迷迭香提取物的抗肿瘤作用
提取掬与应用一
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食品科技
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迷迭香提取物的抗肿瘤作用
孙权。崔长旭．全吉淑，沈明花＋（延边大学医学部，延吉１３３０００）
摘要：目的：研究迷迭香乙醇提取物对人肺癌细胞株Ａ５４９、肝癌细胞株ＳＭＭＣ７７２１的生长抑制作
用。方法：分别用ＨＥ染色法和溴化二苯偶氮盐伽皿检测法，观察其形态学变化和对肿瘤细胞的增殖
抑制作用。结果：显微镜下可见Ａ５４９、ＳＭＭＣ７７２１形态明显改变，２００ｍｇ／ｍＬ迷迭香提取物作用４８ｈ时，其抑制率分另１１为（９３．０６士１．５６）％、（８４．３９±１．９６）％。结论：迷迭香提取物对Ａ５４９、ＳＭＭＣ７７２１细胞均有抑制作用．且呈量效关系。关键词：迷迭香；抗肿瘤；抑制
中图分类号：＂ＩＳ２０１．３
文献标志码：Ａ
文章编号：１００５—９９８９（２００８）０４—０１５６—０２
ＡｎｔｉｔｕｍｏｒｅｆｆｉｃａｃｙｏｆｅｘｔｒａｃｔｏｆＲｏｓｍａｒｉｎｕｓｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ
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Ｑｕａｎ，ＣＵｌＣｈａ，１９－ｘｕ，ＱＵＡＮ
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１
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Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ
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ｈｕｍａｎｌｕｎｇ
ａｎｄｈｅｐａｔｏｍａＳＭＭＣ７７２１．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｗｉｔｈＨＥｓｔａｉｎｉｎｇ，ｔｈｅ
ｃｅｌｌ
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ｏｆ
ａｎｄＳＭＭＣ７７２１ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｃｈａｎｇｅｄｕｎｄｅｒｌｉｇｈｔｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ，Ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｒａｔｅｉｓ（９３．０６±１．５６）％
ｆｏｒＡ５４９
ａｎｄ（８４．３９±１．９６）％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ
ｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ
ｅｘｔｒａｃｔ
ａｎｄＳＭＭＣ７７２１ａｔ４８ｈａｔｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ２００ｍｇ／ｍＬ．Ｃｏｎ－
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ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓＬ．ｈａｄｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＡ５４９ａｎｄ
