综述性论文写作格式(1)
药物分析设计性实验综述
维生素C及其制剂的含量
测定
药物分析2013级
林晓敏(1303540114)
罗浩森(1303540115)
指导教师:陈晓颖
2015 年 10 月
摘要
目前对维生素含量测定的方法主要有:碘滴定法,二硝基苯肼法,液相色谱法,气相色谱法,荧光法,2,6-二氯靛酚滴定法,紫外可见分光光度法,钼蓝比色法,原子吸收间接测定法等。
关键词:维生素C;含量测定:
前 言
维生素C,简称Vc,又叫抗坏血酸,是含有6个碳原子的酸性多羟基化合物。分子中第2及第3位碳原子上的2个烯醇式羟基极易释放出氢离子,具有很强的还原性。在氧化剂存在时,抗坏血酸可脱氢形成脱氢抗坏血酸,反应可逆,脱氢抗坏血酸具有和维生素C相同的生理活性。脱氢抗坏血酸继续被氧化生成2,3-二酮古洛糖酸完全失去生理活性,反应不可逆。
维生素C纯品为白色无臭结晶,熔点在190-192℃,易溶于水,微溶于丙酮,在乙醇中溶解度更低,不溶于油剂,结晶抗坏血酸在空气中稳定,但它在水溶液中易被空气和其他氧化剂氧化,生成脱氢抗坏血酸;在碱性条件下易分解,见光加速分解;在弱酸条件中较稳定。
维生素C 能促进胶原的生物合成,利于组织创伤的愈合,增强毛细血管壁的强度,增加机体对外界环境的应激能力,是人体生命正常活动不可缺少的微量营养素,人体不能自身合成维生素C,必须通过食物摄取。
摄取维生素C的方法:一是通过摄取含维生素C含量丰富的果蔬。而维生素C主要以还原型的L-抗坏血酸存在于新鲜的水果和蔬菜中。因此测定水果,蔬菜及其制品中的维生素C的含量对评价其营养价值具有重要意义。含Vc较多的水果为柑桔(25~150mg/100g),龙眼(68.7~144.8mg/100g),猕猴桃(300~400mg/100g)等。
在对Vc进行含量测定之前需根据Vc含量选择不同的测定方法。通常,不同的测定方法有不同的浓度测定范围,与此同时即使是同一物种,品种间的维生素含量差异有时也十分明显,以梨为例,含量高的品种——满园香,可达9.24mg/100g,而含量低的品种——黄梨,却仅有0.3mg/100g,两者相差30多倍
表1
碘滴定法也叫碘量法实质为氧化还原滴定法。利用维生素C的还原性,碘单质的强氧化性,以淀粉作为指示剂进行碘滴定法。采用I2作标准溶液进行直接滴定[],其滴定原理,抗坏血酸分子中的二烯醇基可被I2氧化二酮基[],当抗坏血酸分子中的二烯醇基被I2完全氧化后,则I2余淀粉指示剂作用,使溶液变蓝,所以当滴定到溶液出现蓝色时即为终点。该法仪器简单,操作快捷,精确度较高。马正[1]以此法测定VC药片中抗坏血酸的含量,得出结果满意,各组平行测定中标准偏差较小,证明该实验方法的可靠性。同时武文,詹秀环,宣亚文[2]以该法测定蔬菜(白菜,黄瓜,萝卜,西红柿)中维生素C的含量,通过活性炭将提取液脱色后进行滴定,滴定结果是回收率较高,但是也得出结论在与白菜黄瓜相比西红柿萝卜这些深色蔬菜里滴定判断较难。
所以碘滴定法对含花青素,叶绿素,胡萝卜素等色素较多的果蔬不适用,该滴定会受到果蔬的颜色干扰。且碘滴定法要求操作迅速,否则Vc容易被空气氧化。但是对于维生素C片剂或者注射液的含量测定中因颜色干扰小,操作简便快捷。所以建议使用该方法。
2 二硝基苯肼法
还原型维生素C经活性炭催化氧化后,得到脱氢型维生素C,再经过水解与2,4—二硝基苯肼作用生成红色脎,再根据脎在硫酸溶液中的含量与维生素C的总含量成正比,进行比色定量测定。 该操作方法可行且精确度较高,但是操作过程中要保持37℃恒温,且持续时间为3小时,耗时,不建议使用该法。
3 钼蓝比色法
维生素C能将磷钼酸盐定量还原成蓝色的钼蓝化合物,通过分光比色的方法即可测定出食品中或片剂中还原型维生素的含量,且不受样液颜色的影响。在酸性介质中,Vc与磷钼酸盐的反应速度快,环境因素对其影响小,且反应体系的吸光度稳定。李军[1]以此法测定还原型维生素C,该方法回收率高,具有简便快速准确的特点。肖彦春,雷恩春,关秀杰,管晓琳[2]以此法与2,6—二氯靛酚滴定法分别测定维生素C含量,发现两种方法的精密度与准确度都满足分析要求,但是后者在滴定深色蔬菜时,受到颜色的干扰,终点判断不易,从而造成分析误差。而钼蓝比色法因不受样品颜色的影响,其准确度及精确度均高于2,6—二氯靛酚滴定法,该法相较更简便快捷。
4 高效液相色谱法
