分散液液微萃取技术及其在食品安全分析中的应用

热带作物学报２０１５，３６（２）：４３２—４４０

ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｍａｌｏｆｒＩ’ｒｏｐｉｃａｌＣｒｏｐｓ

分散液液微萃取技术及其在

食品安全分析中的应用

马智玲１，魏长宾１，刘新艳２，李凌云２，刘玉革１，刘

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１中国热带农业科学院南亚热带作物研究所，幸音耋譬装盖弄獬蓑辜兹嘉广东湛江５孔０９ｔ

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摘要分散液液微萃取是２００６年发展起来的一种新型的液相微萃取技术，该方法因操作简单、快速、成本低、富集倍数高、所需有机溶剂用量少、萃取时间短等特点而成为一种备受关注的绿色友好的分离富集技术。近些年，该技术已经在环境水样、饮品、食品、矿物样品以及生物流体、土壤样品的分析中得到广泛应用。综述分散液液微萃取技术近期的研究进展及其在食品安全分析领域的应用，包括饮品、蔬菜水果、谷物及动物性

组织等食品中农药、酚类物质、持久性污染物、金属及其他一些物质的分析检测．并对其发展趋势进行了阐述。

关键词分散液液微萃取；食品安全；样品前处理；分析检测

中图分类号鸭２０１．６

文献标识码Ａ

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１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００—２５６１．２０１５．０２．０３４

完整的食品污染物分析过程包括样品前处理和有效地将目标物从复杂的样品基体中分离出来．还仪器分析两个部分。目前，气相色谱、液相色谱、要除去基体中的干扰物质，富集低含量待测组分，原子吸收光谱等已成为当前主要的污染物残留分析从而提高分析灵敏度。延长分析仪器使用寿命。传检测技术，而在进行仪器分析前，样本前处理的时统的样品前处理方法有液液萃取、固相萃取、凝胶间约占到整个分析方法的２，３左右．是分析过程中渗透色谱、加速溶剂萃取等．其处理过程繁琐耗最重要的环节。由于食品种类多样复杂．有些待测时、成本高、效率低、劳动强度大，还需要使用大组分的含量很低．所以要求样品前处理过程不仅要

量对人体和环境有毒、有害的有机溶剂【Ｍ。

收稿日期２０１４—０５—２９

修回日期２０１４—１ｌ—０５

基金项目热带作物科学数据共享分中心运行服务（２０１４年）；中国热带农业科学院南亚热带作物研究所中央级公益性科研院所基本科研业务

费专项（Ｎｏ．１６３００６２０１３００６；Ｎｏ．１６３００６２０１５０１３）；中国热带农业科学院大型仪器设备共享中心。

作者简介马智玲（１９８６年一），女，硕士研究生；研究方向：农产品质量与食物安全。＋通讯作者（ＣｏⅡｅ８ｐｏｎｄｉｎｇ¨ｔｈｏｒ）：方佳（ＦＡＮＧＪｉａ），

Ｅ—ｍｉｌ：胁９９８９＠１６３．ｃｏｍ。

万方数据

第２期马智玲等：分散液液微萃取技术及其在食品安全分析中的应用

一４３３一

液相微萃取技术（ＬＰＭＥ）是一项新型样品前处理技术。克服了液液萃取消耗大量溶剂以及固相微

后．目标分析物就将在样品溶液和小体积的萃取剂之间实现分配平衡．最后通过离心，携带目标物的微小萃取剂颗粒沉淀于离心管的底部达到富集的目的。ＤＬＬＭＥ的整个萃取过程在水相中完成，所以它只适用于亲脂性高或中等的分析物．不适于高度亲水的中性分析物的分析。对于具有酸碱性的分析

萃取萃取头较昂贵、寿命短、多次使用存在交叉污

染等缺点。该技术操作简单，无需特殊装置，具有成本低、富集倍数高、有机溶剂用量少等特点，是一种环境友好的样品前处理技术．因适应了当前绿色化学发展的需要而受到分析人员的广泛关注阎。目前。ＬＰＭＥ主要有３种操作模式：单液滴微萃取（ＳＤＭＥ）、中空纤维膜液相微萃取（ＨＦ—ＬＰＭＥ）和分散液液微萃取（ＤＬＬＭＥ）等形式【６－１０】。液相微萃取简单分类如图１所示。

２００６年．Ｒｅｚａｅｅ等【１－】报道了一种新型的液相微萃取技术ＤＬＬＭＥ。该萃取技术相当于微型化的液液萃取，它是一个三重的溶剂体系。包括水相、分散剂和萃取剂。当３种溶剂混合形成乳浊液体系