ＳＭＭＣ７７，２１．ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｗａｓｄｏｓｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｒｏｓｍａｒｉｎｕｓｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ；ａｎｔｉｔｕｍｏｒｅｆｆｉｃａｃｙ；ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔ
迷迭香Ｒｏｓｍａｒｉｎｕｓ
ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ
Ｌ．１系唇形科迷迭延边大学病理教研室。以上细胞株均用含１０％胎牛血清的ＲＰＭＩ一１６４０培养基培养。
１．２提取物的制备
香属多年生常绿灌木植物，原产地中海国家，我国在晋朝前已引种。因其具有较强的抗氧化、抗微生
物、保肝降酶和抗抑郁㈣等功效，且安全无毒，所
以，广泛应用于食品、化妆品及医药等方面。此外，迷迭香还具有抗肿瘤作用ｆ５－．６１，但相关的报道较少。本实验选择人肺癌细胞株（Ａ５４９）和肝癌细胞株ｆＳＭＭＣ７７２１）为实验细胞株，研究迷迭香提取物对肿瘤细胞的体外抗增殖作用和剂量效应关系，为迷迭香的综合利用提供实验依据。１材料与方法
１．１
迷迭香购与韩国相洙香草企业。称取１０ｇ粉碎后的迷迭香，加入８０％乙醇溶液５０ｍＬ，浸泡７２ｈ后将上清液过滤，残渣重复以上操作１次。合并两次所得萃取液，旋转蒸发除去乙醇，将浓缩液冷冻干燥制得迷迭香乙醇提取物样品。
１．３仪器及试剂
倒置显微镜，酶标仪。
ＲＰＭＩ
１６４０培养基、胎牛血清、胰酶、二苯基四
氮唑嗅盐（Ｍ皿、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）：华美生物工程
公司。
１．４方法
细胞系
人肺癌细胞株（Ａ５４９）；｝【Ｉ肝癌细胞株（ＳＭＭＣ７７２１）：
收稿目期：２００７一１０—１７
・通讯作者
作者简介：孙权（１９５９＿＿），男，实验师，研究方向为中草药中生理活性物质的分析。
万方数据
ｆ～一
食品科技
。
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ＴＥＧＨＮＯＬ０６Ｙ声
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１．４．１细胞增殖抑制实验（Ｍ＇ｒｒ法１取对数增殖期细胞接种于９６孔培养板，细胞数为２ｘ１０ｓ，置于３７℃、５％ＣＯ：培养箱孵育１２ｈ，待细胞贴壁后加终浓度为
５０、１００、２００
ｍｇＣｍＬ的迷迭香提取物，同时设阴性
对照组和空白对照组，每组设６个平行孔，分别培养
２４、４８、７２
ｈ。除去上清液，加人预先配制的ＭＴＹ
液５０斗Ｌ＇３７℃继续孵育４ｈ。倾净微孔中所有液
体，每孔加入１５０此ＤＭＳＯ，振荡５ｒａｉｎ后，在波长
４９０
ｎｌｎ处测定各孔光吸收值（Ａ），按下列公式计算细胞增殖抑制率：
细胞增殖抑制率（％）＝［１一（实验组Ａ值一空白对照组Ａ值）／（阴性对照组Ａ值一空白对照组Ａ值１］ｘ１００１．４．２苏木精一伊红（ＨＥ）染色光学显微镜观察细胞形态对数生长期的Ａ５４９、ＳＭＭＣ７７２１细胞１ｘ１０４接种于置有盖玻片的６孔培养板内，待细胞贴壁后加入终浓度为５０、１００、２００ｍｇ／ｍＬ的迷迭香提取物，作用４８ｈ后取出盖玻片，多聚甲醛固定，常规ＨＥ染色，光镜观察细胞形态学改变。
２结果
２．１ＭｒＩ－ｒ检测结果
２．１．１
ＳＭＭＣ７７２１细胞的增殖抑制作用
表１迷迭香提取物对ＳＭＭＣ７７２１细胞的增殖抑制作用浓／Ｊｔ．／（ｍｇ／ｍＬ）
不同时间抑制率／％
２４ｈ
４８ｈ
７２ｈ
表ｌ结果可见，迷迭香提取物在浓度逐渐加大的情况下，对ＳＭＭＣ７７２１细胞的增殖抑制作用越明显，具有剂量依赖性的量一效关系。时一效关系中随着药物作用时间延长，药效越强，７２ｈ药效高于４８ｈ和
２４
ｈ，具有时间依赖性。
２．１．２
Ａ５４９细胞的增殖抑制作用
蒌
蠢
霎
羹
浓度／（ｍｇ／ｍＬ）
图１迷迭香提取物对Ａ５４９细胞的增殖抑制作用
如图ｌ所示，随浓度的上升，其抑制率上升，呈剂量依赖关系。相同浓度水平下迷迭香提取物在
７２
ｈ时对Ａ５４９细胞的抑制作用最强，其次时４８
ｈ，
万
