生物科学毕业论文

学号：071140231

湖北民族学院本科毕业论文

超声辅助提取桑枝总黄酮工艺研究

院 系： 生物科学与技术学院

专 业： 生物工程

姓 名： 吴浩杰

指导教师： 姜 宁

中国·恩施

二〇一五年五月

Std.ID: 071140231

BACHELOR’S THESIS OF HUBEI UNIVERSITY FOR NATIONALITIES

Ultrasonic-assisted extraction of Flavonoids from Ramulus Mori

Department：

Major：

Name：

Guiding

Teacher：

Biology Department Biological Engineering Haojie Wu Ning Jiang

Enshi·China

2015.5

本人郑重声明所呈交的学位论文《超声辅助提取桑枝总黄酮工艺研究》是我在导师 姜宁 的指导下独立进行研究工作所取得的研究成果。除文中已经注明引用的内容外，论文中不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖北民族学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确的方式进行了说明。本声明的法律结果由本人独自承担。

作者签名：

年 月 日

超声辅助提取桑枝总黄酮工艺研究

吴浩杰

（湖北民族学院生物科学与技术学院，湖北恩施，445000）

摘要

目的：研究超声波提取桑枝中黄酮类化合物的工艺，并确定最佳提取条件。方法：用单因素试验探究不同乙醇浓度、料液比、超声功率及超声时间对总黄酮提取率的影响。然后用正交试验确定最佳提取工艺并用3次重复对优化的工艺进行验证。结果：超声提取桑枝总黄酮在室温下的最佳工艺为：乙醇浓度70%，料液比为1:30 （g/ mL），超声功率250 W，超声时间8 min。在此条件下超声辅助提取桑枝总黄酮的得率达1.24%。各因素主次关系为：料液比 > 超声时间 > 乙醇浓度 > 超声功率。结论：该研究优化的工艺稳定可靠，为工业化生产桑枝总黄酮打下基础。 关键词：超声波；桑枝；黄酮

from Ramulus Mori

Haojie Wu

College of Biological Scientific and technical,Hubei University for Nationalties,

Hubei Enshi, 445000

Abstract

To research the process of total flavonoids extraction from Ramulus Mori by ultrasonication extraction and determine the optimum extraction conditions, Complete randomalized design was implemented to investigate the effects on the extraction rate of the Flavonoids in Ramulus Mori which produced by ethanol concentration, solid-liquid ratio, ultrasonic working time, ultrasonic power,respectively and orthogonal experimental design was used to optimize the process.The results showed that the optimal experiment conditions was that the concentration of ethanol is 70%,the solid-liquid ratio is 1:30 (g/mL),ultrasonic working time is 8 min, ultrasonic power is 250 W.

Keywords: Ultrasonic; Ramulus Mori; Flavonoids

目录

摘要 ....................................................... 3 目录 .................................................................................................................................. 6

1 前言 .............................................................................................................................. 8

1.1 桑枝介绍 ........................................................................................................... 8

1.1.1 概述 ....................................................................................................... 8

1.1.2 桑枝的药理作用 ................................................................................... 8

1.2 黄酮类化合物介绍 ........................................................................................... 9

1.2.1 概述 ....................................................................................................... 9

1.2.2 定义 ....................................................................................................... 9

1.2.3 分类 ....................................................................................................... 9

1.2.4 理化性质 ............................................................................................... 9

1.2.5 药理作用 ............................................................................................. 10

1.2.6 黄酮类化合物的应用 ......................................................................... 10

1.3 黄酮类化合物提取原理和方法 ..................................................................... 10

1.3.1 碱提取酸沉淀法 ................................................................................. 11

1.3.2 溶剂萃取法 ......................................................................................... 11

1.3.3 酶解法 ................................................................................................. 11

1.3.4 超声波提取法 ..................................................................................... 11

1.3.5 微波萃取法 ........................................................ 错误！未定义书签。

1.4 立题依据和研究意义 ..................................................................................... 11