物，可通过控制样品溶液的ｐＨ值使分析物以非离

子化状态存在，从而提高分配系数【・到。影响其萃取的因素主要有萃取剂的种类及体积、分散剂的种类及体积、水溶液的ｐＨ值及体积、离子浓度等１１３一切。根据萃取剂类型以及萃取方式的不同，现阶段

将其分为常规分散液液微萃取、离子液体分散液液

微萃取（ＩＬ—ＤＵｍＥ）、悬浮固化分散液液微萃取（ＳＦＯ—ＤＬＬＭＥ）、超声乳化分散液液微萃取等多种形式。

直接单液滴微萃取顶空单液滴微萃取

液滴微萃取

连续流动微萃取悬浮固化微萃取

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Ｆｉｇ．１’ｒｈｅＳｉｍｐｌｅ

空纤维膜微

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常规分散液液微萃取离子液体分散液液微萃取悬浮固化分散液液微萃取

分散液液微

图１液相徽萃取的简单分类

ｃｌａｓｓｉ融６蚰ｏｆＵｑｕｉｄ—ｐｌ扭ｓｅｍｉｃｌ－０屺ｘｔＩ．ａｃｔｉｏｎ

阳离子和无机阴离子组成的熔融盐体系。与传统有机溶剂和电解质相比，它的热稳定性好、蒸气压较低、不易挥发、良好的导电与导热性、可设计性、种类多、有可调的黏度以及可与有机溶剂或水混溶等特点，用它代替传统的有机溶剂可以避免挥发带来的环境污染问题．因而被称为“绿色溶剂”∞。Ｆａｎ等【３１】第一次成功地将ＩＬ—ＤＬＬＭＥ与高效液相色谱一多波长检测器（ＨＰＬＣ—ＶＷＤ）联用来萃取水样中的多氯联苯，在二维的溶剂体系下，ｆＢｍｉｍｌ『ＰＦ６１为萃取剂，没有使用分散荆，方法检出限和回收率的范围分别为Ｏ．４５—２．６¨∥Ｌ和４３．４％～１０６．４％。Ｈｅ等【３２１利用离子液体ｆＣ６ＭＩＭｌｆＰＦ６】为萃取剂，甲醇为分散剂．通过ＩＬ－ＤＬＬＭＥ—ＨＰＬＣ技术检测了水和梨样品中的有机磷，在优化的条件下．线性范围为

ＤＬＬＭＥ克服了传统液相微萃取的～些缺点．如ＳＤＭＥ技术中悬挂的液滴不稳定．萃取难以实现真正平衡．有机溶剂用量多以及ＨＦ—ＬＰＭＥ的萃取速率慢、效率低等。该方法集采样、萃取和浓缩于一体，具有操作简单、快速、成本低、有机溶剂用量少、对环境友好、萃取时间短、富集效率高等特点．现已广泛应用于饮品、矿物样品以及生物流体、牛奶、蜂蜜、苹果、鱼肉、香蕉、茶叶及土壤等多种基质痕量组分的分离富集【・８咧。基于ＤＬＬＭＥ在痕量分析领域的应用前景．文章对分散液液微萃取技术近期的研究进展及其在食品安全分析领域的应用及今后的发展趋势进行了阐述。

１分散液液微萃取技术研究进展

１．１萃取剂种类的扩大

１。１。１

离子液体

常规的ＤＬＬＭＥ多使用卤代烃

０００斗轧，富集倍数３００，检出限的范围为Ｏ．０１～Ｏ．０５“玑，回收率为９ｌ％～１０９％，相对标准

５～１

等高毒有机溶剂，而采用离子液体（ＩＬ）可避免卤代烃的使用。离子液体是指在室温下呈液态并由有机

偏差为１．１％～２．７％。１．１．２低密度溶剂

ＤＬＬＭＥ通常使用密度大于水

万方数据

一４３４一

热带作物学报第３６卷

萃取剂如氯苯、氯仿、四氯化碳等有毒性溶剂，而低密度、低毒萃取剂的使用扩宽了萃取剂的选择范围。２０１２年。Ｍｕｄｉａｍ等嗍使用低密度萃取剂一ＤＬＬＭＥ与气相色谱（ＧＣ）联用测定小鼠组织和血液中的氯氰菊酯．其中丙酮作为分散剂．正己烷作为萃取剂，对其进行试验，使用微量管对浮于上层的萃取剂进行收集后测定。该方法的检出限小

于９ｎｇ／ｍＬ。定量限小于３０ｎｇ／ｍＬ。回收率范围为

８１．６％～１０３．７％。

１．１．３超大分子溶剂

Ｊａｆａｒｖａｎｄ等渊采用超分子

萃取的分散液液微萃取（ＳＭ—ＤＬＬＭＥ）与光纤阵列分光光度计（ＦＯ—ＬＡＤＳ）联用测定水样中的孔雀绿染料。方法的特殊性在于使用超大分子的癸酸（萃取剂）与四氢呋喃（分散剂）混合后，形成反胶束分散于

