离子色谱法检测液体乳和乳粉中的硝酸盐.亚硝酸盐及硫氰酸盐

检测分析

食品研究与开发

2010年7月第31卷第7期

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离子色谱法检测液体乳和乳粉中的硝酸盐、亚硝酸盐及硫氰酸盐

2*

成霈1，，刘邻渭1，

（1.西北农林科技大学，陕西杨凌712100；2.西安市产品质量监督检验所，陕西西安710065）

摘

要:探讨离子色谱法检测液体乳和乳粉中的硝酸盐、亚硝酸盐及硫氰酸盐。通过试验分析，确定样品处理以及

离子色谱测定的条件。亚硝酸盐、硝酸盐、硫氰酸盐的精密度依次为0.886％、1.704％、0.562％，液体乳加标回收率依次为92.990％、98.116％、94.728％，乳粉加标回收率依次为91.570％、94.892％、94.756％。关键词：离子色谱；硝酸盐；亚硝酸盐；硫氰酸盐；液体乳；乳粉

DeterminationofNitrate,NitriteandThiocyanideinMilkandMilkPowderbyIonChromatography

2*

CHENGPei1，,LIULin-wei1，

（1.NorthwestA&FUniversity,Yangling712100，Shaanxi,China；2.Xi'anProductQualitySupervisionInspection

Institute,Xi'an710065,Shaanxi,China）

Abstract:Determinationofnitrate,nitriteandthiocyanideinmilkandmilkpowderbyionchromatographywasstudied.Samplepreparationandtheconditionofdeterminationofionchromatographyweredeterminedbyexperimentanalysis.Theprecisionofnitrate,nitriteandthiocyanidewere0.886％,1.704％,0.562％respectively.Recoveryofmilkwere92.990％,98.116％,94.728％respectively.Recoveryofmilkpowderwere91.570％,94.892％,94.756％respectively.

Keywords：ionchromatography；nitrate；nitrite；thiocyanide；milk；milkpowder随着液体乳及乳制品在人们日常生活中所占比重越来越大，其质量安全问题也因此成为大家关注的焦点。根据食品整治办2009年印发的《关于印发全国打击违法添加非食用物质和滥用食品添加剂专项整治抽检工作指导原则和方案的通知》，液体乳和乳粉中的硝酸盐、亚硝酸盐及硫氰酸盐超标已经成为目前影响乳制品质量安全的突出问题。这3种危害人体健康的物质进入乳品的重要途径包括：在奶牛的喂养过程中，如果饮水、饲料、饲料添加剂以及奶牛生长的环境中硝酸盐、亚硝酸盐的含量过高，则牛乳中硝酸盐及亚硝酸盐的含量就极可能超标；由于硫氰酸钠掺入原料乳或乳粉中后可有效的抑菌，不法奶户不顾其对人体的危害作用而将其用于这些产品保鲜。因此，加强监测力度、建立快速准确的检测方法成为当务之急。根据有关文献[1-2]，离子色谱法检测液体乳和乳粉

作者简介：成霈（1982—），男（汉），助理工程师，研究生，研究方向：食品工程。

*通讯作者：刘邻渭，男，教授。

中的硝酸盐、亚硝酸盐及硫氰酸盐的速度快、效率高、结果准确稳定，因此，本文试用了这种方法并采用了与GB5009.33-2008《食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测

[3]

定》有所不同的样品提取和前处理方法，取得了良好

的测定效果。1

材料与方法

1）美国戴安ICS-1500离子色谱，配RFC淋洗液发生器，ASRS3004mm阴离子微膜自再生电化学抑制器，电导检测器；

2）IonPacAS19（4mm×250mm）分析柱，IonPacAG19（4mm×50mm）保护柱；

3）淋洗液：EGCIIKOH；

4）MILLIPORE超滤杯，15mL，10000MWCO；5）OnGuardIIAg/H柱，使用前用15mL水活化；OnGuardIIRP柱，使用前依次用10mL甲醇，15mL水活化；

1.1仪器与试剂

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6）亚硝酸盐、硝酸盐标准溶液：中国计量科学研究院；硫氰酸盐基准物质：北京化工厂；

7）甲醇、乙腈、三氯甲烷：色谱级；8）高速离心机：上海安亭科学仪器厂；

9）试验用水均为MILLIPOREMilli-Q超纯水制备系统所制超纯水，K＜0.5mS/m。1.2样品处理1.2.1

液体乳样品

取样品10mL于50mL聚丙烯离心管内，加入15mL乙腈，剧烈振摇后10000r/min离心5min，取上清液5mL加入超纯水45mL，混匀倒入超滤杯，4000r/min离心10min（若离心所得溶液不足10mL可以适当增加离心时间），移除超滤杯再加入15mL三氯甲烷，剧烈振摇后4000r/min离心5min，取上层清液过0.22μm水系针式过滤器，RP柱，Ag/H柱进离子色谱测定。1.2.2

乳粉样品

取样5g于50mL聚丙烯离心管内，加入10mL水溶解后再加入15mL乙腈，以下同1.2.1。1.2.3

标准溶液

取亚硝酸盐、

硝酸盐标准溶液，硫氰酸盐基准物质用超纯水配制成混合标准溶液，再稀释成标准系列，见表1。

表13种阴离子标准系列浓度表

Table1Theconcentrationofthreenegativeion

mg/kg

阴离子标准溶液浓度1浓度2浓度3浓度4浓度5浓度6NO2-0.2000.1000.0400.0200.0080.0040.002NO

3

-5.0002.5001.0000.5000.2000.1000.050SCN-

1.000

0.500

0.200

0.100

0.040

0.020

0.010

1.3仪器条件

KOH淋洗液梯度淋洗，初始23mmol/L运行12min,

然后在11min内至78mmol/L再运行5min后回到23mmol/L平衡2min，准备下次进样。淋洗液流速1mL/min,进样体积100μL，柱温30℃，抑制器电流174mA。2结果与分析

