实验 Hanus法测定不饱和脂肪酸的碘价
Hanus法测定不饱和脂肪酸的碘价
一、实验目的
学习用Hanus法测定不饱和脂肪酸的碘价。
二、实验原理
在适当条件下，不饱和脂肪酸的不饱和键能与碘、溴或氯起加成反应。脂肪分子中如含有不饱和脂酰基，即能吸收碘。100g脂肪所吸收碘的有数称为碘价。碘价的高低表示脂肪不饱和度的大小。
由于碘与脂肪的加成作用很慢，故于Hanus试剂中加入适量溴，使产生溴化碘，再与脂肪作用。过量的溴化碘与脂肪作用后，测定溴化碘剩余量即可求得脂肪之碘价，本法的反应如下：
I2+Br2−−→2IBr(Hanus试剂)
IBr+-CH=CH-−−→-CHI-CHBr-
KI+CH3COOH−−→HI+CH3COOK
HI+IBr−−→HBr+I2
I2+2Na2S2O3−−→2NaI+Na2S4O6
三、实验用品
(一)器材
(1)碘价滴定瓶(250～300mL)，或用具塞锥形瓶代替。
(2)量筒(10mL，50mL)。
(3)样品管。
(二)试剂
(1)Hanus溶液：取13.2gI，置于1 500mL锥形瓶内，徐徐加入1 000mL冰醋酸(AR，不应含有还原物质)，边加边摇，同时略加温热，使碘溶解。冷却后．加溴约3mL。
(2)0.2mol／L标准硫代硫酸钠(Na2S2O3∙5H2O分子量248.17)溶液。
(3)纯四氯化碳。
(4)1％淀粉溶液(溶于饱和氢化钠溶液中)。
(5)10％KI水溶液。
(三)材料
花生油或猪油。
四、实验程序
准确称取0.3～0.4g花生油或0.5g猪油2份，放入两个干燥的碘价测定瓶内，切勿使油粘在瓶颈或壁上，各加四氯化碳10mL，轻轻摇动，使油全部溶解。用滴定管仔细地向每个碘价测定瓶内加入Hanus溶液25mL，勿使溶液接触瓶颈，塞好玻璃塞，在玻璃塞与瓶口之间加数滴10％碘化钾溶液封闭缝隙，以防止碘升华溢出造成测定误差，然后在20～30℃暗处放置30min。放置期间应不时摇动。卤素的加成反应是可逆反应，只有在卤素绝对过量时，该反应才能进行完全，所以，油吸收的碘量不应超过Hanus溶液所含碘量的一半，若瓶内混合液的颜色很浅，表示油量过多，应再称取较少量的油重作。
放置30min后，立刻小心打开玻璃塞，使塞边KI溶液流入瓶内，切勿丢失，用新配制的10％KI 10mL和蒸馏水50mL把玻璃和瓶颈上的液体冲入瓶内，混匀。用0.1mol／L硫代硫酸钠溶液迅速滴定至瓶内溶液呈浅黄色。加入1％淀粉溶液约1mL，继续滴定。将近终点时，用力振荡。使碘由四氯化碳全部进入水溶液内。再滴至蓝色消失为止，即为滴定终点。
另作两份空白对照，除不加样外，其余操作同上。滴定后，将废液倒入废液瓶，以便收回四氯化碳。
四、实验内容和步骤
准确称取0.3～0.4g花生油或0.5g猪油2份，放入两个干燥的碘价测定瓶内，切勿使油粘在瓶颈或壁上，各加四氯化碳10mL，轻轻摇动，使油全部溶解。用滴定管仔细地向每个碘价测定瓶内加入Hanus溶液25mL，勿使溶液接触瓶颈，塞好玻璃塞，在玻璃塞与瓶口之间加数滴10％碘化钾溶液封闭缝隙，以防止碘升华溢出造成测定误差，然后在20～30℃暗处放置30min。放置期间应不时摇动。卤素的加成反应是可逆反应，只有在卤素绝对过量时，该反应才能进行完全，所以，油吸收的碘量不应超过Hanus溶液所含碘量的一半，若瓶内混合液的颜色很浅，表示油量过多，应再称取较少量的油重作。
放置30min后，立刻小心打开玻璃塞，使塞边KI溶液流入瓶内，切勿丢失，用新配制的10％KI 10mL和蒸馏水50mL把玻璃和瓶颈上的液体冲入瓶内，混匀。用0.1mol／L硫代硫酸钠溶液迅速滴定至瓶内溶液呈浅黄色。加入1％淀粉溶液约1mL，继续滴定。将近终点时，用力振荡。使碘由四氯化碳全部进入水溶液内。再滴至蓝色消失为止，即为滴定终点。
另作两份空白对照，除不加样外，其余操作同上。滴定后，将废液倒入废液瓶，以便收回四氯化碳。
五、数据处理与分析
碘价表示：100g脂肪所能吸收的碘的g数，可按下式计算： 碘价=(A-B)T⨯100
C
式中：
A为空白滴定用去的硫代硫酸钠溶液的平均mL数。
B为样品滴定用去的硫代硫酸钠溶液的平均mL数。
C为样品重量(g)
T为与1 mg 0.2mol／L硫代硫酸钠溶液相当的碘的g数。在本实验中 T=0.1⨯126.9=0.00129g/ml1000
六、实验注意事项
1．用力振荡是本滴定成败的关键之一，否则容易滴定过头或不足。如果振荡不够，四氯化碳层呈现紫色或红色，此时要继续用力振荡使碘全部进入水层。
2. 滴定完毕放置一些时间后，滴定液应返回蓝色，否则就表示滴定过量。
七、思考题
本实验堆滴定终点的判断应注意什么？怎样操作才可是实验数据可靠？
八、参考书目
林家涵 魏文铃 彭宣宪 主编. 现代生物学实验（下册）. 北京：高等教育出版社&施普林格出版社，2000