2 实验材料与方法 .................................................................................................... 12

2.1.1 实验材料 ............................................................................................. 12

2.1.2 材料 ..................................................................................................... 12

2.1.3 实验试剂 ............................................................................................. 12

2.1.4 常用溶液配制 ..................................................................................... 12

2.1.5 实验设备 ............................................................................................. 12

2.2 实验方法 ......................................................................................................... 12

2.2.1 芦丁标准曲线制作 ............................................................................. 13

2.2.2 提取液总黄酮含量的测定及提取率的计算 ..................................... 13

2.2.3 单因素试验 ......................................................................................... 14

2.2.4 正交试验 ............................................................................................. 14

2.2.5 优化工艺的验证 ................................................................................. 14

2.2.6 数据处理 ............................................................................................. 15

3 结果 ........................................................................................................................... 15

3.1 芦丁标准曲线 ................................................................................................. 15

3.2 单因素试验结果 ............................................................................................. 16

3.2.1 乙醇浓度对桑枝总黄酮提取率的影响 ............................................. 16

3.2.2 料液比对桑枝总黄酮提取率的影响 ................................................. 16

3.2.3 超声功率对桑枝总黄酮提取率的影响 ............................................. 17

3.2.4 超声时间对桑枝总黄酮提取率的影响 ............................................. 18

3.3 正交试验结果 ................................................................................................. 18

3.4 验证实验结果 ................................................................................................. 19

4 讨论 ............................................................................................................................ 20

5 结论 ............................................................................................................................ 20 参考文献 ...................................................................................................................... 21 致谢 ................................................................................................................................ 23

1 前言

1.1 桑枝介绍

1.1.1 概述

桑枝（Ramulus Mori）是桑树Morus alba L.的嫩枝，采收于夏初春末。中药桑枝有祛风通络功效[1]。桑树为桑科落叶乔木，原产于我过中北部，在亚洲、欧洲和南美洲也有广泛分布。我国大部分地区均产，主产于江苏、浙江、安徽、湖南、河北、四川等地。桑枝可分为木质部、韧皮部和髓芯，各占72%、27%和1%，木质部含木质素较多而韧皮部含更多果胶[2]。桑枝中含有多种化学成分，包括黄酮、生物碱、酚性物质、糖类和植物甾醇等。

1.1.2 桑枝的药理作用

（1）降血糖作用

桑枝降血糖作用早在《本草图经》中便有记载。周林[3]论文中提到桑枝提取物能显著降低小鼠血糖水平。

（2）降血脂作用

血清中TG、TC和LCL-C水平过高是高血脂主要症状，可能造成动脉粥样硬化。有研究[4]表明桑枝提取物能显著降低TG、TC及LDL-C的水平。桑枝的降血脂作用良好，一定程度上对动脉粥样硬化起到了预防作用。

（3）抗炎镇痛作用

由损伤因子引起的组织防御反应即为炎症，其病理表现明显。陈福军[5]等发现桑枝能抑制小鼠腹腔液渗出，表现较强的抗炎效果；王国建[6]在临床实践上用白芥子配合桑枝，对肩周炎有较好的疗效。

（4）提高机体免疫力

免疫力是人体抵抗各种疾病的能力，免疫力下降或免疫功能失调可导致败血症、中耳炎、皮肤感染等各种疾病。有研究[7]报道，桑枝能增强小鼠网状内皮细胞吞噬功能，提高小鼠吞噬指数和迟发型变态反应能力。对小鼠机体免疫力有一定的增强作用。

此外，桑枝还具有降压、抗癌、抗病毒、治疗冠心病等作用。

1.2 黄酮类化合物介绍

1.2.1 概述

黄酮类化合物（flavonoids）几乎在所有植物中都含有，常以游离态或糖苷形式存在，对植物的生长、发育开花、结果以及抵御异物侵入有着重要作用。由于其分布广、含量高、易于获得，所以成为人类较早发现的一类天然产物。据估计，约2%被植物光合作用固定的碳转变为黄酮类化合物或与之紧密相关的化合物。黄酮类化合物实际在植物的所有部位都存在，以花、果实和叶中较多；且大多存在于有色植物中，如松树、绿茶、银杏、红花等[8]。

