硝酸盐氮:麝香草酚法分光光度法
硝酸盐氮:麝香草酚法分光光度法
1. 基本原理
在浓硫酸存在下,麝香草酚与硝酸盐生成硝基酚化合物,在碱性溶液中发生分子重排,产生黄色化合物,该颜色在410~425 nm处有最大吸收。
2. 试剂
实验中所用试剂未加注明者均为分析纯, 所用水为去离子水或纯度相当的双蒸水。
⑴硝酸盐氮标准贮备溶液(1g/L)
称取7.218g 在105~110℃烘过1h 的硝酸钾,溶于纯水中,并稀释至1000ml 。加2ml 氯仿(三氯甲烷)作保护剂,此液1.00ml 含1.00mg 硝酸盐氮。
⑵硝酸盐氮标准使用液(10mg/L)
吸取5.00ml 硝酸盐氮标准贮备液于500ml 容量瓶中,加入纯水定容,此标准溶液1.00ml 含硝酸盐氮10.0μg 。
⑶1+4乙酸溶液
⑷氨基磺酸铵溶液
称取2g 氨基磺酸铵,用1+4乙酸溶液溶解并稀释为100ml 。
⑸0.5%麝香草酚乙醇溶液
称取0.5g 麝香草酚,溶于无水乙醇中并稀释至100ml 。
⑹硫酸-银硫酸溶液
称取1.0g 硫酸银溶于100ml 浓硫酸中,摇匀。(此溶液宜提前1—2d 配置) ⑺浓氨水(22-25%)
3. 测定步骤
⑴绘制校准曲线
a. 在一组7支50ml 比色管中,分别加入0、0.05、0.10、0.30、0.50、0.70和1.00ml 硝酸盐氮标准使用液,加纯水稀释至1.0ml 。
b. 向各管分别加入0.10ml 氨基磺酸铵溶液,摇匀,放置5min 。
c. 从管中央加入0.20ml 麝香草酚溶液(勿使沿管壁流下, 否则结果偏低),振荡后加2.0ml 硫酸-银硫酸溶液,摇匀后放置5min 。
d. 加8ml 纯水,混合后,缓慢加浓氨水至出现的黄色不再加深(达到最深)且氯化银沉淀溶解为止(约9ml 左右),加水使体积达25.0 ml。
e. 放置室温后,在波长415nm 处,用光程20mm 比色皿,以无氨水为参比,测量吸光度。绘制标准曲线,求得回归方程。
⑵测定水样
取水样1.00ml 于干燥的50ml 比色管中,然后按校准曲线绘制的相同步骤操作,测量吸光度。根据标准曲线的回归方程及公式计算水中NO 3--N 的质量。
硝酸盐氮(N ,mg/L)= m / V
m —测得水样中硝酸盐氮的质量(μg)
V —水样体积(ml)
本方法NO 3--N 浓度在0~15.0mg/L范围内与吸光度值呈良好的直线关系。最
低检测质量为0.25μg ,若取1.00 ml 水样测定, 最低检测质量浓度为0.25mg/L 。