薄层色谱法对几种氨基酸鉴定实验的改进
第3期
金华职业技术学院学报
45
薄层色谱法对几种氨基酸鉴定实验的改进
张秋霞郭航鸣
【摘要】目的:改进常用薄层色谱法定性鉴定氨基酸实验中常出现展开效果差,易拖尾,重复性差等不足问题,探讨微乳氨基酸乳液展开剂的性能和效果。方法:采用十二烷基硫酸钠/正丁醇/正己烷/水配制成微乳液作为展开’剂,对教学中常见的5种氨基酸进行微乳薄层色谱法分析。结果:展开效果好,色谱性能稳定,重现性良好。结论:微乳液在氨基酸薄层色谱教学中是可采用的一种方法。
关键词:薄层色谱法微乳液展开剂Rf值中图分类号:0652.63
文献标识码:A
ImprovementoftheIdentificatingTest、)l,iththeThin-layer
in
Chromatography
(Jinhua
thegenernal
College
SomeAminoAcids
Guohangming
and
Zhangqiuxia
ofProfession
Abstract
Technology)
judge
the
characterofthe
amino
Objective;To
improve
thin-layerchromatographyto
genernally
the
acid.Intheprocessofthetesteffect,delaythe
itappearsinsttt/icientproblemswiththe
and
5
expensionarythe
resultof
tail,therepeatingcharacter
liguid
that
uses
as
andect.’11lepaperinvestigatestheproperty
a
microemulsion
developer.
Methods:It
analysesgenernallythedodecylprocess
aminoacids
alco—-
withthemicroemulsion
thin-layerchromatographyusingsodium
asas
aa
sulfate(SDS)/n—-buty
ofthe
in
the
property
hoe/n—hexane/watermicroemulsionliguidmicroemulsiongood
in
the
liguid
has
a
developerinthe
teaching.Results:The
and
good
effect
developer.Chromatographyisstable
is
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repeating.Conclusion:Themicroemulsionliguidmethodthatmaybeappliedinthe
acids.
Rfvalue
processoftheteachingtothethin-layerchromatographyoftheamino
Keywords,111ethin-layer
chromatography
Microemulsion
developer
引言
在分析化学教学过程中,我们常用薄层法定性鉴定氨基酸,但在操作过程中,常常存在展开效果较差,易拖尾,重现性差等不足,使实验结果不够理想,,通过采用微乳液进行实验,结果表明,微乳液具有降低表面张
酸展开剂的应用效果。
1
实验部分
微乳液是由表面活性剂,助表面活性剂,油和水按
一定配比后形成的,有文献报道将其作为流动相用于薄层色谱分析中四,十二烷基硫酸钠(SDS).正丁醇.正己烷.茚三酮(均为分析纯),5种氨基酸(均为层析纯),各自用蒸馏水配成1.唱几溶液、硅酸G、层析板、展开池、以SDS作为表面活性剂、助表面活性剂为正丁醇、油为正
力及增溶等作用。本文采用十二烷基硫酸钠/正丁醇征
己烷/水配制成微乳液作为展开剂,对教学中常用的5种氨基酸进行微乳薄层色谱法分析,以探讨鉴定氨基
表1
微乳液的成分配比与微乳液的结构
壁奎曼
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收稿日期:2001—06—18张秋霞郭航鸣
金华职业技术学院医学院高级讲师,310017金华市金华职业技术学院医学院高级讲师
万方数据
金华职业技术学院学报
己烷、水为蒸馏水,在前三者质量比条件不变的情况下,2.1微乳液对R值的影响因素
改变水量配制成各种微乳液。用毛细管吸取少量氨基在微乳液色谱中,溶质在固定相、油或水连续相及酸溶液于硅胶板上点样,以上述各微乳液作为展开剂,内核和界面膜等数相之间进行分配,在层附过程中,氨用上行法展开,展开到一定距离后,取出凉干,用茚三酮