1.2.2 定义

黄酮类化合物泛指由中央三碳将2个苯环联结起来的一系列化合物（C6-C3-C6）基本结构如图1.1所示。因这类化合物多呈黄色或淡黄色而称黄酮。

图1.1 黄酮类化合物的基本化学结构

Fig1.1 Chemical constitution of caulis clematidis armandi

1.2.3 分类

黄酮类化合物根据不同的三碳链氧化程度以及B环取代位置等特点,可被分为黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类等类型。

1.2.4 理化性质

黄酮类化合物多为固态结晶，部分呈无定型粉末，多数呈黄色或淡黄色，可以测定熔点。其溶解度受结构和存在状态的影响，存在很大差别，一般有以下规律：游离苷元易溶于稀碱和乙醇、乙醚、乙酸乙酯等有机溶剂，难溶或不溶于水；水、甲醇、乙醇等强极性的溶剂易于溶解黄酮苷类化合物，而苯、氯仿、石醚等有机溶剂难溶解之。此外，在一定条件下黄酮类化合物还能与部分试剂发生独特

的显色反应。在早期，化学显色反应常在研究工作中被用来判断黄酮类化合物是

否存在以及以何种类型存在。

1.2.5 药理作用

（1）抗氧化与清除自由基作用

自由基在人体正常代谢过程中产生，其性质活泼，氧化能力强，对人体健康有极大的潜在危害。张琳等[9]发现多数黄酮中的部分双键、羰基及羟基能清除自由基和抗氧化。

（2）抗肿瘤和抗癌作用

黄酮类化合物的抗癌作用主要与其雌激素样作用、抑制酶的活性、诱导细胞凋亡等作用有关。程海林等[10]研究表明，黄酮可预防和治疗乳腺癌、皮肤癌等。

（3）抗菌、抗病毒作用

黄酮类化合物有很强的抗菌作用。甘草黄酮类化合物对很多细菌均有抑制作用。王志杰等[11]研究结果显示黄酮具有较好的抗病毒作用。芦丁黄酮类化合物能抗流感病毒、脊髓灰质炎病毒感染[12]。

（4）抗炎免疫作用

黄酮类化合物主要通过影响细胞的有丝分裂和细胞间的相互作用来实现抗炎免疫作用。王晓梅等[13]研究表明，黄酮类化合物可以抑制 NO、丙二醛和PGE2等的合成。同时他们还发现，黄酮对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀有抑制作用，对大鼠腹腔巨噬细胞 IL-1的生成有抑制作用。

（5）保护心脑血管作用

黄酮能修复血管内皮细胞的损伤，能溶解血栓，也能促进脑组织纤溶系统改善功能，黄酮类化合物有协同保护脑组织的作用。曹珊等[14]研究表明黄酮对脑缺血炎症及内皮血管损伤有很好的疗效。

1.2.6 黄酮类化合物的应用

黄酮类化合物中既有水溶性的又有脂溶性的，溶解特性很宽。可按需要选择合适的黄酮类化合物作着色剂[15]。黄酮类化合物中的二氢黄酮类化合物在适当条件下转化成显甜味的二氢查尔酮糖苷,被用作天然甜味剂。此外，工业染料和抗氧化剂也曾使用过黄酮类化合物。

