平均回收率
２８６
新疆医科大学学报ＪＯＵＲＮＡＩ。ＯＦＸＩＮＪＩＡＮＧＭＥＤＩＣＡｌ。ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ
２０１０
Ｍａｒ．，３３（３）
分光光度法测定维吾尔药核桃分心木中总皂苷的含量
韩艳春ｐ，阿布都热合曼・合力力２，阿依吐伦・斯马义Ｐ’
（１新疆医科大学药学院，２新疆维吾尔自治区维吾尔医院，新疆乌鲁木齐８３００００）
摘要：目的研究维吾尔药核桃分心木总皂苷的含量测定方法。方法用９５％乙醇提取，水饱和正丁醇萃
取的方法提取纯化核桃分心木中总皂苷。高氯酸显色，紫外分光光度法测定核桃分心木中总皂苷的含量。结呆
以人参皂苷Ｒｂｌ为标准品作标准曲线。Ａ一０．０５９３Ｃ＋ｏｊ０５７
６，ｒ＝０．９９９
７，样品检测量在０．２０８６～ｏ．３２７
８
ｍｇ的范围内与吸光度线性关系良好，回收率为８９．１１％，测得核桃分心木总皂苷的含量为４．１８７％。结论定方法简便、快速、灵敏、准确，可作为维吾尔药核桃分心木中总皂苷含量测定方法的参考依据。
关键词：核桃分心木；总皂苷；分光光度法中图分类号：Ｒ２７．１１
文献标识码：Ａ
文章编号：１００９—５５５１（２００９）０３—０２８６—０２
此测
ＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｏｔａｌｓａｐｏｎｉｎｓｉｎＵｙｇｕｒ
ｍｅｄｉｃｉｎｅｏｆｄｉａｐｈｒａｇｍａ
ｊｕｇｌａｎｄｉｓ
ｆｒｕｃｔｕｓ
ＨＡＮＹａｎ－ｃｈｕｎ，Ａｂｄｕｒａｈｍａｎ・Ｈｏｌｌｙ，Ａｙｔｕｌｕｎ・Ｓｉｍａｙｉｌ
（ＰｈａｒｍａｃｙＣｏｌｌｅｇｅ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ
Ｍｅｄｉｃａｌ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ８３００１１，Ｃｈｉｎａ）
ｃｏｎｔｅｎｔ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ
Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈ
ａ
ｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｔｈｅｏｆｔｏｔａｌｓａｐｏｎｉｎｓｉｎＵｙｇｕｒｈｅｒｂａｌ
ｍｅｄｉｃｉｎｅｏｆｄｉａｐｈｒａｇｍａｊｕｇｌａｎｄｉｓｆｒｕｃｔｕｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｏｔａｌｓａｐｏｎｉｎｓｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙ９５％ｅｔｈａｎｏｌａｎｄｐｕ—
ｔＯ
ｒｉｆｌｅｄｂｙｗａｔｅｒ—ｓａｔｕｒａｔｉｎｇｎ—ｂｕｔａｎ０１．Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｆｐｅｒｃｈｌｏｒｉｃａｃｉｄｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙｗａｓｕｓｅｄｍｉｎｅｔｏｔａｌｓａｐｏｎｉｎｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ
ＧｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲｂｌｗａｓｔａｋｅｎ
ａｓ
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ｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄ
ｔｏ
ｍａｋｅｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄｃｕｒｖｅ：Ａ＝
ｒａｔｅ
０．０５９３Ｃ＋０．０５７６，ｒ＝０．９９９７，ｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｗａｓ０．２０８６＂－０．３２７８ｍｇ．Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｗａｓ
８９．１１％．Ｔｈｅ
ａｒｅ
ｃｏｎｔｅｎｔｓ
ｏｆｔｏｔａｌｓａｐｏｎｉｎｓｉｎｄｉａｐｈｒａｇｍａｊｕｇｌａｎｄｉｓｆｒｕｃｔｕｓｗａｓ４．１８７％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
Ｔｈｅｓｅｍｅｔｈｏｄｓ
ｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅａｎｄｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆｔｈｅｔｏｔａｌｓａｐｏｎｉｎｓｉｎｄｉａｐｈｒａｇｍａ
ｊｕｇｌａｎｄｉｓｆｒｕｃｔｕｓ．
Ｋｅｙ
ｗｏｒｄｓ：ｄｉａｐｈｒａｇｍａｊｕｇｌａｎｄｉｓｆｒｕｃｔｕｓ；ｔｏｔａｌｓａｐｏｎｉｎｓ；ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ；ａｓｓａｙ
