实验7-霉菌的形态观察
实验八 霉菌的形态观察
一、实验原理
霉菌的营养体是分枝的菌丝体。霉菌在潮湿条件下生长繁殖长出丝状、绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。菌丝分为营养菌丝与气生菌丝,营养菌丝匍匐于培养基的表面或生于培养基内吸收养料,从营养菌丝上长出伸于空中的菌丝为气生菌丝系,可分化出产生孢子的结构。菌丝的直径一般比细菌和放线菌大得多。菌丝在显微镜下观察呈管状,有的有横隔膜将菌丝分割为多个细胞,有的菌丝无横隔膜整个菌丝体为1个单细胞。霉菌的菌落形态较大,质地较疏松,颜色各不相同。霉菌无性繁殖或有性繁殖可形成不同类型的孢子。菌丝、孢子及菌落等特征,因霉菌的种类而异,因而为种类鉴定非常重要的依据。
由于霉菌的菌丝体较粗,而且孢子容易飞散,若在水中溶易变形,显微测量时与实际值存在人为偏差,故观察时将其置于棉蓝乳酚油中,既有保持其正常的形态、使细胞不易干燥及杀菌防腐作用,还因棉蓝染料的存在而对菌丝与孢子具有染色作用,真菌的显微观察时常用棉蓝乳酚油作为浮载剂。
二、主要仪器及设备
曲霉(Aspergillus sp.),青霉(Penicillium sp.),根霉(Rhizopus sp.);
棉蓝乳酸油染色液,载玻片,盖玻片,解剖针,滤纸,显微镜等。
三、操作步骤
1、取95%酒精浸泡的载玻片1块,火焰烧去酒精;
2、冷却后在载玻片中央滴棉蓝乳酚油1滴;
3、以解剖针从霉菌菌落上挑少许菌丝体置于染液中;
4、以解剖针使菌丝体在染液中充分展开;
5、将1洁净的盖玻片盖于染液上,以滤纸吸去盖玻片边缘过剩的染液;
6、显微镜下20X、40X物镜观察绘图。
四、注意事项
1、菌丝体在浮载剂中必须充分展开;
2、盖盖玻片时必须斜着缓慢放下,否则在盖上异形成气泡。
五、实验报告
1、绘制有隔菌丝与无隔菌丝图
2、绘制青霉菌及曲霉菌的分生孢子梗图。
3、霉菌显微观察制片与细菌有何不同?
II 四大类细胞型微生物的菌落特征比较观察
一、 实验原理
菌落形态是指某种微生物在一定的培养基上由单个菌体形成的群体形态。细菌、放线菌、酵母菌和霉菌,每一类微生物在一定培养条件下形成的菌落各具有某些相对的特征,通过观察这些特征,来区分各大类微生物及初步识别、鉴定微生物,方法简便快速,在科研和生产实践中常被采用。
二、实验器材
1、菌种 细菌(大肠杆菌)、未鉴定放线菌、酵母菌、霉菌(青霉菌、根霉)等;
2、培养基 牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号合成培养基和马铃薯蔗糖培养基等;
3、材料 无菌平皿,接种环(针)
三、操作步骤
1、制备菌落平板 分别用上述不同培养基制成平板,然后用上述的细菌、放线菌、酵母菌以划线法制成已知菌平板,而霉菌则用点种法(一点或三点均可)制成已知菌平板。
2、细菌菌落特征的观察 观察菌落的大小、表面状况、透明度、色泽、边缘、隆起度、透光性、是否分泌色素等特点来掌握细菌菌落的形态特征。
3、放线菌菌落特征的观察 观察菌落的大小、表面形状(呈崎呕、褶皱或平滑),气生菌丝的形状(呈绒状、粉状或茸毛状),有无同心环以及菌落的颜色等特点,以便掌握放线菌菌落的形态特征。
4、酵母菌菌落特征的观察 大多数酵母菌形成的菌落与细菌的相似、但较细菌的菌落大而厚,湿润、粘稠、易被挑起。菌落多呈乳白色,少数为红色(如红酵母),酵母菌菌落的颜色、光泽、质地、表面和边缘特征均为识别时的重要依据。
5、霉菌菌落特征的观察 霉菌菌落通常以扩散方式向四周蔓延,菌丝较粗而长,形成的菌落较疏松、呈绒毛状、絮状或蜘蛛网状,一般比细菌菌落大几倍到几十倍。菌落背面呈现不同颜色。
四、注意事项
1、在观察过程中应注意比较并区分放线菌与霉菌、酵母菌与细菌的菌落特征。
2、制备菌落平板时应注意培养基的选用和培养时间的控制。
五、作业
1、分别描述细菌、放线菌、霉菌、酵母菌细胞的主要特征。
2、试比较细菌与酵母菌、放线菌与霉菌的菌落形态差异。
菌丝
无性孢子
孢子囊
囊轴
有性孢子