1.3 黄酮类化合物提取原理和方法

随着近十几年黄酮类化合物药用价值的不断提升，它的提取显得尤为重要。

下面简单介绍一下目前报道的黄酮类化合物的提取方法与原理。 1.3.1 碱提取酸沉淀法

由于黄酮类化合物大多具有酚羟基，具有酸性，易溶于碱水中。用碱性水溶液或稀醇提取，提取液经酸化后可析出黄酮类化合物沉淀[9]。 1.3.2 溶剂萃取法

在仅限于提取黄酮苷类化合物时，可用热水进行提取。例如，自槐花米中提取芦丁。由于多糖黄酮苷有较大极性，沸水可直接用来提取它，但是由于热水浸提时会产生较多易溶于水的杂质 ，提取效率低下，以及较为复杂的后续处理，使其不常使用。而极性较小的游离黄酮苷元可用甲醇：水（1:1）连续萃取[9]。 1.3.3 酶解法

当一些原料的细胞壁包围着黄酮类物质，使其不易被提取时，可以采用酶法提取。如山楂，由于黄酮类物质被细胞壁所包围, 且胞壁间有果胶粘结 , 用酶提比一般方法提取率要高[16]。破坏果胶、纤维素等连接细胞壁的物质成小分子，使黄酮类物质得到充分释放是酶法提取的基本原理。 1.3.4 超声波提取法

用超声波法提取黄酮类物质，是目前比较新的方法 。它的原理是借助超声波产生高强度的振动、极大的加速度、剧烈的空化作用以及搅拌作用破坏细胞膜，促使细胞释放与溶出黄酮类化合物。提取液在超声波作用下不断震荡，有利于溶质扩散。超声波的热效应，使水温在57℃左右,让原料在水中溶解度有所增加[16]。超声提取对被提取物的结构、活性没有影响[17]。因此，超声波法极大缩短了提取时间，提高了有效成分的提取率和原料的利用率，并且避免了高温对提取成分的影响，是一种快速、高效、节能的新型提取工艺。

1.4 立题依据和研究意义

目前，国内外少有对桑枝的研究报道，对桑枝总黄酮提取工艺的研究更少，大量桑枝以废弃物处理，造成了资源的极大浪费。为减缓这一现象，本文采用超声波辅助提取法研究了提取桑枝总黄酮的工艺条件，得到了一些可供参考的实验数据，可以为更好地开发和利用桑枝中黄酮类化合物提供一定理论依据。

2 实验材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1 材料

桑枝购自来凤县地产中药材综合开发有限责任公司，烘干至恒重后磨粉，过60

目筛，置于阴凉处备用。 2.1.2 试剂 试剂

无水乙醇（AR） 芦丁标准品（AR） 亚硝酸钠（AR） 硝酸铝（AR） 氢氧化钠（AR） 蒸馏水 2.1.3 设备

实验设备

GZX-9140 数显鼓风干燥箱 RT-02A粉碎机 FA1004B电子天平 JY96-Ⅱ超声波细胞粉碎机 ITDL80-2B台式离心机 TU-1810紫外分光光度计 2.1.4 常用溶液配制