维吾尔药核桃分心木（ｄｉａｐｈｒａｇｍａｊｕｇｌａｎｄｉｓｆｒｕｃｔｕｓ）是胡桃科核桃属植物核桃的果核内木质隔膜，体轻、质脆、易折断…。分心木味苦、涩，性平；归脾、肾经。维吾尔医用于治疗肾虚遗精疗效显著［２＿４］。目前国内外核桃属植物［５１及核桃楸各药用部位的研究较多［６］，但对于分心木的研究较少。对分心木的药用价值没有充分地认识，导致该药用资源的严重浪费。本文主要针对核桃分心木中总皂苷的含量进行初步测定，以期指导皂苷类成分的进一步研究。
鉴定为胡桃科核桃属植物核桃的果核内木质隔膜。
ＵＶ－２５５０紫外光谱仪（日本岛津），ＥＹＥＩ。ＡＡＢｌ０４一Ｎ型多功能电子天平（Ｔｏｌｅｄｏ
ｈａｉ
ＳＢ：
１０００型旋转蒸发仪（上海爱朗仪器有限公司），
Ｉｎｓｔｒ．Ｓｈａｎｇ—
Ｌｔｄ．），ＳＫ２５１０ＨＰ超声清洗仪（上海科导超声
清洗仪有限公司），ＤＨ＠－９０５３Ａ型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）等。正丁醇，９５％乙醇，甲醇（天津市富宇精细化工有限公司，分析纯），高氯酸，浓硫酸（北京北细精细化学品有限责任公司，分析纯），人参皂苷Ｒｂｌ标准品（中国药品生物制品检定所提供，批号１１０７０４－２００４２０）等。
１主要仪器与试药
核桃分心木采自新疆和田地区，经新疆医科大学药学院天然药物化学教研室帕丽达・阿布利孜教授
２实验方法与结果
２．１样品溶液的制备Ⅲ
精密称取５．０ｇ药材粉
作者简介：韩艳春（１９８３－－），女，在读硕士。研究方向：新疆地方药用植物的研究。
通讯作者：阿依吐伦・斯马义，女（乌孜别克族），教授，硕士生导师，研究方向：药物分析和天然药物化学，Ｅ—ｍａｉｌ：ａｙｔｕｌｕｎｓｓ＠１２６．ｃｏｍ。
万方数据
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末，置索氏提取器内，加９５％乙醇５０ｍｌ在８０℃回流提取至无色，溶液回收９５％乙醇至干，加蒸馏水
１０
ｍｌ超声溶解，用等量的水饱和正丁醇萃取４次，
合并水饱和正丁醇部分萃取液，正丁醇饱和水洗涤，水浴蒸干，残渣用甲醇溶液定容至５０ｍｌ，制得样品溶液。
２．２标准品溶液的制备
精密称定人参皂苷Ｒｂｌ
标准品１４．９ｍｇ，置１００ｍｌ容量瓶中，加入１０ｍｌ甲醇使溶解，用甲醇稀释至刻度，摇匀。配制浓度为
０．１４９ｍｇ／ｍｌ的人参皂苷Ｒｂｌ标准品溶液。２．３
吸收波长的确定
取人参皂苷Ｒｂｌ标准品溶
液、样品溶液各１ｍｌ，分别置具塞试管中，挥去溶剂，精密加入ｌｏｍｌ高氯酸，旋涡混匀１ｍｉｎ，于７０℃水浴加热反应１５ｍｉｎ，立即于冰水中终止反应。以高氯酸为空白对照，在分光光度计上２００～
７００ａｍ进行扫描，结果样品溶液和标准品溶液均在２５０
ａｍ有最大吸收，故确定吸收波长为２５０
ｎｍ。
２．４标准曲线的制备精密吸取人参皂苷Ｒｂｌ标
准品溶液１．４、１．６、１．８、２．０、２．２ｍｌ于具塞试管中，其余步骤按“２．３”项下操作，于２５０ａｍ处测定吸光度，不同体积标准品溶液的吸光度值见表ｌ。回归方程为Ａ一０．０５９
３Ｃ＋０．０５７６，ｒ一０．９９９７，样品
检测量在０．２０８６～ｏ．３２７
８
ｍｇ的范围内与吸光度
线性关系良好，其标准曲线见图１。
表１
２５０
ｎｎｌ下不同体积标准品溶液的吸光度值
样品编号
１
２
３
４
５
吸光度值（Ａ）０．１７９０．２３３０．２９３０．３５４０．４１５检测浓度（“ｇ／ｍ１）
２０．８６
２３．８４
２６．８２
２９．８０
３２．７８
图１标准曲线图
２．５精密度试验精密吸取人参皂苷Ｒｂｌ标准品溶液１．２ｍ１，按“２．３”项下操作６次，测定吸光度。相对标准偏差（ＲＳＤ）；Ｏ．３０％，表明本法精密度良好。２．６重复性试验取同批分心木６份，按“２．１”项下样品溶液的制备方法和“２．３”项下的显色方法测定吸光度，ＲＳＤ为０．４１％。
２．７显色稳定性试验精密吸取人参皂苷Ｒｂｌ标
万方数据
准品溶液１．０ｍｌ，按“２．３”项下显色方法显色后，分
别在０、０．５、１、１．５、２ｈ测定吸光度，结果表明在２ｈ
内，测定结果较稳定，ＲＳＤ为０．４４％。
２．８样品含量测定精密吸取样品液０．０６ｍｌ，按“２．３”项下的显色方法后，在２５０ｎｍ下测定其吸光度，以人参皂苷Ｒｂｌ为标准品计算得分心木总皂苷的含量为４．１８７％，含量均以干燥品计。
２．９加样回收率实验精密称取分心木粉末１２．５ｍｇ平行６份，并分别精密加入人参皂苷Ｒｂｌ溶液
０．３
ｍｌ，按“２．１”项下样品溶液的制备方法和“２．３”
项下的显色方法测定吸光度，计算回收率。平均回收率为８９．１１％，ＲＳＤ为７．６８％，结果见表２。
表２回收率实验
３
结论
用紫外分光光度法测定总皂苷含量的方法常利
用皂苷与芳香醛一硫酸或高氯酸的显色反应进行比色定量。目前较常用的方法有３种，即高氯酸法口］、香草酸一冰醋酸一高氯酸法［８］、茴香醛一浓硫酸法。本实验中采用高氯酸法，最大波长明显，反应相对稳定。
本文所采用高氯酸显色检测核桃分心木总皂苷
含量的方法，速度快、操作方便、结果准确、灵敏度高，且重现性好，可为维吾尔药核桃分心木药材及其制剂的质量控制提供一定的参考依据。
．参考文献：
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［收稿日期：２００９—１１—１０］