农杆菌介导的转化所用基本培养基配方
农杆菌介导的转化所用基本培养基配方
一、NB 培养基配方(基本培养基) N6大量: 硝酸钾KNO 3
硫酸氨(NH 4)2SO 4 磷酸二氢钾KH 2PO 4 硫酸镁MgSO 4·7H 2O 氯化钙CaCl 2·2H 2O B5微量: 硼酸H 3BO 4
硫酸锰MnSO 4·H 2O 硫酸锌ZnSO 4·7H 2O 碘化钾KI
钼酸钠Na 2MoO 4·2H 2O 硫酸铜CuSO 4·5H 2O 氯化钴CoCl 2·6H 2O 铁盐:
硫酸亚铁FeSO 4·7H 2O 乙二胺四乙酸二钠Na 2EDTA 肌醇:
肌醇Myo-inositol 有机成分:
盐酸硫胺素ThiamineHCl 盐酸吡哆醇PyridoxineHCl 尼克酸Niacin
水解酪蛋白Casamino acids 谷氨酰胺Glutam 脯氨酸Proline ine 甘氨酸Glycine
(mg/l) 2830 463 400 185 166 (mg/l) 3 7.58 2 0.75 0.25 0.025 0.025 (mg/l) 27.8 37.3 (mg/l) 100 (mg/l) 10 1 1 300 250 500 2
母液:10X ,1L (mg ) 28300 4630 4000 1850 1660
母液:100X ,1L (mg )300 758 200 75 25 2.5 2.5
母液:100X ,1L (mg )2780 3730
母液:100X ,1L (mg )10000
母液:50X ,1L (mg ) 500 50 50 15000 12500 25000 100
蔗糖Sucrose 30000mg/l 琼脂Phytagel 2400mg/l pH 5.8-5.9
注意:有机成分不能高压灭菌,须用滤器抽滤,分装后-20℃保存
二、AAM 培养基配方 大量:
磷酸二氢钾KH 2PO 4 硫酸镁MgSO 4·7H 2O 氯化钾KCl 氯化钙CaCl 2·2H 2O 微量:
硫酸锰MnSO 4·H 2O 钼酸钠Na 2MoO 4·2H 2O 硼酸H 3BO 4 硫酸锌ZnSO 4·7H 2O 碘化钾KI
硫酸铜CuSO 4·5H 2O 氯化钴CoCl 2·6H 2O 铁盐:
硫酸亚铁FeSO 4·7H 2O 乙二胺四乙酸二钠Na 2EDTA 肌醇:
肌醇Myo-inositol 维生素:
盐酸硫胺素ThiamineHCl 盐酸吡哆醇PyridoxineHCl 尼克酸Niacin 氨基酸: 甘氨酸Glycine 精氨酸Arginine 谷氨酰胺Glutamine
(mg/l) 170 370 2940 440 (mg/l) 7.58 0.25 3 2 0.75 0.0387 0.025 (mg/l) 27.8 37.3 (mg/l) 100 (mg/l) 0.5 0.5 0.5 (mg/l) 7.5 174 876
母液:10X ,1L (mg ) 1700 3700 29400 4400
母液:100X ,100ml (mg )758 25 300 200 75 3.87 2.5
母液:100X ,1L (mg ) 2780 3730
母液:100X ,1L (mg ) 10000
母液:100X ,1L (mg ) 50 50 50
水解酪蛋白Casamino acids 500mg/l 乙酰丁香酮Acetosgringone 100μΜ 葡萄糖Glucose 68500mg/l 蔗糖Sucrose 30000mg/l pH 5.2
注意:AAM 培养基不能高压灭菌,须用滤器抽滤,分装后-20℃保存
三、YEB 固体培养基 (pH 7.0) 酵母提取物 蛋白胨 牛肉膏 蔗糖 硫酸镁
添加: Kan 50 mg/L Rif 50 mg/L 四、LB 固体培养基 (pH 7.0-7.2) 酵母提取物 蛋白胨 NaCl
添加: Kan 50 mg/L Rif 50 mg/L
五、MS 培养基配方 大量: 硝酸铵NH 4NO 3 硝酸钾KNO 3
磷酸二氢钾KH 2PO 4 硫酸镁MgSO 4·7H 2O 氯化钙CaCl 2·2H 2O
(mg/l) 1650 1900 170 370 440
母液:20X ,1L (mg ) 33000 38000 3400 7400 8800
5g /L 10g /L 10g /L
1.0g /L 5.0g /L 5.0g /L 5.0g /L 0.5g /L
微量:
硫酸锰MnSO 4·4H 2O 硫酸锌ZnSO 4·7H 2O 硼酸H 3BO 4 碘化钾KI
钼酸钠Na 2MoO 4·2H 2O 硫酸铜CuSO 4·5H 2O 氯化钴CoCl 2·6H 2O 铁盐:
硫酸亚铁FeSO 4·7H 2O 乙二胺四乙酸二钠Na 2EDTA 肌醇:
肌醇Myo-inositol 维生素:
盐酸硫胺素ThiamineHCl 盐酸吡哆醇PyridoxineHCl 尼克酸Niacin 甘氨酸Glycine 琼脂Phytagel 蔗糖Sucrose pH 5.8-5.9
(mg/l) 22.3 8.6 6.2 0.83 0.25 0.025 0.025 (mg/l) 27.85 37.25 (mg/l) 100 (mg/l) 0.4 0.5 0.5 2 mg/l 8000 mg/l 30000mg/l
母液:100X ,1L (mg ) 2230 860 620 83 25 2.5 2.5
母液:100X ,1L (mg ) 2785 3725
母液:100X ,1L (mg ) 10000
母液:100X ,1L (mg ) 40 50 50