30%乙醇溶液 准确量取16 mL 95％乙醇于50 mL容量瓶中，蒸馏水定容至刻度

线，贴上标签。备用。

同样的方法配制40%、50%、60%、70%、80%、90%乙醇溶液，贴上标签。 5%亚硝酸钠溶液 准确称取亚硝酸钠5 g放置于洗净烘干的烧杯中溶解，移至100

厂家

天津市光复科技发展有限公司 国药集团

天津市光复科技发展有限公司 天津市福晨化学试剂厂 天津市光复科技发展有限公司 实验室自制

生产厂家

上海博讯实业有限公司 弘荃机械企业有限公司 上海精密科学仪器公司

宁波新芒生物科技股份有限公司 上海安亭科学仪器制造厂 北京普析通用仪器有限责任公司

mL容量瓶中，移至100 mL容量瓶中定容，贴上标签。备用。

10%硝酸铝溶液 准确称取10 g硝酸铝放置于烧杯中溶解，移至100 mL容量瓶中

定容，贴上标签。备用。

1 mol/L氢氧化钠溶液 准确称取氢氧化钠4 g于烧杯中，用冷却后的沸水溶解，

转移至100 mL容量瓶中，定容至刻度线，贴上标签。现配现用。

2.2 实验方法

2.2.1 芦丁标准曲线制作

称取0.038 g芦丁标准品溶于30%乙醇溶液中，定容至250 mL，制得初始浓度为0.152 mg/mL的芦丁标准溶液。取50 mL容量瓶6只，编号0、1、2、3、4、5。分别准确吸取芦丁标准溶液2.0、4.0、8.0、12.0、16.0 mL于1~5号容量瓶中，各加30%乙醇至25 mL（0号容量瓶中加入25 mL 30%乙醇作对照）。向各容量瓶中加入1.4 mL亚硝酸钠溶液（浓度为5%），摇晃均匀后静置6 min；再各加硝酸铝溶液（浓度为5%）1.4 mL，摇晃均匀后静置6 min。然后加入5 mL浓度为1 mol/L的NaOH溶液，用30%乙醇稀释，定容至50 mL，静置15~20 min，用0号瓶中溶液调零，在510 nm条件下分别测定1~5号瓶中溶液吸光值（OD）。以吸光度为纵坐标，芦丁浓度（mg/mL）为横坐标，绘制芦丁标准曲线。 2.2.2 提取液总黄酮含量的测定及提取率的计算

准确吸取4 mL提取液于25 mL容量瓶中，按2.2.1中方法测定其吸光度。提取率计算公式如下：

CV1V

100% 桑枝总黄酮提取率（%）=

V0W1000

式中：C为提取液吸光度对应的总黄酮浓度，mg/mL；

V1为样品定容后的体积，mL； V为提取液总体积，mL；

V0为测定吸光度所用样品液体积，mL； W为称取桑枝粉末质量，g。

2.2.3 单因素试验

（1）乙醇浓度对桑枝总黄酮提取效果的影响

称取7份桑枝粉末，每份0.5 g，分别放在编好号的烧杯中，按料液比1:30 g/mL分别加入30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%乙醇溶液，放入超声波细胞粉碎机中处理4 min，超声功率200 W。提取液在3000 r/min条件下离心30 min。取上清测定提取液中总黄酮浓度，并计算提取率，以考察桑枝总黄酮提取率受乙醇浓度的影响程度。每个水平重复3次。

（2）料液比对桑枝总黄酮提取效果的影响

共称取0.5 g桑枝粉末6份，分别放在编好号的烧杯中，分别按料液比1:10、1:20、1:30、1:40、1:50、1:60（g/mL)加入 70％乙醇超声波处理4 min，超声功率200 W。提取液经3000 r/min离心30 min，取上清，检测上清液中总黄酮含量，计算提取率，以考察料液比对桑枝黄酮提取率的影响。每个水平重复3次。

（3）超声功率对桑枝总黄酮提取率的影响

称取0.5 g桑枝粉末共6份，分别放在编好号的烧杯中，按料液比1:30 （g/mL）加入70%乙醇溶液，在超声波细胞粉碎机中处理4 min，超声功率分别设为50、100、150、200、250、300 W。提取液经3000 r/min离心30 min，取上清，检测上清液中总黄酮含量，计算提取率，以考察超声功率对桑枝黄酮提取率的影响。每个水平重复3次。

（4）超声时间对桑枝总黄酮提取率的影响

称取0.5 g桑枝粉末共5份，按料液比1:30（g/mL）加入30 mL 70％的乙醇，放入超声波细胞粉碎机中，分别处理2、4、6、8、10 min，超声功率200 W。提取液3000 r/min离心30 min。取上清，测定上清中总黄酮的浓度，计算提取率，以考察超声波工作时间对桑枝黄酮提取率的影响。每个水平重复3次。 2.2.4 正交试验

根据单因素试验的结果确定四个因素的水平，制作乙醇浓度（A）、料液比（B）、超声波工作时间（C）、超声波功率（D）四个因素的L9(34)正交表（表2.1）。 2.2.5 优化工艺的验证

