复方黄芪多糖拮抗环磷酰胺对小鼠毒副作用的研究

　　【摘要】目的：探讨复方黄芪多糖拮抗环磷酰胺对小鼠毒副作用的影响。方法：对小鼠行大剂量（85 mg/kg，2次）环磷酰胺(CY)腹腔注射，并用复方黄芪多糖腹腔注射预防，以观察复方黄芪多糖对CY毒副作用的影响。结果：与CY组比较复方黄芪多糖注射组（10 ml/kg、20 ml/kg）小鼠WBC及LMY计数明显高于环磷酰胺组（P＜0.05），GRA比率低于环磷酰胺组（P＜0.05），脾脏指数明显高于CY组(P＜0．01)。结论：复方黄芪多糖具有拮抗CY对小鼠毒副作用的效应。 　　【关键词】黄芪多糖；人参总皂苷；环磷酰胺 　　文章编号：1009-5519（2008）01-0001-02 中图分类号：R28 文献标识码：A 　　Study of compound astragalus polysaccharides in the antagonization of side effects caused by cyclophosphamide in mice 　　ZHAO Lian-fang1，ZHENG Yu-shu2，ZHANG Shan-yu1 　　（1.Health Science Center of Yanbian University，Jilin 133000，China；2.Korean Medicine Hospital of Yanbian，Jilin 133000，China） 　　【Abstract】Objective：To investigate the effect of compound astragalus polysaccharides(Co-ASP) in the antagonization of the side effects caused by cyclophosphamide(CY) in mice.Methods：Large dosage of cyclophosphamide(85 mg/kg twice) was injected into the abdominal cavity in mice，and compound astragalus polysaccharides was used by the same way.The effect of compound astragalus polysaccharides on the side effects of cyclophosphamide was observed.Results：Compared with the cyclophosphamide group，WBC and LMY in the compound astragalus polysaccharides injection group increased significantly(P　　【Key words】Compound astragalus polysaccharides；Total ginsenoside；Cyclophosphamide 　　 　　环磷酰胺（CY）是临床上常用的广谱抗肿瘤药物，由于毒副作用较强，临床应用受到一定的限制，尤其，它对造血系统和免疫系统的不良反应会给机体带来极其不良的后果。由于这些毒副作用，使CY的用量和疗程均受到了限制。为了寻找有效的拮抗化疗剂毒副作用的药物，我们将黄芪多糖配伍人参总皂苷制备复方黄芪多糖注射液，并探讨复方黄芪多糖对CY致小鼠毒副作用的影响，现报道如下。 　　 　　1 材料 　　 　　1．1 动物：昆明种小鼠，雌雄兼用，体重(20±2)g，由吉林省延边大学医学部实验动物科提供。 　　1．2 试药：膜荚黄芪于2006年10月末采集于吉林省和龙市，由吉林延边大学药学院生药学教研室鉴定为膜荚黄芪(Astragalus membraneaceus Fisch．)的干燥根；人参于2006年11月末采集于吉林敦化市，由吉林延边大学药学院生药学教研室鉴定为人参（Panax ginseng C.A.Mey）的干燥根；CY江苏恒瑞医药股份有限公司；乙醇等试剂均为分析纯。 　　 　　