方数据■提取掬与应用
也呈时间依赖性。
２．２癌细胞形态学观察
Ａ．对照组
Ｂ．用药￥ｇ（１００ｍｇ／ｍＬ）
图２迷迭香提取物作用ＳＭＭＣ７７２１细胞４８ｈ后
ＨＥ染色光镜观察（×１００）
Ａ．对照组
Ｂ．用毵［ｑ（１００
ｍ９４ｍＬ）
图３迷迭香提取物作用Ａ５４９细胞４８ｈ后
ＨＥ染色光镜观察（ｘ１００）
图２、图３所示，迷迭香提取物处理ＳＭＭＣ７７２１、Ａ５４９细胞４８ｈ时，细胞数量明显减少，间距大，细胞变小，边界模糊不清，失去原有形态，呈圆形；细胞核固缩，染色变深。而对照组细胞呈梭形或多角形，细胞生长密度均匀而大，胞质饱满，生长舒展；细胞核完整，核仁清晰完整，染色均匀。
３讨论
从天然产物中寻找抗癌化合物的研究是目前肿瘤药物研究与开发的热点。我们应用ＭＴＴ法观察了
迷迭香醇提物对两种不同人体组织来源的肿瘤细胞株的体外生长抑制作用。结果显示，迷迭香提取物ｆ１００
ｍｇ／ｍＬ）处理ＳＭＭＣ７７２１、Ａ５４９细胞４８ｈ时，其抑制率均超过７０％，且呈一定的剂量时效依赖性。
在国外，有文献报道，源于植物迷迭香的鼠尾草酸、鼠尾草酚、迷迭香酚、迷迭香酸和熊果酸等均有一定的抗癌活性１７．．０１。ＣｈｅｕｎｇＳ等人【５暇道，迷迭香醇提物对人白血病细胞和乳腺癌细胞均有抑制作用。在国内，曹树稳等人发现，源于植物迷迭香的诸多成分对肠癌细胞系Ｃａｃｏ一２和ＨＣＴ一１５有增殖抑制作用。本实验进一步证实了迷迭香的抗肿瘤活性，且显示出其抗肿瘤作用的广谱性。对于迷迭香的抗肿瘤机制及有效成分的分析有待进一步研究。
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提取掬与应用－
ｔ●ｒ—，∞￥ＣＩＥ
绞股蓝中总皂苷的提取及
含量研究‘
沈宏伟・．肖彦春ｚ，车仁国・，陈金子－，金凤燮１，鱼红闪・’
ｆ１：大连工业大学生物与食品工程学院，大连１１６０３４；
２．辽宁农业职业技术学院农产品质量检测中心，营口１１５００９）
摘要：主要对ＨＰ２０大孔吸附树脂提取纯化绞股蓝总皂苷以及江苏产的甜味绞股蓝和苦味绞股蓝中总皂苷的含量进行了研究。结果表明：ＨＰ２０大孔吸附树脂吸附量大，可达３７．４７ｍｇ／ｍＬ，再生容易，提取纯化后的总皂苷纯度可达８０％ＦＸ上。苦味绞股蓝皂苷粗品和甜味绞股蓝皂苷粗品经ＨＰ２０大孔吸附树脂提取纯化后，分别得到绞股蓝总皂苷５．０９ｇ和２．９８ｇ，纯度为８８．６４％和８４．２８％。关键词：绞股蓝；大孔吸附树脂；皂苷
中图分类号：ＴＳ２０１
文献标志码：Ａ
文章编号：１００５—９９８９（２００８）０４—０１５８—０３
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｃｏｎｔｅｎｔｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｔｏｔａｌｇｙｐｅｎｏｓｉｄｅｓｉｎ
Ｇｙｎｏｓｔｅｍｍａｐｅｎｔａｐｈｙｌｌｕｍ
ＳＨＥＮＨｏｎｇ－ｗｅｉｌ，ＸＩＡＯ
Ｙａｎ－ｃｈｕｎ２，ＣＨＥＲｅｎ－ｇｕｏａ，ＣｈｅｎｊｉＩ卜ｚｉｌ，ＪＩＮＦｅｎｇ－ｘｉｅｌ，ＹＵＨｏｎｇ－ｓｈａｎｌ‘
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ＱｕａｎｔｉｔｙＡｎａｌｙｓｉｓＣｅｎｔｅｒ，
ＬｉａｏｎｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＶｏｃａｔｉｏｎ—ｔｅｃｈｎｊｃａＩＣｏｌｌｅｇｅ，Ｙｉｎｇｋｏｕ１１５００９）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｔｏｔａｌｇｙｐｅｎｏｓｉｄｅｓｆｒｏｍＧｙｎｏｓｔｅｍｍａｐｅｎｔａｐｈｙｌｌｕｍｗｉｔｈＨＰ２０
收稿日期：
２００７—０９—１７
・通讯作者
基金项目：国家自然科学基金项目（２０４７６０１７）；辽宁省高等学校优秀人员支持计划项目（ＲＣ－－０４－０５）；辽宁省自然科学基金项目（２００４２１３２）。作者简介：沈宏伟（１９７６＿＿），男，吉林辽源人，硕士研究生，研究方向为天然产物中活性物质的研究及开发。