按照正交试验优化得到的最佳工艺提取桑枝总黄酮，计算提取率。试验重复3

次。

表2.1 正交试验因素与水平

Table 2.1 Factors and levels of orthogonal test

水平 1 2 3

A 乙醇浓度/% 79% 80% 90%

1:10 1:20 1:30

200 250 300

6 8 10

B 料液比/g/mL

C 超声功率/W

D 超声时间/min

2.2.6 数据处理

实验数据均用3组重复的平均数，用Excel软件进行统计分析。

3 结果

3.1 芦丁标准曲线

图3.1 芦丁标准曲线

Fig3.1 Standard curve of sophorin

根据芦丁的浓度与吸光值的关系，建立了如下线性回归方程（图3.1）：Y=9.8873X+0.0043，R2=0.9995。

3.2 单因素试验结果

3.2.1 乙醇浓度对桑枝总黄酮提取率的影响

图3.2 乙醇浓度对桑枝总黄酮提取率的影响

Fig3.2 Effect on the yield of total flavonoids from Ramulus mori

of ethanol concentration

由图3.2可知在，桑枝总黄酮的提取率随着乙醇浓度升高而先升后降，80%附近的乙醇浓度对桑枝总黄酮提取率影响最大。乙醇浓度达到80%时，提取率达到最高，乙醇浓度大于80%后，桑枝总黄酮提取率随着乙醇浓度的增加，开始下降。所以在正交试验时，选取乙醇浓度70%、80%和90%为后续考察指标。 3.2.2 料液比对桑枝总黄酮提取率的影响

从图3.3可以看出桑枝总黄酮提取率随着料液比的降低先升后降，当料液比为1:20 g/mL时提取率最大，且在该比值附近时料液比对提取率影响较大，故选择料液比1:10、1:20、1:30 g/mL为后续考察的指标。

图3.3 料液比对桑枝总黄酮提取率的影响

Fig3.3 Effect on the yield of total flavonoids from Ramulus mori

of solid-liquid ratio

3.2.3 超声功率对桑枝总黄酮提取率的影响

0.80.70.60.50.40.30.20.10

50

100

150200超声功率（W）

250

300

350

提取率（%)

图3.4 超声功率对黄酮提取率的影响

Fig3.4 Effect on the yield of total flavonoids from Ramulus mori

of ultrasonic power

由图3.4可知超声功率达到250 W之前，黄酮的提取率随着超声功率的增大而增大，当功率超过250 W后，桑枝总黄酮的提取率开始下降，因此正交试验选取超声功率200 W、250 W和300 W为后续考察的指标。

3.2.4 超声时间对桑枝总黄酮提取率的影响

0.90.80.70.60.50.40.30.20.10

2

4

68

超声时间（min）

10

12

提取率（%）

图3.5 不同超声时间对黄酮提取率的影响

Fig3.5 Effect on the yield of total flavonoids from Ramulus mori

of ultrasonic working time

由图3.5可知，随着超声提取时间的增加，提取率也相应的增加了，在8 min时达到最大提取率，超过8分钟时又开始下降，所以正交试验选取超声时间为6 min、8 min、10 min为后续考察的指标。

3.3 正交试验结果

正交试验结果如表3.1所示。根据极差R值，可以得知各因素对超声提取桑枝总黄酮提取率影响的主次顺序为:料液比 > 超声时间 > 乙醇浓度 > 超声波时间，即料液比是影响总黄酮提取率的最重要因素。从平均提取得率K 值来看，以提取条件A1B3C2D2为最佳提取工艺，即以70%乙醇为提取溶剂，在1:30 g/mL的料液比和 250 W的超声功率条件下提取8 min。