水相中进行萃取，富集因子为５２，检出限为４斗ｇ／Ｌ，

相对标准偏差均小于４％。该方法的萃取时间为

１．５

ｍｉｎ，省去了衍生化、离子对缔合反应步骤。环

境友好型超大分子萃取剂的使用不仅扩大了萃取剂选择范围而且有利于ＤＬＬＭＥ对极性化合物的测定。１．２分散剂种类的扩大

１．２．１

双重混合分散剂Ｔｓａｉ等陶使用较少的双

重混合分散剂，１３汕Ｌ的甲基叔丁基醚（ＴＢＭＥ）与三氯乙烯仃ＣＥｌ以６：４比例混合作为ＤＬＬＭＥ的分散剂，再与气相色谱质谱（ＧＣ—ＭＳ）联用来测定水样中有机氯类农药。该方法的富集倍数为１８８５～２６４８．

相对标准偏差均小于１０％，检出限小于３ｎｇ，Ｌ，

可以用于常规有机氯类农药的检测。１．２．２表面活性剂作为分散剂

Ｍｏｒａｄｉ等冈使用

表面活性剂一ＤＬＬＭＥ与液相色谱（ＨＰＬＣ）联用测定环境水样中的氯酚类药物．将萃取剂辛醇注入到含有一定浓度的阳离子表面活性剂（ＣＴＡＢ）中，摇晃的过程中．表面活性剂代替有机溶剂充当分散剂，将两种互不相溶的液体分散形成稳定乳状液．使得萃取剂充分分散．最后经过离心将漂浮于水面的萃取剂取出上机测定。该方法的富集倍数为１８７～３５３，相对标准偏差４．７％～６．９％．检出限范围０．２～２００

ｎ班。

１．２３

超声辅助代替分散剂有时ＤＵ肌Ｅ不使用分散剂．以防分散剂的使用降低分析物在萃取剂中的分配系数闻。２００９年，Ｌｉ等１３固发展了离子液体一超声辅助一ＤＬＬＭＥ来测定水样中的镉．与传统的ＤＬＬＭＥ所不同的是．该方法中没有使用易挥发有机溶剂的分散剂。离子液体通过超声波水浴快速与水混合并分散成乳浊液实现富集．该方法的富集倍数６７，检出限７．４ｎ彩Ｌ。同样，Ｓｕｎ等阴利用离子

万方数据

液体一超声辅助一ＤＬＬＭＥ—ＨＰＬＣ方法测定人类尿样中的痕量南蛇藤素三萜类物质．它是中药中具有治疗炎性疾病的有效成分．在优化的条件下，富集倍数为１１０，检出限１．６¨∥Ｌ，回收率范围９３．２％。

１０９．３％。

１．３测定物质种类的增加

理论上．分散液液微萃取只适于亲脂性高或中等极性的分析物．不适于高度亲水的分析物及离子

型有机化合物的萃取，但是以下方法的改进．使得

ＤＬＬＭＥ技术同样可以测定极性和离子型化合物。

１．３．１

极性化合物的测定

Ｍｅｌｗａｎｋｉ等【柏】使用分

配的分散液液微萃取（Ｐ—ＤＬＬＭＥ）与ＨＰＬＣ联用萃取河水样品中的氯苯氧乙酸。将四氯乙烯（萃取剂）与四氢呋喃（分散剂）混合后，快速注入到含水样的离心管中．摇晃后达到萃取平衡．最后离心得到的沉淀相是四氯乙烯和四氢呋喃的混合物．这样极性化合物萃取到沉淀相中，蒸干后用甲醇一水（１＋１）复溶上机测定。方法的检出限范围为２．３。３．３ｎｇ／ｍＬ，富集倍数１３１。１５６．可见Ｐ—ＤＬＬＭＥ可以实现极性有机化合物在ＤＬＬＭＥ中的萃取富集。

１．３．２

离子型化合物的测定

２０１２年，Ｃａｍｐｏｎｅ

等（４１】应用调整酸碱度一分散液液微萃取（ｐＨ—ＤＬＬＭＥ）联合ＨＰＬＣ测定谷物中的赫曲霉素及一些酸性物质。首先获得甲醇提取液作为ＤＬＬＭＥ的分散剂，之后经过两次萃取步骤：第一次萃取中通过调整水溶液ｐＨ值为８，降低目标物在萃取剂ＣＣｌ４中的溶解性．目的是使疏水性的干扰物沉淀分离而得到上清液：第二次萃取中将上清液转人到第二个离心管中，调整水溶液ｐＨ值为２，最后目标物萃取到Ｃ：Ｈ４Ｂｒ２（萃取剂）沉淀相中，氮吹近干，使用乙腈一水（１＋１）复溶测定，得到满意的分析结果。