2 方法 　　 　　2．1 黄芪多糖（ASP）提取与纯化：按文献[1]方法提取精制黄芪多糖，苯酚-硫酸法[2]测定多糖含量为83.2％。 　　2.2 人参总皂苷（TG）提取与纯化：称取干燥粉碎的人参药材230 g，分别加70%乙醇（8、6倍）回流提取2次（2、2 h），滤过，滤液浓缩，过D101大孔吸附树脂柱，收集70%乙醇洗脱部分，浓缩，干燥，得4.53 g人参总皂苷（比色法[3]测定含量为62.9%）。 　　2.3 复方黄芪多糖注射液的制备：称取黄芪多糖2.0 g和人参总皂苷0.4 g，加蒸馏水溶解并定容至200 ml，分装，在120 ℃高温下消毒30 min，冷却，即可。 　　2.4 对小鼠外周血象的影响：取50只小鼠，按体重随机分为4组：空白组、CY组、复方黄芪多糖注射液小剂量组（10 ml/kg）和大剂量组（20 ml/kg），适应环境3天后药物组给相应的实验药品，空白组和CY组腹腔注射生理盐水20 ml/kg，共10天，期间第五天和第八天给药或生理盐水同时腹腔注射CY（85 mg/kg）1次，第十一天眼球取血，加入抗凝试管中，用ABX-60血细胞分析仪（产地：法国）作血常规测定。 　　2.5 对小鼠免疫器官指数的影响：各组小鼠取血前称重，取血后分离脾脏和胸腺，分别称重，计算脾指数与胸腺指数。脾指数 = 脾脏重量（mg）/小鼠体重（g）；胸腺指数=胸腺重量（mg）/小鼠体重（g）。 　　2.6 统计学处理：应用SPSS12．0中相应程序对数据进行统计学处理，两组间均数采用t检验。 　　 　　3 结果 　　 　　3.1 CY对小鼠外周血象的影响：各组小鼠外周血象见表1和表2。从表1和表2可见，CY组小鼠外周血WBC及LMY计数降低（与空白组比较P　　3.2 CY致小鼠免疫器官指数降低的影响：见表3。复方黄芪多糖腹腔注射各剂量组小鼠脾脏指数明显高于CY组(P　　 　　4 讨论 　　 　　 　　CY又名环磷氮芥、安道生、癌得星或癌得散。本品在体外无活性，但在体内经肝细胞色素P-450氧化生成中间产物醛磷酰胺(aldophosphamide)，再在肿瘤细胞内分解出磷酰胺氮芥(phosphamidemustard)与细胞的DNA发生烷化作用，形成交叉联结，从而抑制肿瘤细胞的生长繁殖[4]。因为CY与DNA的这种作用没有特异性，对正常的组织细胞也具有杀伤作用。特别是对增殖分化较快的骨髓造血组织、淋巴组织、胃肠黏膜上皮细胞、毛囊和生殖细胞等抑制作用明显。病人多出现骨髓抑制、免疫力低下和脱发等不良反应，而这些毒副作用常成为限制用量和发挥疗效的主要障碍。本实验结果表明，CY按85 mg/kg体重的剂量腹腔注射2次可使小鼠外周血WBC及LMY计数降低，LYM比率减少和GRA比率升高。 　　前期研究表明，黄芪多糖与人参总皂苷联用对CY腹腔注射（85 mg/kg，1次）所致小鼠免疫器官指数降低有明显的拮抗作用[5]，本实验证实复方黄芪多糖腹腔注射也能预防较大剂量CY（85 mg/kg，2次）所致小鼠免疫器官萎缩。另外，本实验结果表明，复方黄芪多糖对CY所致小鼠外周血白细胞减少有明显的提升作用。提示复方黄芪多糖腹腔注射对CY所致小鼠白细胞降低、免疫器官萎缩具有良好的保护作用，具有进一步开发的价值。 　　 　　参考文献： 　　[1] 赵莲芳，郑玉淑，朴惠顺，等.黄芪多糖与人参总皂苷对衰老小鼠的抗衰老作用[J].延边大学医学学报，2006，29（4）：249. 　　[2] 钟建平，钟春燕，赵道辉，等.苯酚-硫酸法测定保健食品多糖含量[J].中国卫生检验杂志，2001，11（6）：675. 　　[3] 张全英，施爱明，袁心慧.参麦注射液中人参皂苷含量测定[J].中草药，2000，31（10）：750. 　　[4] 王新禹，梁前进.环磷酰胺的毒副作用机制及应对措施[J].药学进展，2006，30（10）：452. 　　[5] 张善玉，朴惠顺，申英爱.黄芪多糖与人参总皂苷联用的免疫调节作用初步研究[J].中国药房，2005，16（21）：1620. 　　收稿日期：2007-09-17