损伤的保护作用．中草药，２００１，３２（５）：４３４－－４３６【４】ＴａｋｅｄａＨ，Ｔｓｕｊｉ
ｒｏｓｍａｒｉｎｉｅａｃｉｄ
ａｓ
【７】ＳｉｎｇｌｅｔａｒｙＫＷ，ＭａｃＤｏｎａｌｄｃ，Ｗａｌｌｉｇ地Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｂｙ
ｏｆ
ｍａｒｙａｎｄｃａｒｎｏｓｏｌｏｆ
ｒｏｓｅ—
Ｍ，ＭａｔｓｕｍｉｙａＴ，ｅｔａ１．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ
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ｖａｒ．ａｃｕｔａ
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Ｋｕｄｏ（Ｐｅｒｉｌｌａｃ
ＤＭＢＡ—ＤＮＡａｄｄｕｅｔ４３—４８
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Ｊ．Ａｎｔｉ—ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅａｎｄａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｐｍ—
Ｒｏｓｍａｒｉｎｕｓ
ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ．Ｏｎｃｏｌｏｇｙ
ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓｂｙｒｏｓｅｍａｒｙ
ａｎｄｉｔｓｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｃａｍｏｓｏｌ
ｒｏｓｅｍａｒｙ
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ＳｔｅｉｎｅｒＭ，Ｐｒｉｅｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
ａｎｄ
Ｉ，Ｇｉａｔ
【９】ＳｉｎｇｌｅｔａｒｙＫＷ，ＮｅｌｓｈｏｐｐｅｎＪＭ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ
ｔｈｙｌｂｅｎｚ［ａ］ａｎｔｈｒａｃｅｎｅ∞ＭＢＡ）－－ｉｎｄｕｃｅｄ
ｏｆ７，１２—ｄｉｍｅ—
ｔｎｍｏ—
Ｊ，ｅｔａ１．Ｃａｒｎｏｓｉｃａｃｉｄｉｎｈｉｂｉｔｓ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｏｆ
ｈｕｍａｎ
ｍａｍｍａｒｙ
ａｕｇｍｅｎｔｓ
ｒｉｇｅｎｅｓｉｓａｎｄｏｆｉｎｖｉｖｏｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆｍａｎｍｌｍＴＤＭＢＡ—ＤＮＡａｄｄｕｅｔｓｂｙｒｏｓｅｍａｒｙｅｘｔｒａｃｔ．Ｃａｎｃｅｒｌｅｔｔｅｒｓ，１９９１，６０
ｌｅｕｋｅｍｉｃｃｅｌｌｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄ．Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｎｄ
１．２５一ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｖｉｔａｍｉｎＤ３ａｎｄ
ｃａｎｃｅｒ，２００１，４１（１—２）：１３５—１４４
（２）：１６９—１７５
万方数据
迷迭香提取物的抗肿瘤作用
作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：
孙权， 崔长旭， 全吉淑， 沈明花， SUN Quan， CUI Chang-xu， QUAN Ji-shu， SHENMing-hua
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