Ｍｅｌｗａｎｋｉ等［４２】采用半自动化进退注射器辅助的ＤＬＬＭＥ与ＨＰＬＣ联用实现了离子化有机化合物的检测。经过ＤＬＬＭＥ后水样中的克伦特罗（ＣＢ）萃取到ＣＣｌ４中，取２０“Ｌ的沉淀相，加入到含有１０斗Ｌ１％乙酸的水相中。来回推动注射器．含有目标物的沉淀相就会在注射器的内壁上形成一层薄膜．较

大的接触面积使得目标物较容易萃取到水中．最后

用三乙胺将含有目标物的１％乙酸水相中和后上机测定。该方法中ＣＢ的线性范围为１０～１

０００ｎ∥ｍＬ，

检出限为４．９ｎｇ，ｌＩｌＬ，富集倍数为１７５，回收率为

９７％。

１．４操作过程自动化

１．４．１

顺序进样一分散液液微萃取（ＳＩ—ＤＬＬＭＥ）２００９年．Ａｎｔｈｅｍｉｄｊ＿ｓ等ｆ４３】第一次使用一个在线

第２期

马智玲等：分散液液微萃取技术及其在食品安全分析中的应用

一４３５一

连续进样的ＤＬＬＭＥ系统．通过原子吸收（ＦＡＡＳ）来检测水样中的铜和铅．整个自动系统根据ＤＬＬＭＥ操作过程的先后进行设计。２０１２年，Ａｎｄｍｃｈ等嗍提出基于顺序进样一自动化一ＤＬＬＭＥ与紫外可见分光光度计在线联用测定硫氰酸盐。与传统的ＤＬＬＭＥ所测定的结果如线性范围、检出限、相关系数等相当。通过简单的自动系统实现了前处理过程的快速操作、成本低、有机溶剂消耗少，为分散液液微萃取的自动化及其与分析仪器的在线联用提供了一种全新的设计思路。

１．４．２针内注射一分散液液微萃取（ＩＳ—ＤＬＬＭＥ）

ＤＬＬＭＥ中离心这步限制了ＤＬＬＭＥ中萃取剂的使用。２００９年，Ｃｒａｚ—Ｖｅｒａ等嗍提出针内注射一离子液体一ＤＬＬＭＥ，这一过程分为３个步骤：（１）样品的装载。将样品溶液吸人到１０ｍＬ的注射器中：（２）萃取，通过玻璃注射针将适量体积的分散剂（甲醇）和萃取剂（ｆＢｍｉｍｌｆＰＦ６】）的混合物进行喷雾注入到注射器当中．使其迅速形成样品溶液／分散剂／萃取剂的乳浊体系：（３）两相分离。去除上部的样品溶液．使用玻璃注射针可以很容易地将萃取剂从注射针的顶端移出实现分离。最后，吸取萃取剂上机测定。而Ｃｈｅｎ等湖将低密度萃取剂一去乳化剂辅助一ＤＬＬＭＥ与ＧＣ—ＭＳ联用测定水样中的氨基甲酸

酯类农药．这一过程中的优点就是在摇晃萃取平衡

后再加入去乳化剂．破乳后可以实现两相的简单分离而省去了离心的步骤．最后吸取上层的萃取剂上机测定。

上述研究从萃取剂、分散剂、分析底物以及操作过程等不同角度对ＤＵ肌Ｅ技术进行了改进，使其朝着绿色环保、自动化、应用性广的方向发展，从而展现出更广阔的应用前景。

２分散液液微萃取与其他前处理技术联用

２．１

分散液液微萃取与固相萃取（ＳＰＥ）联用ＤＬＬＭＥ主要应用于简单基质如水样中目标物

的分析．由于其对所分析的样品不经过净化（只对较少量的极性杂质进行去除），因此浓缩后有机溶剂中的杂质也会被富集。尤其是分析复杂样品中的痕量组分时．基质干扰会非常明显Ｍ．多次进样后仪器耗材损耗严重，维护频率增加．所以ＤＬＬＭＥ并不适合于复杂基质的分析。固相萃取（ＳＰＥ）是一个广泛应用的样品前处理技术。其根本作用就是痕量富集和基质的有效净化。Ｆａｔｔａｈｉ等嘲将ＳＰＥ与