表3.1正交试验结果表 Table3.1 Results of orthogonal test

因素

试验号

A 乙醇浓度

K1 K2 K3 极差 主次顺序 优水平 优组合

A1 3.05 2.59 2.92 0.16

B

C

D

黄酮提取率%

料液比 超声功率 超声时间

2.76 2.53 3.27 0.25

2.81 3.09 2.66 0.14

2.61 3.13 2.82 0.17

D2

B>D>A>C B3

C2

A1B3C2D2

3.4 验证试验结果

称取桑枝粉末0.5 g，按料液比1:30（g/mL）加入70%乙醇溶液，在超声功率250W下超声提取8 min，提取液在3000 r/min下离心30 min，准确吸取4 mL上清液转移至25 mL容量瓶中，按2.1.1中的方法进行实验，重复三次，按照2.2.2方法计算黄酮的提取率。连续三次的提取率为：平均提取率为1.24%，高于正交试验中任一组合的提取率。说明该条件稳定可靠。

4 讨论

黄酮类化合物具有多种生理活性功能使其在食品、药业等领域应用非常广泛。黄酮类化合物作用主要与抗氧化有关[18]。随着黄酮类化合物研究的深入，提取黄酮的方法开始多样化。传统的方法有热水提法、碱性水或碱性稀醇提取、回流法、渗漉法等；新型提取技术有超声波提取法、微波提取法、酶解法、超临界流体萃取法等[19]。随着超声波技术的逐步研究进步，超声波协同处理黄酮的方法也会越来越多[20]。超声波提取法相对于其他方法而言,超声波法明显优于传统的提取法， 它所用的提取时间大大缩短, 产率较高,。在较低温度下, 超声可以强化水浸提效率, 达到省时、高效、节能的目的, 是提取黄酮类物质的一种高效方法[21]。但目前超声波提取技术基本还停留在实验室研究阶段，超声提取技术的工业应用还存在很多待解决的问题[22]。随着超声波技术的不断成熟，设备的不断改进，超声提取技术在医药、化工等领域的应用前景将更广阔。

5 结论

从单因素实验可知：超声辅助提取桑枝总黄酮的最优乙醇浓度是80%，最优料液比是1:20（g/mL），最优超声波功率是250 W，最优超声时间是8 min。

正交试验确定的超声辅助提取桑枝总黄酮的最佳工艺为：乙醇浓度70%，料液比1:30 （g/mL），超声功率250 W，超声时间8 min，提取率达到了1.24%。本研究为桑枝黄酮类化合物的提取利用提供了实验基础。

参

考文献

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致谢

首先要感谢我的论文指导老师姜宁老师，细心和蔼的您在我做毕业论文实验的过程中给予我很多好的建议，教给了我很多我不知道的知识，并且在您耐心地指导下让我顺利地完成了毕业实验和毕业论文的书写。感谢我能幸运地遇见您这一位像亲人一般的老师，我会记住您的谆谆教诲且好好运用你所传授的知识，谢谢您。同时感谢重点实验室以及实验室的各位管理老师、员工和同学，有你们的帮助，我才能顺利完成毕业论文实验。

感谢的是我的母校，是母校的培养才能成就现在的我，感谢我大学里所有的任课老师，因为有你们不辞辛苦地谆谆教诲，我才能在大学里提升自我，丰富自我。然后我庆幸在生物科学与技术学院遇到了周毅峰老师，一个及其负责任的班主任，一个改变我的人生轨迹的良师。周老师治学态度严谨，知识渊博；老师对工作的勤勉务实和做学问时的精益求精，这些都让我受益匪浅。老师带给我的不仅仅是专业知识的教诲，更有做学问的态度与方法，更有做人的道理。谢谢周老师对我的严格要求和不倦教诲！

不论我站在什么位置，我最需要感谢的是我的父母，是他们二十几年来的培养和教诲，帮助我树立人生观和价值观，才让我能够走到这里，让我今后走得更远！相信以后会我会给你们幸福！

我还要感谢我的朋友，感谢你们一路相伴相随，不抛弃不放弃，感谢你们一直以来对我的关系和照顾，让我度过了充实而愉快的大学生活！感恩生科院对我的栽培，感恩生科院各位领导、老师还有同学们从物质上和精神上给予我的支持和鼓励！