基酸分配在微乳液的内相或连续相处,也可穿插排在显色剂显色,然后计算R值。界面上由,十二烷基硫酸钠与正丁醇组成的栅栏层中,2结果与讨论
另外,硅胶剂也会对其产生吸附作用,使其在与富集相微乳液的成分配比及结构见表1,以微乳液作为展的竞争中连续不断地脱附出来,这样由于吸附、分配、开剂’5种氨基酸的薄层色谱结果见表2。
静电、疏水、立体、萃取与反萃取等可能的效应,导致各
表2
5种氨基酸在不同展开剂中的Rf值
说明:Ilf;含不同水量微乳液作为展开剂lh:SDS胶束作为展开剂;
&:CHdCH20H+HzO+CH3COOH作为展开剂(it比=_5∞0:1)T:斑点
ST:牢固斑点+:不规则斑点;
种氨基酸迁移速率不同,而使其在不同的R值有所差
OH比含—OH的氨基酸的R艟要大。另外,2号与3号值
异。从表2可以看出,随着微乳液含水量的不断增加R值
亦逐步增大。在薄层色谱分析中,瞄受样品的极性和
的变化与其分子结构不同有关,与微乳液含水量有关。
如含水量舀0%时,其R值2号-/J,于3号,含水量>30%贝0相吸附剂的活度及展开剂的极性三方面的影响。当前二
反。这可能是由于展开剂极性较低时,R值受分子极性者不变时,其R值就受展开剂极性的影响,就是说,展开的控制。2号与3号比,前者含—OH,极性比后者所含一
剂的极性越大,R值就越大,通过改变水量,可获得不同
SH强。当微乳含水量>30%时,微乳液则逐步由W/O
极性的展开剂。实验中发现随着微乳液含水量的逐步型_÷油水双连续型—o/研型转变。此时,R值受分子极
增加,体系极性就不断增大。当含水量>70%时,会出现性、展开剂极性、静电、疏水、萃取与反萃取等因素的影
许多斑点迁移至前沿线(湿线)边沿,拖尾加重,斑点形状响,就是说,随着微乳液类型的改变,不同的氨基酸R值
不规则,以30%一50%含水量的微乳液,其展开效果最就有不同的变化。
佳。通过微乳液薄层色谱法分析,展开剂的选择应对被用SDS胶束作为展开剂进行展开时,Rf值都在0.8分离组有一定的溶解度,另外,对被分离组要有适当的以上,而且区分效果不好,这是由于SDS胶束是O/W亲合力,对于W/O型微乳液,氨基酸在进入水相(内核)型,氨基酸大部分进入连续相而没有进入内核或界中,就会得到富集增溶,在油水双连续微乳液中,水既是面,SDS的亲水基是离子基团,使展开剂的极性过大,增溶相,又是连续相,氨基酸在两相中会被适当富集,如而氨基酸的细微结构差异对耐值基本无影响。将几种果含水量过大,则形成O/W型微乳液,氨基酸主要进入氨基酸的混合物,用含水量50%的微乳液作为展开连续相,内相得不到增溶,这样微乳作为展开剂的特征剂,用同种氨基酸作对照,点样、展开。结果表明其分就无法表现出来,因而O月矿型微乳液与一般极性溶剂作离效果明显。本方法(见表2)与传统的薄层色谱法作为展开剂无明显差别为展开剂相比翻,可以看出,后者展开后斑点大多不22样品极性与R值的关系
规则,微乳薄层法很少出现这种情况,而且重复性从表2可以看出,样品的极性越大,被吸附剂吸附
好。说明微乳液由于其独特的结构特点,其色谱的性得就越牢固,条件相同时,迁移的速率就越小。在主要结
能良好。因此,在分析化学的实验教学中,微乳薄层构相同的条件下,如:1号和4号与2号其分子中,不含一
色谱法是一种值得推广应用的方法。
参考文献
1李于佐.微乳理论及其应用.北京:石油工业出版社,1995;592郭荣.高等学校化学学报.北京:中国科学出版社,1987.8;583周同惠.纸色谱和薄层色谱.北京:
科学出版社,1989;122
万
方数据
薄层色谱法对几种氨基酸鉴定实验的改进
作者:作者单位:刊名:英文刊名:年,卷(期):被引用次数:
张秋霞, 郭航鸣
张秋霞(金华职业技术学院医学院,高级讲师,310017,金华市), 郭航鸣(金华职业技术学院医学院,高级讲师)
金华职业技术学院学报
JOURNAL OF JINHUA COLLEGE OF PROFESSION AND TECHNOLOGY2001,1(3)0次
参考文献(3条)
1.李干佐 微乳理论及其应用 19952.郭荣 高等学校化学学报 19873.周同惠 纸色谱和薄层色谱 1989
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以柿叶为原料,研究了提取黄酮类化合物的不同方法,并对提取物进行分离研究.通过比较不同方法的提取结果,说明用乙醇作为提取荆所提取出的芦丁含量最高;用微乳液展开剂对提取物进行薄层色谱法分离鉴定,得出柿叶中含有黄酮化合物中的黄酮醇类,为进一步研究柿叶中黄酮类化合物提供借鉴.
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