2.1

色谱质量和干扰分析

按照上述仪器条件测定，硝酸盐、亚硝酸盐及硫氰酸盐混合标准溶液色谱图见图1，液体乳样品色谱图见图2，乳粉样品色谱图见图3。

比较这3张色谱图可知，在所用的色谱条件下液体乳和乳粉中所含的各种主要离子的保留时间和硝酸

根离子、亚硝酸根离子及硫氰酸根离子的保留时间都不同，并且3张图的基线都很平直。所以可以认为，运用本文选用的色谱条件测定液体乳和乳粉中硝酸盐、亚硝酸盐及硫氰酸盐的含量时，样品中的其他离子和本底不产生干扰。2.2

测定精度、线性范围和检出限

按照上述仪器条件测定硝酸盐、亚硝酸盐及硫氰

酸盐混合标准溶液稀释成的标准系列，根据测定结果，以峰面积（S）对质量浓度（C）进行一元线性回归分析，得到回归方程、相关系数、线性范围;以空白样品加入标准溶液，重复测定20次，按GB/T16631-2008《高效

液相色谱法通则》

[4]

计算最小检测限，结果见表2。将表2中的最小检测限和GB5009.33-2008《食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定》相应的检出限（注

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表23种阴离子工作曲线线性回归方程、相关系数、线性范围和检

出限

Table2Theregressionequation,correlationcoefficient,linear

rangeandofdetectionlimitthreenegativeion阴离子NO2-NO

-3

表4说明：按照本文的方法，两种样品中3种离子测定时的加标回收率都在91%～99%之间，符合常规分析的要求。3结论

本方法采用离子色谱法同时分析液体乳和乳粉中的硝酸盐、亚硝酸盐及硫氰酸盐，较GB5009.33-2008《食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定》优化了样品制备和前处理步骤，降低了乳制品中蛋白质、脂肪等大分子化合物带来的基质干扰，结果显示：这种方法不但同时完成了3种物质的定量测定，而且较国标方法相对降低了亚硝酸盐和硝酸盐的检测限，并且加标回收率都达到常规分析的要求。所以，使用这种方法可以满

[5]

，足现行国家标准GB5408.1-1999《巴氏杀菌乳》[6]

GB5408.2-1999《灭菌乳》等的检测要求。

回归方程C=2.8752S-0.1309C=0.6594S-0.1020C=0.6326S-0.1594

相关系数0.999770.999500.99930

测定范围/(mg/kg)0.002～0.1000.050～2.5000.010～0.500

最小检测限/(mg/kg)

0.00120.00670.0033

SCN-

GB5009.33-2008《食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定》中的离子色谱法中亚硝酸盐和硝酸盐的检出限分别为0.4mg/kg和0.8mg/kg）相比可以看出，本文采用的方法具有相对很低的检出限。2.3

测定重现性

选定一组混合标准溶液重复测定7次，计算相对标准偏差结果见表3。

表33种阴离子精密度试验

Table3Theprecisionofthreenegativeion

阴离子NO2-NO3-SCN-质量浓度/(mg/kg)0.020.500.10

保留时间的相对标准偏差/%0.0450.0330.009

峰面积的相对标准偏差/%0.8861.7040.562

参考文献：

[1]

李良,王晴,江勇.离子色谱法同时测定乳粉中亚硝酸根、硝酸根、氯离子和磷酸根[J].理化检验-化学分册,2007,43(10):835-837

[2]张岩,王瑜.离子色谱法测定食品中的亚硝酸盐和硝酸盐的探讨

[J].口岸卫生控制,2008,13(4):27-28

[3]中国疾病预防控制中心营养与食品安全所.GB/T5009.33-2008

食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定[S].中国国家标准化管理委员会

[4]中国石油化工股份有限公司北京燕山分公司,中化化工标准化

研究所.GB/T16631-2008高效液相色谱法通则[S].中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局

表3说明：3种阴离子保留时间和峰面积的相对标准偏差均小于10%，符合GB5009.33-2008《食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定》中相应的精密度要求。2.4

测定准确性

分别取液体乳、乳粉样品加入一定量的硝酸盐、亚硝酸盐及硫氰酸盐标准溶液，按试验方法进行处理、测定，结果见表4。

表43种阴离子加标回收试验

Table4Therecoveryofthreenegativeion

样品液体乳

阴离子NO2-NO3-SCN-NO2-NO3-SCN-本底值/(mg/kg)

n.a.n.a.0.8832n.a.n.a.0.6977

加标量/(mg/kg)

1.02.52.51.02.52.5

测定值/(mg/kg)0.92992.45293.25140.91572.37233.0666

回收率/%92.99098.11694.72891.57094.89294.756

[5]黑龙江乳品工业研究所.GB5408.1-1999巴氏杀菌乳[S].国家质

量技术监督局

[6]黑龙江乳品工业研究所.GB5408.2-1999灭菌乳[S].国家质量技

术监督局

乳粉

注：n.a.表示低于最小检测限。

收稿日期：2010-02-08

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