紫外分光光度法
实验目的
1、学会UV-2401型紫外可见分光光度计的使用方法
2、学会利用吸收光谱进行未知物定性的方法
3、学会杂质的检出方法
实验原理
紫外吸收光谱为有机化合物的定性分析提供了有用的信息，其方法是将未知试样和标准品以相同浓度配制在相同溶剂中，再分别绘制吸收光谱，比较两者是否一致。也可将未知试样的吸收光谱同标准谱图（如萨特勒标准谱图）比较，如吸收光谱完全相同，则一般可认为两者是同一化合物。但是，有机化合物在紫外区的吸收峰较少，有时会出现不同结构，只要具有相同的生色团，它们的最大吸收波长相同，然而其吸收系数是有差别的。因此须利用最大吸收波长处的吸收系数作进一步的比较。
在没有紫外吸收峰的物质中检查含高吸收系数的杂质是紫外吸收光谱的重要用途之一。如乙醇中杂质苯的检查，只需要测定256nm 处有无苯的吸收峰即可。因为在这一波段，主成分乙醇无吸收。
仪器与试剂
1、UV-2401型紫外可见分光光度计；石英比色皿
2、苯的乙醇溶液；苯；无水乙醇
3、长胶头滴管；烧杯
实验内容
1、苯的吸收光谱绘制：用滴管移取1滴纯净苯至于石英吸收池内，加盖，放置
2~3分钟后置于样品光路中。将另一空的石英吸收池置于参比光路中，在慢速扫描下，改变三种光谱通带（0.2nm ，1.0nm ，2.0nm ）, 绘制苯的紫外吸收光谱。根据所获得的吸收光谱选择适当的光谱通带宽度。
2、乙醇及乙醇-苯的吸收光谱绘制：依据步骤1获得的光谱通带，与1相同的步
骤绘制无水乙醇及乙醇-苯的吸收光谱。
3、吸收系数的确认：依据苯的吸收光谱，在最大吸收波长处检测乙醇-苯溶液的
吸收系数，比较是否与苯的纯物质的吸收系数一致。
数据处理
1、依据苯及乙醇的吸收光谱，判断乙醇溶液中是否含有苯。
2、总结有机化合物定性分析的一般方法
思考题：
1、为什么测量苯的吸收曲线需要用石英比色皿？
2、某物质吸收曲线与另一物质吸收曲线相同，是否说明二者为同一物质？为什
么？
3、
实验目的
1、巩固UV-2401型型紫外可见分光光度计的使用方法
2、掌握紫外吸收光谱法单组分定量分析的原理及方法
实验原理
根据朗伯一比尔定律，用紫外一可见分光光度法很容易定量测定在此区域有吸收的单一组分。高锰酸钾溶液通常呈紫红色，因此其在可见光区有吸收峰，可用紫外可见分光光度计测出它的吸收光谱，依据标准溶液的吸光度可计算出其摩尔吸收系数。
A = ε b c
为了提高检测灵敏度，选择在最大吸收波长处进行标准曲线（A-c ）的绘制。依据标准曲线可得到未知浓度高锰酸钾的浓度值。
仪器和试剂
1、 UV-2401型紫外可见分光光度计
2、 0.02mol ·L -1KMnO 4溶液（含H 2SO 40.5 mol·L -1，含KIO 4 2g/L）
3、 容量瓶；烧杯；移液管；玻璃比色皿
实验内容
1、 分别取一定量的0.02mol•L-1KMnO 4溶液，稀释配制成浓度为0.0008mol•L-1，0.0016mol•L-1，0.0024mol•L-1，0.0032mol•L-1，0.0040mol•L-1的标准系列溶液。
2、 开启分光光度计。
3、 绘制上述5种溶液在375~625nm范围的吸收曲线，并测定其在最大吸收波长下的吸光度。
4、 在最大吸收波长下测定给定试样的吸光度。
数据处理
1、 由步骤3得到的吸光度，计算KMnO 4溶液的摩尔吸收系数。
2、 绘制标准曲线。
3、 依据标准曲线计算试样未知浓度。
思考题：
1、实验中哪些因素会影响工作曲线斜率？哪些因素会对工作曲线带来误差？
2、为什么待测液浓度要落在标准溶液浓度之间？