淀粉水解糖的制备
一实验目的：
（1）通过实验，了解淀粉糊化及酶法制备淀粉糖浆的基本原理；
（2）掌握淀粉酶解法制备淀粉糖浆的实验方法，
（3）熟悉淀粉水解产品的葡萄糖值测定方法。
一 实验原理
发酵生产中，部分产生菌不能直接利用淀粉。也基本上不能利用糊精作为碳源。因此，当淀粉作为原料时，必须现将淀粉水解成葡萄糖才能共发酵使用。在工业上将水解淀粉为葡萄糖的过程称为淀粉的“糖化”。可用来制备淀粉水解糖的原料很多，主要有山芋，玉米，小麦，等含淀粉的原料。水解淀粉为葡萄糖的方法有三种，即酸解法，酶解法，酶酸法及双酶法。本实验采用的是双酶法将淀粉水解成葡萄糖。首先利用的是α-淀粉酶将淀粉液化，转化为糊精及低聚糖，使淀粉可溶性增加；接着利用糖化酶将糊精及低聚糖进一步水解，转化为葡萄糖。
二 实验器材
1，实验材料
玉米粉 α—淀粉酶（2000u／g） 糖化酶（50000 u／g） 碘液（11g碘加22gkl，用蒸馏水定容至500ml）
2，仪器设备
恒温水浴槽 真空泵 抽滤纸及布氏漏斗 比色卡、
四实验方法：
淀粉在常温下不溶于水，但当水温至53℃以上时，淀粉的物理性能发生明显变化。淀粉在高温下溶胀、分裂形成均匀糊状溶液的特性，称为淀粉的糊化
淀粉糊化温度必须达到一定程度，不同淀粉的糊化温度不一样，同一种淀粉，颗粒大小不一样，糊化温度也不一样，颗粒大的先糊化，颗粒小的后糊化。
取50克淀粉置于400毫升烧杯中，加水200毫升，搅拌均匀，配成淀粉浆，用5% Na2CO3调节pH=6.2—6.3，加入1毫升5%CaCL2溶液，于90-95℃水浴上加热，并不断搅拌，淀粉浆由开始糊化直至完全成糊。加入液化型α---淀粉酶1克，不断搅拌使其液化，并使温度保持在70℃。然后将烧杯移至电炉加热到95℃至沸，灭活10分钟。过滤，滤液冷却到55℃，加入糖化酶1克，调节pH=4.5，于60-65℃恒温水浴中糖化3-4小时，即为淀粉糖浆，若要浓浆，可进一步浓缩。
三 操作步骤
50克淀粉置于400毫升烧杯中，加水100毫升，搅拌均匀，配成淀粉浆，用5% Na2CO3调节pH=6.2—6.3，加入1毫升5%CaCL2溶液，于90-95℃水浴上加热，并不断搅拌，淀粉浆由开始糊化直至完全成糊。加入液化型α---淀粉酶1克，不断搅拌使其液化，并使温度保持在70℃。然后将烧杯移至电炉加热到95℃至沸，
灭活10分钟。过滤，滤液冷却到55℃，加入糖化酶1克，调节pH=4.5，于60-65℃恒温水浴中糖化3-4小时，即为淀粉糖浆，若要浓浆，可进一步浓缩。
1，液化：称取50g玉米粉与烧杯中，加水至100ml，用纯碱调节PH到6.2-6.4，再加入适量的氯化钙。使钙离子浓度达到0.01mol╱L，并加入一定量的α-淀粉酶（控制5-8u╱g淀粉） ，搅拌均匀后加热至65℃，保温1.5h’左右，用碘液检验，达到所需的液化程度后升温到100℃，灭菌5-10min
2，碘液检验的方法：在洁净的比色卡上滴入1-2滴碘液，再滴待检的液化液，若反应液呈橙黄色或棕红色即液化完全。
3，糖化：将上述的液化液冷却至60℃，用10％柠檬酸调解PH至4.0-4.5按100u／g淀粉的量加入糖化酶，并于55-60％保温糖化至糖化完全。糖化结束后升温至100℃，灭酶5min。
4，糖化终点的判断：在150×15试管中加入10-15ml无水乙醇，加糖化液1-2滴，摇匀后若无白色沉淀形成表明已达到糖化终点。 5，过滤：将糖化液趁热用布氏漏斗进行抽滤即为水解糖液。