万方数据

ＤＬＬＭＥ结合并与ＧＣ联用萃取和测定水样中的氯酚类物质。关键步骤是丙酮将化合物从净化吸附剂上洗提之后．所获取的洗脱液再经过ＤＬＬＭＥ技术进行高度浓缩。这一技术以ＳＰＥ的洗脱液为分散剂．将ＳＰＥ与ＤＬＬＭＥ有效结合。使ＤＬＬＭＥ可以应用于基质复杂样品前处理中。

２．２分散液液微萃取与分散固相萃取（ＤＳＰＥ）联用

与ＳＰＥ不同．ＤＳＰＥ是将净化剂直接加入到提取液中．仅仅通过摇晃和离心就可以进行分离净化．操作过程简单．成本低且有机溶剂的使用相对少。Ｗｕ等嗍将ＤＳＰＥ与ＤＬＬＭＥ结合来测定土壤中的磺胺类除草剂．丙酮提取液经过Ｃ，。净化之后，用丙酮一水溶液（２＋８）及ｐＨ值为２的条件下稀释溶液．取５．０ｍＬ的上清液样品溶液加入到１０ｍＬ的具塞尖底玻璃离心管中．上清液中丙酮直接作为分散剂，然后再加入６０斗Ｌ的氯苯（萃取剂），离心后将沉淀相注入到ＨＰＬＣ进行分析．获得了满意的结果。２．３分散液液微萃取与悬浮溶剂固化萃取（ＳＦＯ）联用

当使用密度小于水的萃取剂时．分散液液微萃取也可以采用悬浮固化的方式。在萃取离心的过程中。萃取剂上浮到溶液表面．然后采用低温固化法收集漂浮在水相表面的萃取剂．这种方法可以提高萃取效率．且易于实现相转移．不需要使用高密

度、有毒溶剂。ｈｏｎｇ

Ｍ

Ｉ等酗使用ＤＬＬＭＥ—ＳＦＯ—

ＧＣ—ＭＳ测定水样中的疏水性有机物。在这一过程中，使用低毒、密度小于水、熔点接近室温（１０～３０℃）的萃取剂．萃取剂与分散剂混合之后用注射针快速地注入到水样中。形成乳浊溶液后进行离心．离心管插入到冰浴中进行固化，将其取出在室温下融化后可直接进样进行分析。ＤＬＬＭＥ—ＳＦＯ克服了ＬＰＭＥ—ＳＦＯ【５・】萃取时间长的缺点．实现了快速分析。

２．４分散液液微萃取与超临界流体萃取（ＳＦＥ）联用

超临界流体萃取是用超临界流体作为萃取剂．可以快速、高效地将被测物从固体或液体样品基质中萃取出来。以达到分离和提纯的目的【５２】。ＤＬＬＭＥ适用于从液体样品中萃取化合物．而要从固体样品中萃取化合物．就需要增加样品前处理步骤（例如匀浆、烘干和过滤等耗时的步骤），同时提取过程也增加了有毒试剂的使用。２０１０年．Ｒｅｚａｅｅ等【５３】第一次将ＳＦＥ与ＤＬＬＭＥ结合来测定海底沉积物中ｌＯ种多环芳烃。ＳＦＥ中的甲醇、乙腈可以用于ＤＬＬＭＥ中作为分散剂．最后将萃取剂与分散剂混合后注入水样中进行ＤＬＬＭＥ操作。由于ＳＦＥ在处

一４３６一

热带作物学报

第３６卷

理复杂样品基质方面的优势．使得其与ＤＬＬＭＥ的结合克服了ＤＬＬＭＥ在处理固体基质时采用的附加手段而带来的一些缺点，如目标分析物的损失、蒸发收集液、操作繁琐费时等。

综上所述．ＤＬＬＭＥ与多种萃取技术的联用克服了其一些不足．也从不同角度将各个萃取技术的优点进行有效的结合．极大地扩大了ＤＬＬＭＥ的使用范围．尤其是对复杂基质中目标物的测定提供了新方案．同时不伺样品前处理技术的结合为新型样品前处理技术的开发提供了全新的思路。

