微藻 脂肪酸 检测方法
Prosedyre fettsyremålinger NY september 2001
1. Hent ny BF3 -metanol og lag natrium-metanolat på GC-labben.
2. Tilsett 500 µl toluen m/C17:0 TAG i hvert prøverør. Ikke la prøvene tine på forhånd, ta dem
rett før.
3. Tilsett 1 ml natrium-metanolat i hvert rør. Rist/bland godt.
4. Sett alle rørene i vannbad, 80 grader i 20 min, med risting på ca 150 rpm.
5. Rørene kjøles til romtemperatur i 5 min.
6. Tilsett 1 ml BF3 –metanol i hvert rør.
7. Sett alle rørene i vannbad, 80 grader i 20 min, med risting på ca 150 rpm.
8. Rørene kjøles til romtemperatur i 5 min.
9. Tilsett 400µl heksan m/C19:-ME og 400µl Milli-Q-vann til hver prøve.
10. Sentrifuger ved 2000 rcf i 3 min.
11. Pipetter den øvre heksanfasen over i små GC-vials, putt i fryseren til de skal kjøres.
12. Kjør prøvene, cap dem om etterpå og putt tilbake i fryseren.
Procedure fatty acid measurements NY September 2001
1 Get new BF3-methanol layer sodium methanolate the GC lab.
2 Add 500 μl toluene m/C17: 0 TAG in each test tube. Do not let the samples thaw in advance, take them right before.
3 Add 1 ml of sodium methanolate in each tube. Shake / mix well.
4 Put all the tubes in a water bath, 80 ° C for 20 min, with shaking at 150 rpm.
5 The tubes are cooled to room temperature for 5 min.
6 Add 1 ml of BF3-methanol to each tube.
7 Put all the tubes in a water bath, 80 ° C for 20 min, with shaking at 150 rpm.
8 The tubes are cooled to room temperature for 5 min.
9 Add 400μl hexane m/C19:-ME and 400μl Milli-Q water to each sample.
10 Centrifuge at 2000 rcf for 3 minutes.
11 Pipette the upper witch stage over the small GC vials, put in the freezer until ready to run. 12 Run the samples, cap them afterwards and put back in the freezer.
藻类脂肪酸测定
1加入500μL 甲苯(含C17:0甘油三酯)在每个试管中。不要让样品解冻提前。 2加入1 ml的甲醇钠在试管,摇匀。
3把所有的试管放在水浴中,80℃20分钟,以150rpm 振荡。
4将试管冷却至室温,持续5分钟。
5加入1 ml的BF 3-甲醇于试管。
6把所有的试管放在水浴中,80℃20分钟,以150rpm 振荡。
7将试管冷却至室温,5分钟。
8添加400μL正己烷(含C19:00内标物)和400μL Milli-Q 水(蒸馏水),以每个样品。
9离心机2000 RCF离心3分钟。
10用移液器将正己烷移入GC 小瓶,放进冰箱。
11进GC 检测。