绞股蓝皂苷提取工艺的研究
农业科技
2008N O . 14
SCI EN CE &TEC HNO LO GY I N F O RM ATI ON
科技资讯
绞股蓝皂苷提取工艺的研究
谭文陶湘辉周跃斌
（湖南农业大学园艺园林学院长沙
410128）
摘要：采用正交设计试验研究了浸提条件(乙醇浓度、提取温度、提取时间、料液比) , 得到最佳的冷凝回流法提取条件是以30倍
量浓度为80%乙醇在90℃水浴中回流提取3次, 每次1h ，最高得率为0. 1646%, 超声提取法的最佳提取条件是以20倍量的80%乙醇超声提取1次, 每次30m i n, 最高得率为0. 4344%。
关键词：绞股蓝皂苷正交实验浸提条件回流法超声法中图分类号：S688文献标识码：A 文章编号：1672-3791(2008) 05(b) -0103-
02绞股蓝(G ynost em m a pent aphyl l um ) , 又名七叶胆、小苦药等, 系葫芦科绞股蓝属多年生草质藤本。该植物全世界约有16种3个变种, 我国有14种和3个变种[1]。绞股蓝的医疗和药理保健价值已有研究报道[2-4], 在临床上对抑制肿瘤、防止衰老、降低血脂、增强免疫力、镇静止痛, 保护心脏和肝脏等均有确切疗效[5]。本文以绞股蓝干样为材料, 采用正交实验设计, 研究绞股蓝总皂苷提取冷凝回流法跟超声提取法的最优方案, 为绞股蓝总皂苷的工业化生产提供理论依据。
1材料
1. 1试验仪器
FA-1004电子分析天平植物组织粉碎机离心机恒温水浴箱, CQ-250型超声波清洗仪, 旋转蒸发仪, 岛津UV-160紫外可见光分光光度计1. 2试验试剂
绞股蓝原料（湖南邵阳绥宁华润绞股蓝制品厂) 乙醇, 蒸馏水, 人参皂苷Rb 1(中国药检所提供) 。1. 3样品处理
将绞股蓝鲜叶采后摊放晒干, 袋装置于烘箱中50℃烘5h, 用植物组织粉碎机粉碎成粉末后, 用保鲜袋装备置于有硅胶的干燥器中保存。
2方法
2. 1标准曲线的制定
精密称取人参皂苷Rb1标准品10m g 置于5m l 容量瓶中, 加蒸馏水溶解, 定容。制成2mg/m l 的标准溶液, 冷藏保存, 备用。分别吸取此标准溶液0ul 、50ul 、100ul 、150ul 、200ul 、250ul 于10m l 的具塞试管中，精密加入新配置的5%香草醛的冰醋酸：高氯酸为1：4的混合液2m l , 于60℃水浴加热15分钟, 取出, 立即用冰水冷却, 再用冰醋酸定容至刻度, 以吸光度为纵坐标, 皂苷浓度为横坐标, 在550n m 波长下比色[6]。制定标准曲线如下。2. 2样品检测
将用乙醇提取的浸提液浓缩至干，将残渣用蒸馏水溶解，定容于100ml 容量瓶中, 置于冰箱中备用。吸取1ml 上述备用液, 加蒸馏水稀释5倍, 取1ml 稀释液置于10ml 具塞试管中, 按标准曲线项操作, 于550nm 处, 测定其吸收度, 代入回归方程进一步求出总皂苷含量。在2h 内每隔0. 5h 测一次吸光度, 结果稳定。
3试验与分析
3. 1乙醇回流提取[7]
试验因素水平、结果分析从表2、表3可见, 最佳提取方案为A1B3C3D2, 即为以30倍量的80%的乙醇在90℃水浴中回流提取3次, 每次1小时, 得到最高含量为0. 1646%。
3. 2超声提取法
[8-9]
精密称取已处理的原料2g , 置于400瓦C Q -250C 超声仪中提取。选择了乙醇浓度、提取时间、料液比三个因素, 每个因素选取了3个水平, 按照正交表L 9(3) 3安排试验。
由表4可见, 最优的超声提取方法为表1
冷凝回流法提取绞股蓝总皂苷的因
A1B2C3, 即为以20倍量的80%乙醇超声提素水平表
表2正交试验L9(3) 4设计及结果分析
表3超声提取法因素水平表
为选取最佳提取方案，本文以处理好取1次, 每次30mi n ，最高得率为0. 4344%。
的样品为研究对象, 选择了乙醇浓度、回流时间、乙醇用量、回流温度四个因素，每4结语
个因素又选取3个水平，试验提取次数均从试验中可以看出, 超声法提取绞股定为3次, 按正交表L 9(3) 4安排试验，以测蓝总皂苷远高于普通回流法, 超声提取法定样品中总皂苷的百分含量为考核标准。
作为目前相对较为先进的提取方法, 有着
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