３分散液液微萃取技术在食品安全分析中的应用

３．１饮品中不同物质的分析测定

２００７年，Ｆ撕ｎａ等酬使用ＤＬＬＭＥ—ＧＣ—ＭＳ测

定红酒中挥发性的苯酚．方法类似水样中物质的测定，简单操作为５ｍＬ的红酒中加入丙酮（分散剂）和四氯化碳（萃取剂）的混合物之后进行ＤＬＬＭＥ操作。２０１２年．Ａ１ｍｅｉｄａ等阁用ＤＬＬＭＥ—ＧＣ—ＭＳ测定啤酒中的１８种生物胺。２００９年，Ｃｕｎｈａ等闭使用ＤＬＬＭＥ一多维的ＧＣ—ＭＳ快速检测果汁中的２４种农药残留。上述方法均获得满意的结果。Ｍｏｎｔｅｓ等闻采用ＳＰＥ—ＤＬＬＭＥ来检测酒样中的７种杀菌剂．用反相吸附剂先对酒样进行净化．然后用丙酮将目标化合物洗提出来．将含目标化合物的丙酮与氯仿混合后加入到超纯水中进行ＤＬＬＭＥ过程浓缩．与ＳＰＥ相比，该方法的富集倍数大约为２００。２０１４年，Ｊｏｖａｎｏｖ等【５８】使用ＤＬＬＭＥ—ＱｕＥＣｈＥＲＳ—ＬＣ—ＭＳ／ＭＳ方法检测蜂蜜酒中的新烟碱类杀虫剂．该方法的回收率为６９．２％～１１３．４％，检出限范围０．５～２．５仙ｇ，Ｌ。３．２蔬菜水果中不同物质的分析测定

２００７年．Ｚｈａ０等网第一次将ＤＬＬＭＥ与ＧＣ联用来测定固体样品黄瓜和西瓜中的有机磷类农药．其中关键点是乙腈作为提取液的同时也作为分散剂．过程中将均质后的样品经乙腈提取后获得上清液，将２７阻Ｌ的氯苯加到１ｍＬ的乙腈提取液中，混合后将其快速注入到含有５ｍＬ纯水的具塞尖底玻璃离心管中，轻轻震荡，离心之后，取出１斗Ｌ的沉淀相注入到ＧＣ进行分析．获得了满意的分析结果。与传统的样品前处理方法相比．ＤＬＬＭＥ操作更简单，富集倍数高，不需要旋转蒸发，使用有机溶剂少。２０１３年．有文献报道嗍。使用ＱｕＥＣｈＥＲＳ—ＤＬＬＭＥ—ＧＣ—ＭＳ测定橘子中的１９种农药残留，使用乙酸乙腈作提取剂，四氯化碳为萃取剂进行目标物的提取富集．方法的定量限为０．０２～

万方数据

４７

ｎ以，低于欧盟规定的最大残留限量。本课题

组【６１】报道了ＯｕＥＣｈＥＲＳ—ＤＬＬＭＥ与气相色谱一飞行时间质谱（ＧＣ—ＴＯＦ，ＭＳ）联用快速筛查蔬菜水果中的１１６种农药残留．与上述方法不同的是，对ＱｕＥＣｈＥＲＳ方法中的乙腈提取液用固相分散剂进行净化后，再与萃取剂氯仿、纯水混匀进行ＤＬＬＭＥ方法的萃取和浓缩，沉淀相通过ＧＣ—ＴＯＦ／ＭＳ进行测定。约９２％农药的平均回收率为７２．２％～１２０．Ｏ％。相对标准偏差为２．３％～１５．６％。高青珍等嘲同时还建立了ＱｕＥＣｈＥＲＳ—ＤＬＬＭＥ—ＳＦＯ与气相色谱联用测定蔬菜中６种菊酯类农药残留的方法，待测样品用含１％乙酸乙腈溶液提取．用混合固相分散提取净化后经ＤＬＬＭＥ—ＳＦＯ浓缩．其中以乙腈为分散剂。十六烷为萃取剂．最后得到的上浮液用ＧＣ进行检测．结果在黄瓜和番茄基质中６种菊酯类农药平均回收率为８４．８４％。１１１．９４％．相对标准偏差为０．４８％～９．６１％．均获得了满意的分析结果。该结合的优势是将ＯｕＥＣｈＥＲＳ方法的提取净化与ＤＬＬＭＥ方法的高度浓缩结合．充分利用两种方法的优点弥补其缺点．从而得到一个集净化和高度浓缩为一体．适用于蔬菜水果中农药多残留的同时快速筛查测定的新型样品前处理方法。Ｃｈａｍｓａｚ等嘲使用ＶＡ—ＩＬ—ＤＬＬＭＥ—ＦＡＡＳ测定苹果、大米中

的Ｃｄ，该方法的检出限为２．９¨Ｍ．。Ｖｉｎａｓ等刚使用

ＤＵｍＥ—ＬＣ—ｎＪＤ／ＡＰＣＩ，ＳＩＭ测定水果和蔬菜中的２个生育酚类物质．该方法的回收率为９０％。１０８％，检出限为０．２～０．３ｎ∥ｍＬ。

３．３粮谷类样品中不同物质的分析测定

２０１１年．ＣｕＩｌｌｌａ等嘲采用乙腈作为提取液并与ＤＬＬＭＥ结合．使用ＧＣ—ＭＳ来测定玉米中的４１种农药多残留．试验中将均质后的样品用去离子水和乙腈震荡提取３０ｍｉｎ。再加入无水硫酸镁和氯化钠，摇晃，离心后将１ｍＬ的乙腈上清液（分散剂）与四氯化碳（萃取剂）混合后。注入到纯水中用于ＤＬＬＭＥ操作。大约有８２％分析物的回收率范围在７０％～１２０％，且具有良好的线性和精确度．相对标准偏差一般低于２０％．多于６３％的分析物的检出限都低于１９斗∥ｋｇ。Ｋａｒａｍｉ—Ｏｓｂｏｏ等嗍使用ＤＬＬＭＥ—ＬＣ—ＤＡＤ检测面粉中的有毒物质脱氧萎镰

