蟾蜍的生殖及泌尿系统(基础生物实验报告)
蟾蜍“双毁髓”手术技术，剑突透明软骨取材、染色、光镜下显微观察，蟾蜍泌
尿系统与生殖系统的解剖实习
一，实验目的：
1，联系掌握“双毁髓”技术
2，染色并观察软骨组织的形态
3，观察蟾蜍的泌尿及生殖系统
二，实验原理：
1，蟾蜍的正确握拿方法，动物探针的正确使用
2，蟾蜍的“双毁髓”手术技术
3，两栖类动物的解剖技术及手术剪的使用
4，使用苏木精染色蟾蜍剑突的透明软骨，光镜观察
三，动物与器材：
实验动物：雄性蟾蜍一只
实验试剂：苏木精染色剂
实验器械：显微镜，手术剪，骨剪，镊子，吸水纸，大头针，解剖针，解剖盘 四， 实验步骤：
1，左手食指与中指、无名指与小指分别夹着前肢、后肢，握住蟾蜍，拇指按住吻端使头部上下活动，两耳后腺间出现一道褶线，此线中点或用金属毁髓针沿头背中线向后移动触到一凹陷处，即枕骨大孔。拇指下压使头前俯与脊柱相连处凸起，同时将毁髓针由凹陷处垂直刺入0.5~1mm，再将针从枕骨大孔向前平行刺入颅腔并在颅腔内搅动捣毁脑，然后再将毁髓针撤回至枕骨大孔，反向插入脊椎管破坏脊髓，检查蟾蜍四肢肌肉完全松驰后处死成功
2，将蟾蜍置于解剖盘上，腹部朝上，四肢伸展后用大头针固定。左手用镊子提起腹部皮肤，用手术剪前端1/3处剪开一小口，并从小口处向前将腹部皮肤剪开至下颚前端。向后剪至两后肢基部之间，泄殖孔稍前方再将皮肤向两侧拉开。
3，用镊子提起腹部肌肉，用剪刀沿腹部中线剪开腹壁至剑突处，然后向左向右剪开，用手术剪剪取薄的剑突软骨组织，置于载玻片上，用苏木精染色后，直接在光镜下观察（不必封片），在显微镜观察到软骨组织细胞形态后拍摄图片。
4，向两侧拉开蟾蜍的腹部肌肉找到蟾蜍的泌尿及生殖系统，小心地用剪刀和手术剪将其分离，置于解剖盘上并拍摄图片。
5，处理掉蟾蜍，洗净解剖盘和实验器械，将显微镜收好放入柜中。
五，实验结果：
1，剑突软骨组织细胞图：
2，蟾蜍泌尿及生殖系统：
六，实验结论
1，“双毁髓技术”是一种方便的麻醉蟾蜍的方法，通过“双毁髓技术”可以排除神经中枢对试验结果的影响，另外如果不毁髓，只是单纯的杀死（此时神经系统还在部分活动），青蛙四肢僵硬，还可能跃起，不便于操作。
2，显微镜下可以观察到剑突软骨组织被染成蓝色，其中有许多软骨细胞。
3，蟾蜍肾脏最初为一对临时性器官，称为前肾或原肾。原肾的导管叫做原肾节，最初是体腔壁上的增厚部分，起源于中胚层，后来形成管状，与体腔壁脱离。当蝌蚪变态即将完成，尾部消失之后，原肾管前端斜分为二：前面的一部分形成米氏管即输卵管（雄性蟾蜍的米氏管退化）；后面的一部分则演变为吴氏管——用于输尿输精。脂肪体呈黄色，与生殖腺生殖活动机理有关。是储存营养的结构。
七，问题解答：
1，用“双毁髓法”麻醉蟾蜍的注意事项：
针尖插入颅腔毁脑时，角度必须足够的小，小心不要将针插入口腔中。
2，剑突有什么生理功能？
剑突是心脏区胸壁前下端的软骨，起着保护心脏的作用。若人的此处受到暴力击打，可能会使剑突软骨直接压迫心脏，同时也能够直接刺激胃上中枢神经，使得人当即感到胸闷，气短，呼吸困难，甚至因剑突软骨骨折，进而使软骨茬刺破心脏。
3，脂肪体有什么生理功能？
脂肪体是营养物质代谢的中间场所，具有解毒，贮存和排泄等功能。
4，毕氏器是什么结构？具有什么生理功能？
毕氏器是位于生殖腺与脂肪体之间的肉红色圆形结构，相当于退化卵巢的残余部分，内含有许多尚未分化或发育不全的卵细胞。在雄性蟾蜍体内，若将精巢摘去，可导致毕氏器发育成具有产卵功能的卵巢，而原来退化的米氏管将在雌性激素的影响下，发育为子宫，雄性蟾蜍变回雌性，发生了性逆转。
5，羊膜的有无对吴氏管和米氏管的发育有何影响？
在无羊膜的动物中，中肾执行排泄功能，吴氏管形成输尿管，雄性的吴氏管与睾丸相连，具有输尿与输精的作用，米氏管退化；雌性的吴氏管只用于输尿，米氏管形成输卵管。在羊膜类动物中，后肾代替中肾，后肾导管构成输尿管，雄性的吴氏管与睾丸相连形成输尿管，雌性的则退化。
八，参考文献：
1，《普通动物实验教程》 主编：赛道建、贾少波 科学出版社 2010 2，《蛙体解剖学》 主编：周本湘 科学出版社 1956 3，《普通动物学实验指导》主编：刘凌云、郑光美 高等教育出版社 2010 4，《脊椎动物比较解剖学实验指导》主编：马克勤 高等教育出版社 1986 5，期刊论文《快速制作蟾蜍坐骨神经标本的一种方法》
生物学通报 2004 25期 （4）
6，期刊论文 《剑突综合征12例报道分析》
中国医药指南 2011 31 （2）