养基上形成较大的灰白色粘液菌落,以接种环挑之,易拉成丝,有助鉴别。在肠道杆菌选择性培养基上能发酵乳糖,呈现有色菌落。
6、变形杆菌属(普通,奇异)
革兰氏染色阴性,两端钝圆、有明显的多形性,呈球状或丝状。无芽胞、无荚膜、周身鞭毛、运动活泼、兼性厌氧。大多数在普通固体培养基上菌落呈迁徙生长。在肠道选择鉴别培养基上形成圆形,扁平,无色半透明,乳糖不发酵的菌落,产生硫化氢的菌种在SS上菌落中心为黑色。
7、肠杆菌属(产气肠杆菌,)
革兰氏阴性,粗短杆菌,周生鞭毛运动,无芽孢。兼性厌氧,在普通培养基上生长,形成大而湿润,灰白色的黏液状菌落,在血平上不溶血,在肠道选择鉴别培养基上形成乳糖发酵(呈红色)的菌落。
四、不发酵革兰阴性杆菌
1、假单胞菌属—铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌形态为直或稍弯、两端钝圆的杆菌,有1~3根单端鞭毛,运动活泼。临床分离的菌株常有菌毛和微荚膜,不形成芽胞。革兰阴性。专性需氧菌。在普通培养基上生长良好,菌落大小不一,平均直径2mm~3mm,扁平,隆起,边缘不整齐,且常呈相互融合状态,陪地变为绿色。由于本菌产生水溶性色素,使培养基被染成蓝绿色或黄绿色。在血琼脂平板上菌落较大,灰绿色或蓝绿色菌落,有金属光泽和生姜气味,菌落周围形成透明溶血环。在肉汤中形成菌膜,肉汤澄清或微混浊, 菌液上层呈绿色。培养在pH8.0的碱性环境中,有自溶现象。
2、产碱杆菌属(粪产碱)
不分解糖类的革兰阴性菌,常单个存在,有时成弧形成对或成链状,周身鞭毛,有动力。在SS上形成无色透明菌落,在血平上形成灰色,扁平,边缘薄而不整齐的较大菌落,不溶血,有水果味,并在菌落下面的血琼脂上呈明显的绿色。在肉汤中培养24h呈均匀混浊,表面形成菌膜,管底形成沉淀生长。
五、需氧革兰阳性杆菌
1、炭疽芽孢杆菌
革兰阳性,两端平切,常单个散在或呈短链。有荚膜,无鞭毛。营养要求不高,在普通琼脂上37℃培养18~20小时后,生成扁平、干燥无光泽、灰白色、不透明、边缘不整齐的卷发型大菌落,接种针挑取能拉起细丝。在普通肉汤中培养时絮状沉淀生长,培养液澄清,表面无菌膜。在血平上呈较大,灰白色,扁平,边缘不整齐的菌落,35摄氏度孵育12-15h,不溶血,18-24h后可见轻微溶血。在明胶培养基中由于细菌沿穿刺线向四周扩散生长,使明胶表面化成漏斗状。
2、白喉棒状杆菌
革兰阳性,菌体大小长短不一,直或稍弯,一端或两端膨大,排列不规则,常呈L、V、X、T等字形或排成栅栏状,无芽孢和荚膜和鞭毛。革兰阳性;用Albert染色法有异染颗粒。白喉杆菌为需氧菌或兼性厌氧菌,在含血液、血清或鸡蛋的培养基上生长良好。在血平上灰白色,不透明的S型菌落,轻型菌株的菌落有狭窄溶血环。在含有0.033%亚碲酸钾血清培养基上生长繁殖能吸收碲盐,并还原为金属碲,使菌落呈黑色或灰黑色。在鸡蛋斜面上可长出细小灰白色,有光泽的圆形菌落或形成菌苔。在液体培养基中生长表面形成菌膜,同时有颗粒沉淀。
六、厌氧菌---梭状芽孢杆菌
1、破伤风梭菌
本菌细长,鼓槌状,有周身鞭毛,能运动,无荚膜,有芽孢。初期培养物为革兰阳性,培养48h后,
易转为阴性。专性厌氧,在普通上不易生长。在血液琼脂平板上培养48h呈薄膜状生长,菌落半透明,灰白色,边缘疏松似羽毛状,伴β溶血。在疱肉培养基中培养,肉渣部分被消化,肉汤浑浊,微变黑,有少量气体,因生成甲基硫醇(有腐败臭味)及硫化氢导致培养物有腐败性恶臭。可液化明胶。
2、产气荚膜梭菌
革兰氏阳性粗短大梭菌,单独或成双排列,有时也可成短链排列,芽胞呈卵圆形,在机体内可见有明显的荚膜,无鞭毛,不能运动。厌氧程度不如破伤风梭菌要求高。在液体培养基有明显生长,4-6h孵育后出现表面生长。在固体培养基上,24h培养后表面菌落直径2-4mm,圆形,凹起,光滑,半透明,边缘整齐,无迁徙生长现象。在血液琼脂平板上菌落较大、灰白色、不透明,边缘呈锯齿状,多数菌株有双层溶血环,内环是θ毒素的作用,而外环不完全溶血是a毒素所致。在疱肉培养基中肉渣不被消化,肉渣呈粉红色,产生气体。在牛乳培养基中能分解乳糖产酸,使酪蛋白凝固,同时生成大量气体,将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状,管内气体常将覆盖在液体上的凡士林层向上推挤,这种现象称为“汹涌发酵”,
3、肉毒梭菌
粗短杆菌,一般呈单个或成对存在,有时可形成短链。无菜膜,有鞭毛,能运动。产生的芽胞呈卵圆形,位于菌体近端而成为球拍状,厌氧性的状菌,新鲜培养基的革兰氏染色为阳性。在包肉培养基中生长旺盛,呈均匀混浊,产生少量气体,肉渣被消化为黑色,有腐败性恶臭。在厌氧血平上形成较大的,圆形,中心凹起而光滑,边缘不整齐,略带绒毛状的菌落,有β溶血环。