菌醇，该方法的回收率为７３％，检出限为１２５“非ｇ。

３．４畜禽和水产品中不同物质的分析测定

在２００９年。Ｈｕ等【叨将ＤＬＭＥ与ＧＣ联用来测定鱼类样品中的４种多氯联苯。称取１．０ｇ均质后的鱼类肌肉组织与３．０ｇ的无水硫酸钠混合后．用

１０

ｍＬ的丙酮进行萃取，剧烈摇晃３０ｍｉｎ，上清液

第２期马智玲等：分散液液微萃取技术及其在食品安全分析中的应用

一４３７一

转移到玻璃离心管中．贮藏在一８０ｃＣ的冰箱中过夜沉淀脂质。在ＤＬＬＭＥ过程中，将５ｍＬ的超纯水加入到１０ｍＬ的尖底具塞玻璃离心管中．再将３０．０¨Ｌ的氯苯和ｌ。０ｍＬ的丙酮混合后迅速注入水样中。此刻就会在离心管中形成乳浊体系。最后离心得到沉淀相于ＧＣ进行分析。２０１２年．Ｍｏｅｍａ等【阚通过ＤＬＬＭＥ—ＨＰＬＣ测定鸡肝脏中的８种氟喹

诺酮类药物．其中萃取剂和分散剂分别为氯仿

２００．０斗Ｌ及乙腈１ｍＬ，方法的回收率和检出限分另Ｕ为８３％～１０２％、５～１９“ｇ／ｋｇ。

３．５蜂蜜、牛奶、食用油等食物样品中不同物质的分析测定

在２００９年．Ｃｈｅｎ等嘲使用ＤＬＬＭＥ—ＨＰＬＣ测定蜂蜜样品中的氯霉素和甲砜氯霉素．过程中将

１

ｇ的蜂蜜样品加入到１０ｍＬ的尖底离心管，再加

人５ｍＬ的水．混合物在涡旋器上均质，获得的均质样品用于ＤＬＬＭＥ—ＨＰＬＣ的分析。在优化的萃取条件下．氯霉素和甲砜氯霉素的富集倍数分别为６８．２和８７．９，线性范围３～２０００仙ｇ，Ｌ，检出限分别

为Ｏ．６汕礼和Ｏ．１“ｇ浓ｇ。Ｍｏｉｎｆａｒ等嗍应用ＤＬＬＭＥ—

ＧＣ测定茶叶中的１０种有机磷．以正己烷为萃取剂。乙腈为分散剂．在优化条件下测得该方法的检

出限为０．０３～１．００汕以ｇ，回收率为８３％。１１７％，

相对标准偏差为３％～７．８％。Ｄａｎｅｓｈｆａｒ等ｐ，】提议用ＤＬＬＭＥ—ＨＰＬＣ—ＵＶ方法分析牛奶、蛋黄和橄榄油中的胆固醇．其中四氯化碳和乙醇分别充当萃取剂、分散剂，方法的回收率为９５％～１０５％，检出

限为０．０１仙ｇ／Ｌ。２０１４年，Ｋ躲埘ｉ—Ｏｓｂｏｏ等同用

ＯｕＥＣｈＥＲＳ—ＤＬＬＭＥ—ＨＰＬＣ—ＦＬＤ方法检测牛奶中的６种氟喹诺酮类物质．方法的回收率为６９．２％～１０４．８％，检出限２．５—１５仙ｇ／ｌ【ｇ。

综上所述．ＤＬＬＭＥ已经成功地应用于各类食品中农兽药残留、真菌毒素、重金属及苯酚、生物胺、硫化物、多环芳香烃等相关成分的检测，是一种选择性好、富集因子高、检出限低的分析方法。