用高效液相色谱法测定维生素C含量可得到分离良好的色谱图,且测定精确灵敏,回收率高,重复性好,是一种简单,快速,准确测定的方法。徐岳鑫,董赛文,张雪峰[3]运用该法测定维生素C银翘片中维生素C含量。以0.02mol/L磷酸二氢钾—乙腈(95:5)作为流动相,检测波长为249nm等条件下,维生素C进样量在0.08~0.72μg范围内与峰面积线性关系良好,回收率为99.3%,该法简便快捷准确。同时刘国如,刘永锁,陈振玲,王伟,丰延宗,周毓瑾[4]也用了此法测定维生素C注射液含量在检测波长为245nm下也得到了令人满意的结果。
但是液相色谱法需要启普发生器通入有毒气体H2S,用超声波处理样品,样品前处理纯化复杂,对操作要求较高,仪器方面较昂贵,一般小型实验室可能不配备有该仪器。
6 荧光法
维生素C经铜离子氧化为脱氢抗坏血酸,在一定条件下与邻苯二胺反应生成具有荧光的物质。基于此可运用荧光法测定维生素C含量。龚时琼,赵丽华,陈芳,张峰[5]运用该法进行检测西红柿,青椒等蔬菜及水果中维生素C含量,回收率较高,结果令人满意。但荧光法要求维生素C 溶液纯度较高,且温度,溶剂,酸度,荧光熄灭剂等都会影响荧光效率,甚至影响分子结构的结构及构象,从而影响荧光光谱的形状和强度,不建议适用该法测量维生素C含量。
7 2,6-二氯靛酚滴定法
还原型抗坏血酸可以还原染料2,6-二氯靛酚。该染料在酸性溶 液中是粉红色 (在中性或碱性溶液中呈蓝色),被还原后颜色消失;还原型抗坏血酸还原染料后,本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时,一定量的样品提取液还原标准染料液的量,与样品中抗坏血酸含量成正比。但是该法不适用于深色果蔬类,易受颜色干扰影响实验结果。
8 紫外分光光度法
根据维生素C在稀硫酸溶液中,在特定波长处有最大吸收的特性可选择紫外分光光度法测定维生素C含量。吕长淮[6]在波长为245nm下采用该法对维生素C片含量进行测定,方法操作简便,快捷,精密度高。郑京平[7]根据维生素C具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性,于波长243nm处测定样品溶液与碱处理样品两者吸光度之差,通过查校准曲线,即可计算样品中维生素C的含量采用该法对维生素C含量进行测定,此法操作简单,快速准确重现性好,结果令人满意,适合含深色样品的测定。
9.电流滴定法
电流滴定法是以冰醋酸与碘化钾的混合液作为电解液,可以以以更加灵敏的电流滴定法测定维生素C注射液中的维生素C的含量,并与其它方法得到的结果进行对比。
在达到终点前,电解出的I2立刻被维生素C还原为I-离子,指示电极没有电流通过。当反应达到终点时,维生素C反应完全,过量的I2形成I2/I-可逆电对,电流表指针偏转。
根据法拉第定律:
双安培法使用两个相同的极化R 电极, 外加一个小电压( 10~500mV ), 当溶液中同时存在可在电极上氧化或还原的氧化物和还原物时, 回路就会有电流流动。它特别适用于可逆或准可逆体系, 有较高的灵敏度和选择性。
平行排列的双铂丝微电极,此电极当铂丝之间的距离很小且在阴极一阳极方式工作时, 由于可逆氧化还原物质在电极间的反馈扩散作用, 可以获得比单盘微电极大几十到几百倍的稳态电流。将这种电极应用于维生素C的电流滴定分析中, 可以克服经典方法中依赖搅拌得到稳态电流的缺点。
在分析维生素C注射液含量测定时可使用该方法。本法具有设备简单、灵敏、快速等优点。
参考文献
[1]马正.VC药片中抗坏血酸含量的测定及比较[J].科技创新导报,2008(4)
[2]武文,詹秀环,宣亚文.碘量法测定蔬菜中维生素C的含量[J].a安徽农业科学,2009,37(21)
[3]李军.钼蓝比色法测定还原型维生素C[J].食品科学,2000,21
(8)
[4]肖彦春,雷恩春,关秀杰,管晓琳.测定蔬菜中还原型维生素C两种方法的比较,2011,50(5)
[5]徐岳鑫,董赛文,张雪峰.高效液相色谱法测定维C银翘片中维生素C含量[A],中国药业,2008,17(10);1006-4931
[6]刘国如,刘永锁,陈振玲,王伟,丰延宗,周毓瑾.高效液相色谱法测定维生素C注射液含量[J],中国医药导报,2011,08(27)
[7]龚时琼,赵丽华,陈芳,张峰.荧光法快速检测水果和蔬菜中的抗坏血酸[A].实验室研究与探索,2012,31(10)
[8] 吕长淮.紫外分光光光度法测定维生素C片含量[J].安徽医药,2003,7(2)
[9]郑京平.水果蔬菜中维生素C含量的测定——紫外分光光度快速测定方法探讨[A].光谱实验室,2006,23(4)