食用菌培训学校支招菌种的保存方法
食用菌培训学校支招菌种的保存方法
沙土管法
将沙或土过筛﹑烘干﹑装管﹑灭菌﹑然後将菌种制成孢子悬液滴入其中混匀﹐放到盛氯化钙的干燥器里吸除水分﹐干燥後保存或用火焰封管後保存。吸附在干燥沙土上的孢子因缺水而处于休眠状态﹐可保存较长时期。此法适用于芽孢杆菌﹑梭状芽孢杆菌﹑放线菌﹑镰刀菌等。
甘油管好弄，你首先用水把孢子收集起来弄成孢子悬液，然后用孢子滤器过滤一下之后，离心收集孢子，用20%的甘油（甘油的浓度好像不同实验室方法还不太一样，有的用的是30%）重悬，然后就可以放-80度保存了~
甘油保存法：把菌孢子用少量无菌水收集到小试管中，加入灭菌甘油，使管中甘油浓度大于70%，摇匀，存入冰箱，
一般我在保存放线菌时，也是保存放线菌孢子的。先是制备孢子悬液，离心收集孢子，20%甘油悬浮，分装保种管，-80℃冰箱保存。不过没有长时间（>1y)来验证好坏，但我觉得放线菌活力还好，也没有什么污染，关键是很方便操作。
放线菌的菌落放线菌的菌落放线菌的菌落放线菌的菌落 放线菌在固体培养基上形成与细菌不同的菌落特征，放线菌菌丝相互交错缠绕形成质地致密的小菌落，干燥、不透明、难以挑取，当大量孢子覆盖于菌落表面时，就形成表面为粉末状或颗粒状的典型放线菌菌落，由于基内菌丝和孢子常有颜色，使得菌落的正反面呈现出不同的色泽。
细菌保存：液体培养，至OD>0.1，再与50%的甘油等体积混合，甘油要两次灭菌
菌种保存原理：菌种冻存与复苏原则是：慢冻速融。即冻存时要先-20℃，在冻存-80℃。而复苏时直接将冻存的丢37℃快速融化。
斜面保存发：适用于细菌、放线菌、酵母、丝状真菌短期保藏。霉菌、放线菌及
有芽孢的细菌保存2—4个月，移种一次。酵母菌两个月，细菌****每月移种一次。
放线菌：（甘油浓度40%-60%）
1、将纯甘油先干热160℃过夜12h
2、再将纯甘油湿热灭菌
3、将灭俩次菌的纯甘油与灭菌的无菌水等体积混合至浓度为50%，并再次灭菌
4、将灭菌的50%甘油分装进小红帽（1-2ml）
5、将长满孢子的放线菌直接刮取放入小红帽
6、先-20℃，在冻存-80℃
细菌：
1、将纯甘油先干热160℃过夜12h
2、再将纯甘油湿热灭菌
3、将灭俩次菌的纯甘油与灭菌的无菌水等体积混合至浓度为50%，并再次灭菌
4、将灭菌的50%甘油分装进小红帽（1-2ml）
5、取细菌液体培养（至OD>0.1）加入小红帽中，与50%的甘油等体积混合
（甘油终浓度25%）——小木虫网站
6、先-20℃，在冻存-80℃