ＤＵＭＥ为污染物残留检测分析提供了一种新的样

品预处理方式．无论是从分析的底物还是不同复杂样品方面来说都有新的突破．并取得了较好的结果。

４分散液液微萃取技术的发展趋势

ＤＬＬＭＥ因具有操作简单、快速、成本低、富集倍数高、所需有机溶剂用量少、萃取时间短等特点而成为一种备受关注的绿色友好的分离富集技术。本课题组使用ＱｕＥＣｈＥＲＳ—ＤＬＬＭＥ—ＧＣ—ＴＯＦ／ＭＳ及ＤＬＬＭＥ—ＳＦＯ—ＧＣ等方法．对蔬菜水果中多

万方数据

种农药残留的筛查检测进行了系统的研究，并获得满意的结果。近几年．ＤＬＬＭＥ的发展主要集中于新型萃取剂及分散剂的开发、分析基质及分析物范围的扩大、与各种检测器的匹配等方面。然而ＤＬＬＭＥ也存在一定的局限性需要研究与改进：（１）ＤＬＬＭＥ技术缺少基础性研究。研究ＤＬＬＭＥ中各个影响因子之间的关系．通过试验进一步建立沉淀相体积的拟合方程。由此方便检测人员根据目标物富集倍数的大小灵活选择各因子的体积比例．不需要大量的预试验．有利于该技术应用范围的扩大；（２）ＤＬＬＭＥ不适合复杂基质样品分析。通过ＳＰＥ—ＤＬＬＭＥ或ＳＦＥ—ＤＬＬＭＥ等过程实现了部分复杂基质中目标物的分析．但就复杂基质的净化效果及其适用性仍然有一定的局限性．分散剂虽然在这些过程中起到了至关重要的链接作用．但消耗量大。仍然需要在现有技术的基础上进行改进和发展，使其更好地应用于复杂基质样品的分析；（３）ＤＬＬＭＥ自动化及其与分析仪器在线联用的研究。ＤＬＬＭＥ操作简单．但是涉及到摇晃、离心等萃取过程。自动在线处理较困难。虽然在一些实验中已经可以实现部分萃取步骤的自动化．但是就整个过程的自动化以及如何实现与分析仪器匹配等问题仍未解决：（４）萃取剂、分散剂、分析物范围有限。目前文献中报道的萃取剂从卤代烃扩展到离子液体、密度小于水的溶剂。但是离子液体不挥发，黏度大．很难与ＧＣ分析联用．并且在开发利用离子液体的同时必须进一步加强其生态毒理学、回收、

降解处理等相关方面的研究。防止其对环境的二次

污染。目前．对于不同基质中萃取极性和离子化化合物的应用研究还较少。

综上所述。从２００６年ＤＬＬＭＥ第一次应用到水样中有机物的测定．到现在已经有大量的研究与应用．虽然目前ＤＵ肌Ｅ方法还存在一定的局限性．但是其具有很多传统前处理方法无法比拟的优点。目前，其研究方向主要为新的萃取剂或分散剂的开发、与各种新方法联用的建立、与各种分析仪器的联用、分析物及分析基质范围的拓展、自动化操作及与仪器在线联用的实现等。相信随着研究的不断深入．ＤＬＬＭＥ将更好地发挥其在食品污染物

痕量、超痕量分析领域中的巨大作用。

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第２期

马智玲等：分散液液微萃取技术及其在食品安全分析中的应用

一４３９一

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效液相色谱法测定番茄中的氨基甲酸酯类农药［Ｊ】．分析测试学报，２０ｌＯ，２９（１１１：１１６９一１１７２．【３８】Ｌｉ

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一４４０热带作物学报

第３６卷

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２００９，３２（１２）：２

１０３—２１０８．

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责任编辑：沈德发

分散液液微萃取技术及其在食品安全分析中的应用

作者：作者单位：

马智玲， 魏长宾， 刘新艳， 李凌云， 刘玉革， 刘肃， 方佳， MA Zhiling， WEI Changbin， LIUXinyan， LI Lingyun， LIU Yuge， LIU Su， FANG Jia

马智玲,魏长宾,刘玉革,MA Zhiling,WEI Changbin,LIU Yuge(农业部热带果树生物学重点实验室 中国热带农业科学院南亚热带作物研究所 广东湛江 524091)， 刘新艳,李凌云,刘肃,LIU Xinyan,LI

Lingyun,LIU Su(农业部蔬菜品质监督检验测试中心 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 北京 100081)， 方佳,FANG Jia(中国热带农业科学院,海南海口,571101)热带作物学报

Chinese Journal of Tropical Crops2015,36(2)

刊名：英文刊名：年，卷(期)：

引用本文格式：马智玲.魏长宾.刘新艳.李凌云.刘玉革.刘肃.方佳.MA Zhiling.WEI Changbin.LIU Xinyan.LI Lingyun.LIU Yuge.LIU Su.FANG Jia 分散液液微萃取技术及其在食品安全分析中的应用[期刊论文]-热带作物学报 2015(2)